Штамм бактерий РSеUDомоNаS pSeUDoaLcaLIGeNS используемый для очистки сточных вод от нитрила акриловой кислоты Советский патент 1992 года по МПК C12N1/20 C12S13/00 

MnKpoopraHufaMOB использовать для своего метаболизма органические соединения в качестве единственного источника углерода и азота.

Известен штамм Arthrobactersp 1-9, который может утилизировать 0,8 г/л, акрилонитрила за 48 ч. Другой штамм Arthrobacter sp. Y-1 утилизирует 0,8 г/л НАК за 42 ч.

Однако продукты реакции - акриловую кислоты и аммоний штамм не метаболизирует.

Известна ассоциация, состоящая из бактерий Arthrobacter sp. Psgudomonas sp., Azotobacter sp. и др, способная к биодеградации 0,12 г/л акрилонтрила.

Основным недостатком указанных штаммов и ассоциации является низкая биодеструктивная активность, отсутствуют данные об их использовании для очистки сточных вод.

Целью изобретения является получение штамма с высокой деструктивной активностью, способного деградировать акрилонитрил в промышленных сточных водах.

Штамм Pseudomonas pseudoalcaligeus КМ-6П ВКПМ В-4418 выделен из почвы Саратовского производственного объединения Нитрон методом накопительной культуры с использованием в качестве единственного источника С и N нитрила акриловой кислоты.

Штамм депонирован в центральном музее промышленных микроорганизмов ВНИИ генетики и селекции промышленных, микроорганизмов; имеет коллекционный номер В-4418 и характеризуется следующими свойствами.

Морфологические признаки. Молодые Клетки имеют форму палочек, расположенных беспорядочно, размножаются простым делением. Размер клеток 0,9-1-3-4/г. Грамнегативные. Спор и капсул не образуют, включений не содержат, подвижные, монотрихи. Культуральные свойства: г рототроф, аэроб. Растет в интервале температур 5-37°С, оптимум роста 28-30°С, при 42°С рост отсутствует. Оптимальным значением рН для роста и деструктивной .активности заявляемого штамма является рН 7,2±0,2. Минимальное значение рН 5,8, максимальное значение рН 9,4. На мясопентонном агаре колонии круглые, диаметр 3-3,5 мм, непигментированные, край ровный, поверхность гладкая, блестящая, полупрозрачная и в проходящем свете. На МПБ равномерное помутнение.

Биохимические свойства. Оксидазо-каталазопозитивен. Желатиназу, фенилаланин, дезаминазу, лецитиназу, уреазу.

дезоксирибонуклеазу, аргинингид ралазу, декарбоксилазу, лизина и орнитина не образует. Тесты на OF-среде с глюкозой, сахарозой, арабинозой, лактозой, инозитом,

адонитом - от1рицательные, ксилозой, мальтозой, рамнозой, сорбитом, дульцитом, маннитом инозитом, адонитом - отрицательные, индол и сероводород не образуют. Не вызывает гидролиз крахмала

0 и гемолиз эритроцитов. Не образует пигментов на средах Кинг А и Кинг В. Утилизирует малонат цитрат, ацетант, акрилат натрия или аммония.

Отношение к антибиотикам.

5 Штамм устойчив к ампициллину, бензилпенициллину, гентамицину, левомицетину, линкрмицину, метициллину, метранидазолу, мономицину, неомицину, олеандомицину, ристомицину, рифампици0 ну, стрептомицину, сйзамицину, фузИдину, эритромицину.

Штамм чувствителен к доксициллину, канамицину, карбенициллину, оксициллину, офлоксазону, полимиксину, т трацикли5 ну, налидиксовой кислоте.

Штамм растет при активности воды от 0,998 до 0,6.

Культура растет на полноценной питательной среде при концентрации ,5%.

0 Генетические особенности. Содержаг ние Г + Ц в ДНК - 64,4% определено методом тепловой денатурации. Идентификация штамма подтверждена определением степени гомологии ДНК эталонного штамма и

5 штамма PS. pseudoalcallgens КМгбп.

Патогенность штамма. Белым мышам интрапери.тонеальнр вводили взвесь бакт рий2 16 xл/мл. Отсутствие признаков заболевания в течение всего срока наблюдения (15 сут.), отсутствие роста при посеве , крови и материала из паренхиматозных органов (печень, почки, селезенка) позволяют считать культуру КМ-6п-авирулентной.

П р и м е р 1. Выделение штамма КМ5 6п. Микроорганизм-деструктор НАК, АА выделен методом накопительной культуры из образцов почвы Саратовского производственного Объединения Нитрон. Материал в количестве 2 мл суспензируют в среду

0 следующего состава, г: глюкоза 0,5; пентон 1; К2НР04 0,1; MgS04 0,1; акрилонит.рил 0,008. Суспензию (100 мл) в 300 мл эрленмейеровских акри колбах инкубируют при 28°С при круговом перемешивании

5 (120 об/мин.). Половину надосадочной жид-, кости ежедневно отбирают декантацией и добавляют такой же объем свежей среды. Концентрация акрилонитрила :в среде увеличивают ступенчато: 0,008 г/л на первой неделе, 0,016 г/л на второй и т,д. до конеч

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к очистке сточных вод микробиологическими методами, и может бытьиспользовано для биологической очистки сточных вод предприятий химической промышленности производства нитрила акриловой кислоты (КАК), акриламида (АА) и акриловой кислоты (АК). Целью изобретения является получения штамма с высокой деструктивной активност^ью, способного деградировать акрилонитрил в промышленных сточных водах. Штамм выделен из почвы Саратовского производственного объединения "Нитрон" методом накопительной культуры с использованием в качестве единственного источника С и N нитрила акриловой кислоты. Штамм деграг дирует НАК в конентрации до 1 г/л при микробной нагрузке 5-10 и 1*10 кл/мл за 18 и 2 ч соответственно, АА при микробной нагрузке 5'10? в концентрации 1,5 г/л за 48 ч. АК в концентрации 1 г/л при той же микробной нагрузке за 48 ч. Штамм деградирует указанные соединения в реальных сточных водах при наличии в них солей тя-. желых металлов, толуола и др. 1 табл.Изобретение относится к биотехнологии, в частности к очистке сточных вод с помощью микроорганизмов, и мож^т быть использовано для биологической ^чистки сточных вод предприятий химической промышленности производства иитрилг^ акриловой кислоты (НАК), акриламида (лД) и акриловой кислоты (АК).Акрилонитрил и акриламид являются крупнотонажными продуктами, используемыми как монометры в производстве полимерных материалов и химических волокон.Прямой сток отработанных вод с заводов акрилонитрила может вызвать сильное за- грязне'ние окружающей среды вследствие их высокой токсичности.Существующие в настоящее время химические и физико-химические способы очисткисточных вод от НАК, АА и АК'доволь- но дороги, не всегда эффективны и трудоемки. Наиболее доступными, экономически рентабельными и достаточно эффективными явл^яются микробиологические методы очистки воды, основанные на способностиКЗ^^