Способ анализа сточных вод нефтехимических производств на канцерогенную активность Советский патент 1992 года по МПК C12N15/01 

Изобретение относится к медицине, в частности онкологии и гигиене, и может быть использовано для интегральной оценки мутагенной активности производственных выбросов. .

Цель изобретения - ускорение способа.

Способ включает обработку двух-, трехдневных личинок дрозофилы экстрактом исследуемого выброса или выделенными углеводородами с последующей -регибграцией у гетерозиготных самок мутантн йх ще тинок Yellow (Y) и SIhged (Sn) и оценкой, пробы на мутагенность по наличию ДОС1:0верной разницм с контролем. Достигается это тем, что исследуемую пробу сначала концентрируют или подвергают экстракции Органическими растворителями или отделяют верхний, углеводородный слой, определяют концентрацию бенз(а)пирена (БП) как ицдикатора наличия канцерогенных ПАУ, затем, используя в качестве растворителя L-альфа-лецитин (ТУ 6-09-10-289-75), готовят 34 разведения исследуемого образца в соотношениях 1:(1-10), а оценку канцерогенной активности по MacTote мутирования проводят в каждом разведении в сравнении с контролем, в качестве которого используют также L-альфа-лецитин из яичного желтка. Одновременно определяют степень токсичности выброса по количеству вь1живших личинок в каждом разведении по сравнению с контролем. Результаты сопоставляют с концентрацией БП, а при необходимости и других веществ, в исследуемой пробе.,

При мер. Берут 1 л стоков от промывки пирогаза щелочью с нефтехимического производства этилена. Верхний слой углеводородов отделяют в делительной воронке. В

нем спектрально-люминесцентным методом определяют содержание БП, равное 0,7 мкг/мл углеводородов.

1 мл углеводородов растворяют в L-альфа-лецитине в 3 разведениях 1:2; 1:5; 1:10. Проводят подготовку дрозофил для опыта, включающую отбор виргинных самок Y, скрещивание их с самцами WSn по 8-10 самок и 5-8 самцов на пробирку, пересадку родителей через 3 дня на свежую питательную среду для проведения 2-3 повторений опыта от одних и тех же родителей.

Затем после предварительного встряхивания приготовленного разведения пипеткой в каждую пробирку с двух-, трехдневными личинками вносят по 0,1 мл исследуемых углеводородов. Опыт проводят параллельно с каждой серией разведения. Для каждого разведения ставят 2-3 повторения опыта, чтобы в каждой серии опытов просмотреть неск;олько сотен особей.

. Одновременно ставят по 8-10 контрольных пробирок, в которых личинки обработаны лецитином. Пробирки помещают в термостат при 25°С. Через 8-10 дней под бинокулярным микроскопом у гетерозиготных самок проводят регистрацию мутантных щетинок Y и Sn на и тораксе в опытных и контрольных пробирках.

.Регистрируют число просмотренных самок и рассчитывают число выживших личинок в среднем на рдну пробирку в основном и контрольном опытах. В серии опытов с разведением 1:2 личинки дрозофилы погибают в результате выраженного токсического действия совокупности веществ.

входящих в состав пробы. В разведении 1 :(5-10) проба также токсична, в разведении 1:10 токсичность его по выживаемости дрозофил в сравнении с контролем в 2,5 раза выЩе, однако число выживших дрозофил достаточно для статистической обработки результатов..

Мутагенная активность в опыте с лецитином в тех же разведениях 1:5-1:10 составляет от 3,5 до 4,5%.

Результаты исследования выявляют наличие мутагенного эффекта с высокой степенью достоверности.

Способ является эффективным при интегральной- оценке выбросов сложного состава нефтехимических производств.

Таким образом, способ позволяет быстро провести интегральную оценку мутагенной и потенциальной канцерогенной активности г(роизводственного выброса сложного состава. Исключение специальной постановки опыта на токсичность упрощает тестирование и сокращает время на его проведение.

Формула изобретения

Способ анализа сточных вод нефтехимических производств на канцерогенную активность путем подготовки образца, оценки его канцерогенной активности, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, подготовку образца осуществляют с помощью его концентрирования и эмульгирования в L-альфа-лецитине, а канцерогенную активность оценивают по наличию мутагенной активности в те.стсистеме Drasophila melanogastes, гетерозиготных по генам Yeljow и Singed.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии и гигиене, и может быть использовано для интегральной оценки мутагенной активности производственных вы'бросов. Целью изобретения является ускорение способа. Способ включает подготовку'образца концентрированием и эмульгированием в L-альфа-лецитине и оценку канцерогенной активности по наличинэ му- тагйнности в тест системе Drosophila melanogastes. гетерозиготных по генам Yellow (Y) iTSinged (Sn).