АССОЦИИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ, АНАЭРОБНОЙ ДИЗЕНТЕРИИ И ИНФЕКЦИОННОЙ ЭНТЕРОТОКСЕМИИ ОВЕЦ И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЭТИХ БОЛЕЗНЕЙ Российский патент 1999 года по МПК A61K39/116 A61K39/07 A61K39/08 

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к производству и применению биологических препаратов для вакцинации сельскохозяйственных животных, и предназначается для одновременной специфической профилактики сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец.

Известна вакцина против сибирской язвы, представляющая собой суспензию живых спор бескапсульного авирулентного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ (ТУ 10-09-2-87 "Вакцина против сибирской язвы животных живая споровая лиофилизированная из штамма 55-ВНИИВВиМ", авторы: И.А. Бакулов, В.А. Гаврилов, В.В. Селиверстов).

Известна также вакцина против клостридиозов овец, представляющая собой сорбированные на геле гидрата окиси алюминия очищенные анатоксины Cl. perfringens типов C и Д, защищающая животных от анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии (К.Р. Ургуев, Л.В. Кириллов, Ф.И. Коган, Н.В. Морозова, Л. И. Сторожев "Полианатоксин для профилактики клостридиозов овец" - "Ветеринария", 1976 г., N 6, с. 47 - 50).

Существующие вакцины используются независимо друг от друга и их применение не может создать иммунитет у животных одновременно против сибирской язвы и клостридиозов. Кроме того, использование этих вакцин в отдельности требует удвоенного количества трудозатрат и оказывает более сильное стрессовое воздействие на организм животных.

Известна также ассоциированная вакцина против сибирской язвы и инфекционной энтеротоксемии овец (А. С. Орешкин, Ю.М. Горелов, Л.Д. Панкратов "Сухая ассоциированная вакцина против сибирской язвы и инфекционной энтеротоксемии овец, вызываемой Cl. perfringens типа "Д" - "Инфекционные болезни сельскохозяйственных животных", Новосибирск, 1988, с. 85 - 88), в состав которой входят живые споры сибиреязвенного вакционного штамма СТИ и очищенный анатоксин типа Д.

Недостатком данной вакцины является наличие в ее составе лишь одного компонента клостридий (анатоксина типа Д), создающего иммунитет только против инфекционной энтеротоксемии, а также использование сибиреязвенного вакционного штамма СТИ, который с 1990 года снят с производства и не применяется в биологической промышленности Российской Федерации для изготовления сибиреязвенной вакцины.

Предлагаемая ассоциированная вакцина против сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец устраняет недостатки описанных вакцинных препаратов.

Цель изобретения - изготовление ассоциированной вакцины против сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец, обладающей высокой иммуногенностью, ареактогенностью и безвредностью, и способ профилактики этих болезней.

Указанная цель достигается смешиванием в необходимых количествах моноанатоксинов Cl. perfringens типов C и Д нужной активности, добавлением к смеси необходимого количества спор вакционного сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ и введением ягнятам старше 3 месяцев и взрослым овцам полученной вакцины подкожно в область внутренней поверхности бедра в дозе 3,0 - 3,1 см³.

В результате проведенных экспериментов установлено, что предлагаемая ассоциированная вакцина против сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец, изготовленная из сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ и анатоксинов Cl. perfringens типа C штамм "BT" и типа Д штамм 91, создает у однократно привитых овец напряженный иммунитет к упомянутым инфекциям продолжительностью не менее 12 месяцев (срок наблюдения).

В экспериментах на овцах показано, что ассоциированная вакцина не уступает по иммуногенности сибиреязвенной моновакцине из штамма 55-ВНИИВВиМ. Выживаемость животных, зараженных вирулентным штаммом N 76 возбудителя сибирской язвы через 12 месяцев после вакцинации, составила в обоих случаях 100% (табл. 1).

Проверку иммунитета на клостридиозы (анаэробная дизентерия и инфекционная энтеротоксемия) проводили в реакции нейтрализации на белых мышах с сыворотками крови овец и токсинами типов C и Д, результаты оценивали по величине титра антитоксических антител.

Сравнительная оценка напряженности иммунитета у овец к клостридиозам после прививки ассоциированной вакциной и бивалентным анатоксином показала преимущество предлагаемой ассоциированной вакцины. Титры антител в крови животных, иммунизированных ассоциированной вакциной, составляли 0,2 - 0,5 антитоксических единиц (AE), тогда как при введении бивалентного анатоксина Cl. perfringens уровень антитоксических антител не превышал 0,04 - 0,06 AE (табл. 2).

Таким образом, при введении овцам ассоциированной вакцины создается иммунитет как против сибирской язвы, так и против анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии длительности не менее 12 месяцев (срок наблюдения).

При использовании ассоциированной вакцины максимальный уровень защиты овец от заболевания анаэробной дизентерией и инфекционной энтеротоксемией (100%) отмечен при исходной активности анатоксина типа C - 100 - 150 единиц связывания (ЕС), анатоксина типа Д - 60 - 80 ЕС и последующем смешивании их в вакцине в соотношении 3:2. При более низкой активности анатоксинов уровень защиты овец недостаточен.

Для профилактики сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии у овец ассоциированную вакцину вводят ягнятам старше 3 месяцев и взрослым животным подкожно в область внутренней поверхности бедра в дозе 3,0 - 3,1 см³.

Эффективность предлагаемой ассоциированной вакцины подтверждена комиссионными испытаниями, проведенными на 864 овцах в Карабудахкентском районе Дагестана. Осложнений после вакцинации животных не отмечено. Показано, что животные, привитые ассоциированной вакциной, противостояли заражению через 12 месяцев после иммунизации пятикратной смертельной дозой вирулентного штамма N 76 возбудителя сибирской язвы при 90%-ной гибели контрольных (непривитых) животных. Проверка иммунитета на анаэробную дизентерию и инфекционную энтеротоксемию показала высокий уровень антитоксических антител в сыворотке крови привитых животных, обеспечивающий иммунитет.

Следовательно, ассоциированная вакцина против сибирской язвы и клостридиозов овец является иммуногенным препаратом, способным защищать животных одновременно от сибирской язвы, анаэробной дизентерии иинфекционной энтеротоксемии. Ассоциированная вакцина безвредна и ареактогенна для лабораторных и сельскохозяйственных животных, создает иммунитет продолжительностью не менее 12 месяцев (срок наблюдения).

Использование ассоциированной вакцины в ветеринарной практике дает возможность сократить число профилактических прививок и тем самым уменьшить уровень стрессового воздействия на организм животных, а также вдвое снизить себестоимость и трудоемкость вакцинации животных.

Пример 1.

Ассоциированную вакцину против сибирской язвы, анаэробной дизентерии инфекционной энтеротоксемии овец готовят следующим образом:
К 58 см³ сорбированного на геле гидрата окиси алюминия моноанатоксина Cl. perfringens типа C с активностью 100 - 150 ЕС в 1 см³ добавляют 38 см³ сорбированного моноанатоксина Cl.perfringens типа Д с активностью 60 - 80 см EC в 1 см³. Смесь перемешивают. Затем к бивалентному анатоксину добавляют 1,0 см³ спор сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ с концентрацией (3 - 4)•10⁸ в 1 см³, доводят объем физиологическим раствором до 100 см³ и тщательно перемешивают.

Вакцина представляет собой однородную суспензию бежево-коричневого цвета, при хранении на дне флакона образуется рыхлый осадок, который при встряхивании разбивается в однородную взвесь.

Пример 2.

Ассоциированную вакцину применяют для профилактических и вынужденных прививок овец против сибирской язвы, анаэробной дизентерии инфекционной энтеротоксемии. Молодняк, не достигший 3-месячного возврата, прививать ассоциированной вакциной не рекомендуется. Животным вакцину вводят подкожно в область внутренней поверхности бедра в объеме 3 см³.

Изобретение предназначено для одновременной специфической профилактики сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец. Для приготовления вакцины используют сибиреязвенный штамм 55-ВНИИВВиМ и моноанатоксины Cl.perfringens типов С и Д. Вводят вакцину ягнятам старше 3 месяцев и взрослым овцам подкожно в область внутренней поверхности бедра в дозе 3,0-3,1 см³. Ассоциированная вакцина создает иммунитет у привитых овец одновременно против сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии длительностью не менее 12 месяцев, при этом по иммуногенности не уступает моновакцине против сибирской язвы и превосходит бивалентный анатоксин Cl.perfringens. 2 с.п.ф-лы, 2 табл.

1. Ассоциированная вакцина против сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец, отличающаяся тем, что она содержит суспензию жизнеспособных спор сибиреязвенного вакцинного штамма 55-ВНИИВВиМ в исходной концентрации (3 - 4) • 10⁸ спор в 1 см³ и анатоксины Cl.perfringens типов C с исходной активностью 100 - 150 ЕС в 1 см³ и Д с исходной активностью 60 - 80 ЕС в 1 см³ и физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Споры сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ с исходной концентрацией (3 - 4) • 10⁸ спор в 1 см³ - 1,0 - 1,1
Анатоксин Cl.perfringens типа C с исходной активностью 100 - 150 ЕС в 1 см³ - 58,0 - 59,0
Анатоксин Cl. perfringens типа Д с исходной активностью 60 - 80 ЕС в 1 см³ - 38,0 - 39,0
Физиологический раствор - Остальное
2. Способ профилактики сибирской язвы, анаэробной дизентерии и инфекционной энтеротоксемии овец, отличающийся тем, что ягнятам старше 3 месяцев и взрослым животным вводят подкожно в область внутренней поверхности бедра 3,0 - 3,1 см³ ассоциированной вакцины, содержащей, мас.%:
Споры сибиреязвенного штамма 55-ВНИИВВиМ с исходной концентрацией (3 - 4) • 10⁸ спор в 1 см³ - 1,0 - 1,1
Анатоксин Cl.perfringens типа C с исходной активностью 100 - 150 ЕС в 1 см³ - 58,0 - 59,0
Анатоксин Cl. perfringens типа Д с исходной активностью 60 - 80 ЕС в 1 см³ - 38,0 - 39,0
Физиологический раствор - Остальное