Способ получения пролинсодержащего эфира 4-фенилбутилфосфоновой кислоты Советский патент 1992 года по МПК C07F9/38 A61K31/675 A61P9/12 C07F9/40 C07F9/572 

изобретение относится к химии фосфорорганических соединений с С-Р связью, а именно к способу получения нового пролинсодержащего эфира 4-фенилбутилфосфоновой кислоты формулы

. NHj

О 2 f CeHs-CCHjVP-О- СН -C-N--I-COOHI он (S) О (L)

.который обладает ангистензивной активностью, конвертирующей заторможенную активность энзима, и может быть использовано в качестве антигипертензивного средства в медицине.

Известны пролинсодержащие фосфиновые кислоты или их эфиры, или соли которые обладают антигипертензивной активностью. Наиболее близкими к описываемому соединению по структуре и назначению являются пролинсодержащие эфиры фосфоновых кислот общем формул

(II)

О R, О

г, I I f

RrP-O-CH-C-N-f COOR, ,

Н

ОНд (S)

(U где R и незамещенный или замещенный ал кил, R, и R водород или катион металла , которые обладают высокой антигипертензивной активностью. Целью изобретения является получение нового пролинсодержащегр эфира if-фенилбутилфосфоновой кислоты форму лы (I), который обладает более высокой антигипертензивной активностью, чем известные структурные аналоги.

Поставленная цель достигается опи сываемым способом получения соединения формулы (I) , который заключается в том, что -фенилбутилфосфонистую кислоту формулы20

CjHs-CCH VP-OCH-K (CHjl -NHCiOlOCH CgHj НО-СН С-Я-С-ОСНАН о/ Н о (L) в. присутствии дициклогексилкарбоди-. имида и Н,Н-диметиламинопирияина, образующийся пролинсодержащий эфир 4-фeнилбyтилфocфoниcfoй кислоты формулыП

CeHslCHi)- подвергают взаимодействию с бензиловым эфиром N-замещенного пролина формулыг 14 -/ГН 1 -Р Wn г водородом в присутствии катализатора палладия на угле, Часть молекулы пролина в продуктах (l) по способу согласно данному изобретению имеет L-конфигурациЮо В описанном выше процессе в качестве исходных продуктов могут использоваться рацематы, энантирмеры или диастереомеры. Полученные диастереомерные продукты могут быть разделены методами хроматографии или фракционной крис таллизацией. Асимметрический центр в бЬковой цепи соединений формулы I имеет (3).-конфигурациЮс Целевые продукты формулы I могут быть превращены в соответствующие двойные соли путем обработки дикислот солеобразующими реагентами, Соедине-OCH G.Hj С-ОСН,СбН5 U О (L) окисляют периодатом натрия с послеДУЮЩИМ гидрогенолизом образующегося -,. фосфоната формулы , . , (0)-OCH,C,H. Г-ОГМ г Н V о (L) ния ряда двойных солей включают фармацевтически приемлемые соли, такие, как соли натрия, калия, лития и кальция. Дикислотный продукт может быть обработан гидроксидом лития, гидроксидом натрия, гидроксидом калия или гидроксидом кальция с образованием требуемого продукта - двойной соли. Конечные продукты формулы (II), включая их фармацевтически приемлемые соли, могут использоваться в качестве антигипертензивных агентов. Действие энзима на ангиотензиноген. псевдоглобулин в плазме крови продуцирует ангиотензин I. Ангиотензин I превращается под действием аигиотензивного энзима (АСЕ) в ангиотензин II, Последний является активным веществом, понышающим кровяное даг ление, и-може быть применен в качестве, факторного агента при некоторых формах гипертонии к различным млекопитающимся, .например к людям. Конечные продукты формулы (II) включаются в после,,овательность ангиотензиноген (peiнин) - ангиотензин I --« ангиотензин II путем ингибирования ангиотензивного превращающего энзима и восстановления или .элиминирования образования ангиотензина II, который, является веществом, повышающим кровяное давление. Таким образом, применение композиций, содержащих один или комбинацию из конечных продуктов формулы (II), облегчает ангиотензивно зависимую форму гипертонии для некоторых типов млекопитающиЯся (например, людей).;-,, Установлено, в частности, что про дукт формулы (I) применим в качестве орального антигипертензивного агента Высок уровень применимости при браль ном использовании на тестовых животных. Таким образом, одна или две - четыре принимаемые ежедневно орально дозы, рассчитанные на основании примерного соотношения 0,5 - 10 мг соединения формулы I на килограмм веса в день, предназначена для восстанов ления кровяного давления. Соединение формулы (I) можно также комбинировать с диуретином при лечении гигтертонии. Комбинированные про:дукты, содержащие соединение формулы 1 и диуретин, при необходимости могут быть рекомендованы млекопитающим в значительном количестве, которое составляет общую дневную порцию примерно 30 - 600 мг, преимущественно 30 330 мг соединения формулы I и примерно 15 - 300 мг, преимущественно 15 200 мг, диуретина. Примером диуретина предлагаемого для использования в комбинации с соединением (I), является тиазидныи диуретик, например , хлортиазид,, - гидрохлортиазид, флуметиазид, гидрофлуметиазид, бензофлуметиазид,метилхлортиазид,трихлорметйазид, политиазид иЛи бензтиазид, а также этакриновая кислота, тикринафен, хлорталидон, фуросемид, мусолимин, биметанид, триамтерен, амидорид или спиронолектон, или соли этих соедине112 Соединение формулы I может быть использовано для восстановления кровяного давления в композициях, таких, как таблетки, капсулы или эликсиры, для орального приема или как стерильные растворы и суспен;зии для парентерального введения. Примерно 10 - 500 мг соединения формулы I соединяется с физиологически приемлемым носителем, наполнителем, инертным наполнителем, связывающим веществом, консервирующими средствами, стабилизатором, отдушкой и т.д. b единую дозировочную форму, как это принято в фармацевтической практике. Количество активного вещества в этих композициях или препаратах является таким же, как и приемлемая дозировка в пределах, указанных выше. Следующие примеры иллюстрируют изобретение, П р и м е р 1. (5)-1- б-амино-2- гидpoкcи/A-фeнилбyтил/фocфoнилJ-окси1-1-оксогексил/-Ъ-пролин. А). (А-Фенилбутил) фосфонистая кислота К суспензии гидрата гипофосфита натрия (60 г, 0,566 ммоль) в абсолютном этаноле (600 мл) добавляют концентрированную серную; кислоту (15 мл) А-фенил-1-бутен (25,0 г, 0,189 ммоль) и 2,2-азобисизобутиронитрил (3,0 г). Полученную смесь кипятят в течение 6 ч, добавляют вторую порцию 2,2-азобисизобутиронитрила (2,0 г) и 1б ч. Охлаждополнительно кипятят денную смесь фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток суспендируют в воде (200 мл), подщелачивают до щелочной реакции раствором гидроксида натрия и промывают двумя порциями диэтилового эфира (200 мл). Водную фазу подкисляют концентрированной серной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Экстракт с этилацетатом промывают насыщенным хлоридом натрия,. сушат ь1ад безводным сульфатом натрия.и упаривают, получая г сырой (4-фенилбутил)фосфонис той кислоты. Эту сырую кислоту (3,5 г) переносят в этиловый эфир (200 мл) и обрабатывают раствором адамантанамина (26,3 г, 0, ммоль) в этиловом эфире (200 мл). Белый осадок отделяют, промывают этиловым фиром и сушат в вакууме, получая ,2 г соли ( -фенилбутил) фосфонистой кислоты и 1-адамантанамина в виде белого твердого вещества; т.пл. 192-200 С, Соль 1-адамантанамина (10,5 г) переносят в смесь этилацетата и 1 и. соляной кислоты (150 мл каждого компонента), Этилацетатную фазу/промывают 1 н. соляной кислотой и Насыщенным хлоридом натрия, сушат над безводным хлористым натрием и упаривают, получая 5,75 г чистой (А-фетилбутил) фосфонистой кислоты в виде бесцветного вязкого масла„ тех (силикагель; изопропанол:концентрированный аммиак;вода 7t2:l).5 Rf 0,67. Выход 96,

Б), Соль 1 адамантанамина и фенилметилового эфира 1-(S)-6- /фенилметокси/карбонил аминоЗ -2 гидрокси/ l-фeнилбyтил/фoc4)oнилJoкcиJ-1 -оксо гексилТ-L-пролина .

Раствор (- фенилбутил) фосфонистой кислоты (0,67 г5 3,38 ммоль) и фенилметилового эфира 1-(з)-6- Х/фенилметокси/карбонил амино |-2-гидрокси-1-01 согексил | Ь-пролина (1,0 г; 2,1Л ммоль) в сухом тетрагидрофуране (8,0 мл) обрабатывают дициклогексилкарбодиимидЬм (0,67 г; 3j25 ммоль) и диметиламинопиридином (о, 1 г) и перемешивают при комнатной температуре под аргоном. Спустя 2 ч смесь фильтруют, разбавляют этилацетатом и промывают последовательно бисульфитом калия, насыщенным -бикарбо HatoM натрияS насыщенным Ялоридом натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.

Оста-ток фильтруют через слой силикагеля (Sili CAR СС7, 10 г), элюируя смесью ацетонзгексан (1:1). Фракции, .содержащие продукт, объединяют и упаривают, получая 1,2 г фенилме тилоеого эфира 1-(S) /фенилметокси/карбонил аминс 2- /4-фенил бутилфосфоиил/оксиЗ 1 оксогексил t-пролина в виде бесцветного масла, тех (силикагель, ацетонzreKcaH, 1;l) R 0,18,

Описанный выше фенилметиловый эфи (1,А2 г) переносят в диоксан (10 мл) обрабатывают раствором периодата натрия (0,5 г, 2,3 ммоль) в воде (6 мл перемешивают при комнатной температуре 1б ч. Оранжевую смесь переносят в смесь этилацетата - 1 -ного раствора бисульфита калия. Органическую фазу промывают водой, разбавленным j

бисульфитом натрия-и насыщенным хлоридом натрия, сушат над безводным сульфатом натри Г и упаривают. Сырой продукт переносят в небольшое количество этилацетата (около 5 мл), разбавляют этиловым эфиром (около 20 мл и обрабатывают раствором 1-адаман- танамина (0,3 г, 2,25 ммоль) в этиловом эфире ( мл)о Белый осадок отделяют, промывают этиловым эфиром и сушат в вакууме, получая 1,5 г соли 1-адамантанамина и фенилметилового эфира 1-f(s)-6- /фeнилмeтoкcи/кapбoнилJaминoЗ-2- f гидрокси/4-фенилбутил фосфонил оксиД-1-оксогексилД Ь-пролина в виде белого твердого вещества, т.пл. 129-ЙО С. ТСХ (силикагель; уксусная кислота:метанол: :хлористый метилен 1:1:20), R/ 0,2 (свободная кислота). Выход 86

В). (з)-1- 6-Амино-2- гидрокси/ -фенилбутил/-фосфонилокси2 1 -оксогёксил Ь-пролин.Соль 1-адамантанамина из части (Б) (0,8 г , Oj98 ммоль) переносят в смесь этилацетата и 1 н. соляной кислоты (20 мл каждого компонента). Этилацетатный слой промывают 1 н. соляной кислотой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток переносят в метанол (8,0 мл), обрабатывают катализатором - 10%-ным палладием на угле - (0,1 г) и перемешивают в атмосфере водорода (из баллона) в течение 1,5 м. Смесь фильтруют через цеолит и упаривают досуха Осадок переносят в воду и фильтруют через поликарбонатный фильтр для удаления следов дициклогексилмочевины. Упаривание элюентов дает 0,А1 г (S)-1 -f6-aMHHo-2-f гидрокси/«-фенилбутил/фосфонилокси -1 -оксо-гексил -L-пролина в виде белого твердого вещества; т«пЛь 160-175 С после растирания в ацетонитриле. Вещество кристаллизуют из смеси.вода-ацетонитрил, т, пл. 18 7 -192° С (разложе ние); LJ -«6,7°С (с 5,05, метанол). ТСХ (силика гель, изопропанол:аммиа k:вола 7;2:1), R 0,24. Выход 95.

ВычисленоД: С 55,67, Н 7,65, R: 6,18; Р 6,8«t.

f 2 K35N20gPO7H20 ЙайденоД: С 55,67J Н 7,76; К 6,28- Р 6,55. у в экспериментах in vitro и in vi изучена ингибируйщая активность ангиотензин-трансформируюшего фермент соединений (см. табл. 1 и 2): Соединения были подвергнуты испы танию in vitro на ингибиторную активность ангиотензйн-трансформирую цего фермента (АСЕ), определена кон центрация соединения, необходимая д ингибирования АСЕ, полученного из кроличьего легкого при 50 So. АСЕ-активность определяли как cfeпень получения гиппуровой киcлotь. из синтетического соединения гиппурил-гистидил-лейцин. К реакционным смесям фермента добавляли серийные разведения раствора, содержащего АСЕ-ингибитор. Ijo -величины определ ли графически из графиков зависимое ти ферментной активности от концентраций ингибитора АСЕ, Результаты испытаний:

СоединениеI c

2949694

29907180

.301403800

30139640

2964416

29852 36

29651106 29866190 29898190 3017814

29652106 2968785 2988924 3032927 2986536 Соединения подвергали испытанию

in vivo на крысах с нормальным кровяным давлением. Ангиотензин I, вводимый внутривенно, повышает кровяное давление вследствие превращения его в ангиотензин II посредством ангиотензин-трансформирующего фермента (АСЕ).. Ингибирование АСЕ выражается ослаблением вазопрессорного ответа ангиотензина I после введения соединения.

В табл. 3 и 4 представлены результаты, полученные после внутривенного и перорального введения испытуемы соединений. Дозы выбирали так, чтобы получить эквимолярные количества испытуемых соединений для устранения разности, обусловленной разностью молекулярных масс. Ингибирование ваметры для R, R, R и Ri}., являются

по своей природе активными ингибиторами ангиотензин-трансформирующегр фермента; соединения, в которых R является аминобутилом, т.е. (CE), являются активными in vitro как после внутривенного, так и

0 после перорального введения. Однако соединения, в которых R является алкилом или фенилэтилом, являются либо неактивными in vitro, либо имеаот 5 значительно более низкий уровень активности.

Соединения, где R является амйно- бутилом, а R,-фенилбутилом, т.е. SQ 29852 и его двулитиевая соль

0 SQ 29644, являются наиболее активными после перорального введения а соответствующих дозах.

На основании указанных данных можно заключить, что SQ 29852 и его соли

5 обладают более высокой ингибирукхчей активностью по отношению к ангиотеИзин-трансформирующему ферменту по сравнению с другими типами этих сЬединений, где R является аминобутилом. Формула и 3 о б р е т е н.и.я,,.. Способ получения пролинсодержащегд эфира 4-фенилбутилфосфоновой кислоты; формулы

О

СбНг(СН2)4-Р-0ОН2 зопрессорной реакции ангиотензина I выражалось в процентом отношении ответной реакции к ангиотензину 1 полученному перед введением испытуемого соединения, и измерялось с регулярными интервалами в течение трехчасового периода после введения испытуемого соединения. Максимальное ингйбирование в процентном содержании, наблюдаемое в течение указанного периода, представлено в табл. 3 и 4 в виде чисел от О до 100. Усреднение выполняли по результатам, полученным по каждому соединению, по крайней мере, для четырех крыс. Для соединений, испытываемых с несколькими дозами, наблюдалось повышение уровней ингиби- , рования с повышением количества вводимого соединения. Указанные данные подтверждают, что испытуемые соединения формул (I) и (II), имеющие перечисленные параIN Пл I (РН ) jXX. -CH-C-N-f-COOH (S) 0 (L) заключающийся в том, что -фенилбутил фосфонистую кислоту формулы СсНе (СНл)- Р- ОС. j подвергают взаимодействию с бензиловы эфиром N-замещенного пролина формулы (ГНЛ--МНГГтПГН Р W UUJUtH2tgHg НО-СН , Y JN I V Uvn2V/5 5 Д . тт f К.в присутствии дициклогексилклрбодиимида и Ы,Н-диметиламинопиридиня , образующийся пролинсодержащий эфир с фенилбутилфосфонистой кислоты форму5j y , у(СВДНС(0)-ОСН,С,Н, | -C-N--fC-OCH С Н Н О (П окисляют периодатом натрия с последующим гидрогенолизом, образукнчегося , фосфоната формулы м20 л .-(CHj)4NHC(0)-OCH,C,H5 c,H,-(CHjVp-ocH-/ / 25и - - -4с-осн,сл о о (L) водородом в присутствии катализатора палладия на угле. -О-СН-С-кО-СООВ,Таблица 1 .-о

примечание. .Соединение SQ не испытывали in vivo, так как

его активность in vitro были слишком низкой. Эти, ве личины для соединения 2Э907 рассматривались, как не имеющие активности в пределах эксперимента. ISГ709912 Максимум ингибирования в процентах при введении Примечание, Соединенд я SQ 29907 и 30139 не испытывались при пероральном введении, так как при парентеральном введении они показали низкий уровень активности.. Соединение SQ 29651 не испытывалось при пероральном введении, но ожидается, что уровень его активНости будет соответствовать уровню активности 29652.. Таблицу /t пероральном