Способ определения токсичности жидкости Советский патент 1992 года по МПК G01N33/52 

Изобретение относится к медицине, к определению токсичности жидкостей.

Цель изобретения - упрощение способа .

На чертеже приведен график, иллюстрирующий предлагаемый способ.

Пример 1. Приготовляют испытуемую пробу. К 5 мл изотонического раствора исследуемой пробы добавляют эритроцитарную массу в количестве 50 мкл.

Затем приготовляют контрольную пробу. К 5 мл чистого изотонического раствора (физиологический раствор, приготовленный на бидистиллириванной воде) добавляют 50 мкл эрнтроцнтапноп массы.

Тзт .т проОн инк у мнпумт 15 мин при температуре 23 С.

После инкубиронання взнеси эритроцитов в контрольной и исследуемой

пробах эритроциты выделяют из растко- ров посредством центрифугирования в течение 10 мин при ускорении 5 р,. После центрифугирования надосадочную гсид- кость в обеих пробах удаляют и доливают чистый фнзиолопгческий раствор до прежнего объема.

Затем 1 мл контрольной пробы поме |цают в кювету-для спектрофотометрии и нагревают до 58°С, измеряют величину пропускания Т (} луча света (ПРИ длине волны 670 нм) через кювету с пробой до момента полного гемолиза. Полученные данные регистрируют, например, в виде графика зависимости величины пропускания Т от времени термического воздействия на эритроциты.

Аналогичные действия проводят с исследуемой пробой.

о

-si

ел со

Затем определяют ЕТ50 (опыт) и ЕТ50 (контроль) - время, в течение которого происходит гемолиз 50% эритроцитов в растворе. Графически эта величина представляет собой проекцию инфлексной точки кривой, отражающей функциональную зависимость величины пропускания Т от времени на ось абсцисс.;

Относительную токсичность S исследуемой жидкости определяют по формуле -ЕТ50 опыт

;

75374

,

(предлагаемым) тестами для некоторых веществ.

Статистический анализ показал, что 5 между значениями ЕТ50, полученными этими двумя тестами для веществ, приведенных в таблице, существует прямая сильная корреляция (,99), т.е. результаты предложенного теста хорошо Ю сопоставимы с известными и достаточно распространенными методами определения токсичности воды, а главное, по чувст- вительности не уступают таковым.

Изобретение относится к медицине, в частности к определению токсичности воды. Целью изобпетения является упрощение способа. Это достигается TeMs что в качестве тест-объекта используются эритроциты, которые после инкубации в изотонических растворах эталонной и исследуемой гладкостей выдерживают до полного гемолиза при 55-65 С, измеряя оптическую плотность обеих проб. Затем по полученным данным находят время ЕТ50, в течение которого разрушается 50% эритроцитов4 а относительную токсичность исследуемой кости определяют по формуле. 1 ил.

ЕТ50 контроль где ЕТ5С)ОПЬГТ - время гемолиза полови-15 Формула изобретения

ны эритроцитов в конт- Способ определения токсичности жид- рольной пробе;

ЕТ50 КОНТр0дЬ - время гемолиза полови- .--ны эритроцитов в исследуемой жидкости. д) отличающийся тем, что, Относительная токсичность S в дан- с целью упрощения способа, в качестве ном примере согласно приведенной выше тест-объекта используют суспензию эри- формуле равна

Н§Н- .«Значения ET50onbrr (980 с) и ЕТ50 контроль (400 с) взяты из графика проведенного исследования.

В таблице приведены сравнительные

кости путем иякубирования тест-объек- , та в исследуемой и контрольной жидкостях с последующей спектроскопией,

троцитов в изотоническом растворе, инкубируют при 55-65 С, измеряют оптичес кую плотность обеих проб во время гемолиза, определяют время разрушения 50% эритроцитов в обеих пробах и по отношению времени разрушения 50% эритроцитов в опытной и контрольной

результаты определения ЕТ50 митохонд- 30 пробах рассчитывают относительную ток- риальным (известным; и эритроцитарным сичность исследуемой жидкости.

Способ определения токсичности жид-

отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве тест-объекта используют суспензию эри-

кости путем иякубирования тест-объек- , та в исследуемой и контрольной жидкостях с последующей спектроскопией,

отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве тест-объекта используют суспензию эри-

троцитов в изотоническом растворе, инкубируют при 55-65 С, измеряют оптическую плотность обеих проб во время гемолиза, определяют время разрушения 50% эритроцитов в обеих пробах и по отношению времени разрушения 50% эритроцитов в опытной и контрольной

r%

90

50-