Способ получения антигипоксического средства в липосомальной форме Советский патент 1991 года по МПК A61K9/127 

Изобретение относится к медицине и касается способа получения антигипоксиче- ского средства в липосомальной форме.

Целью изобретения является повышение стабильности целевого продукта.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Спиртовый раствор природного и/или синтетического фосфатидил- холина высушивают в вакууме или атмосфере инертного газа (гелий, аргон, азот) при 30-40°С до получения тонкой ли- пидной пленки.

Полученную пленку фосфолипида эмульгируют в водной среде - очищенной (бидистиллированной) и стерилизованной воде при соотношении фосфолипид-среда эмульгирования 1.40. Эмульсию насыщают инертным газом и обрабатывают ультразвуком в течение 40 мин при частоте 44 кГц, получая суспензию с размером дисперсных частиц-липосом около 50 нм. Полученную суспензию подвергают стерилизующей фильтрации через пористый фильтровальный материал с размером пор 0,15 - 0,22 мкм, например нитроцеллюлозу. Далее в асептических условиях во флаконы разливают по 20,0 мл суспензии из расчета 500,0 мг фосфолипида на дозу. Суспензию во флаконах подвергают интенсивному замораживанию до -70°С, помещая флаконы в жидкий азот. Затем проводят лиофильную (сублимационную) сушку препарата, постепенно повышая температуру в течение 72 ч, что необходимо для полного удаления влаги и перехода липосом в жидкокристаллическое состояние Сразу после сушки флаконы с препаратом продувают инертным газом, в атмосфере которого осуществляют также закупорку и герметизацию флаконов в асептических условиях.

В примерах 2-5 операции и приемы осуществляют в порядке, изложенном в примере 1. Изменения отражены в табл. 1.

Перед применением препарата его суспендируют стерильным физиологическим раствором либо водой из расчета 10,0 мл на флакон.

Размер липосом и лечебный эффект ли- посомального препарата, полученного по предлагаемому способу, следующие.

1. Размер липосом

С/

С

о о

3 СО 4 СО

ее

Для контроля размера липосом был использован метод лазерной корреляционной спектроскопии. Измерение размера липо- сомальных частиц в суспензии проводили на спектрографе Мелверн 4800 (Англия). В экспериментах сравнивали размер липосом в исходном препарате перед лиофильной сушкой и после ресуспендирования препаратов липосом, лиофильно высушенных традиционным и предлагаемым методами (табл. 2).

2. Лечебный эффект липосомальчого препарата, полученного по предлагаемому способу.

Для подтверждения лечебного эффекта липосомального препарата, полученного по предлагаемому способу, были проведены опыты в условиях экспериментально1 пневмонии. Препарат липосом вводили ингаляторно в дозе 2 мг/100 г массы животных. Результаты проведенных опытов представлены в табл. 3.

Как видно из представленных результатов, уже после второй ингаляции наблюдается значительная нормализация напряжения кислорода в артериальной крови. Содержание молочной кислоты при этом достоверно снижается, что приводит к ликвидации лактатацидоза и нормализации рН крови. Ингаляторное введение липосом способствует значительному снижению уровня малонового диальдегида в крови, что свидетельствует о подавлении процессов перекисного окисления у животных с зкспе0

5

0

5

0

с;

риментзльной пневмонией. Последующие ингаляторные введения липосом способствуют дальнейшей нормализации как напряжения кислорода, так и кислотно-основного состояния крови.

При рентгенологических исследованиях было обнаружено, что использование препарата липосом, полученных по предлагаемому способу, позволяет значительно ускорить сроки рассасывания очага пневмонии. Таким образом, полученные данные по- зволяют однозначно заключить, что препарат липосом обладает выраженной лечебной активностью. Подобные результаты, показывающие антигмпоксический эффект, были получены и на других моделях гмпоксических состояний.

Полученное средство является стабильным, в то время как средство, полученное по прототипу, не может храниться более двух часов.

Формула изобретения Способ получения антигипоксического средства в липосомальной форме путем высушивания фосфатидилхолина, его эмульгирования в водной среде, ультразвукового воздействия, отличающийся тем, что, с цепью повышения стабильности целевого продукта, эмульгирование проводят в водной среде в соотношении 1:(20-40) и после ультразвукового воздействия целевой продукт подвергают стерилизующей фильтрации и лиофилизируют.

Т а 6 л и ц а 1

Изобретение относится к медицине и касается способа получения антигипоксиче- ского средства в липосомальной форме. Целью изобретения является повышение стабильности целевого продукта. Способ осуществляется путем высушивания фосфа- тидилхолина, его эмульгирования в водной среде в соотношении 1:20 - 40, ультразвукового воздействия, стерилизующей фильтрации и лиофилизации 3 табл

Таблица.

Размер липосом, им ЗЮ+23Г-78+55 105+31

Таблица 3