Способ подготовки нативных препаратов клеток крови к исследованию Советский патент 1992 года по МПК G01N33/49 A61B10/00 

Изобретение относится к медицинским, а именно к лабораторным исследованиям эритроцитов и лейкоцитов в монохромати ческом свете.,

Способ осуществляют следующим образом.

Известно, что монохроматический свет по сравнению с полихроматическим имеет больший коэффициент отражения и постоянный показатель преломления в изотропной среде, не дает дисперсии. Каждый элемент исследуемой клетки будет находиться во взаимно однозначном соответствии с яркостью определенного места. Этим обуславливается большая глубина резкости.

Косо направленные лучи определенной длины света, проходя через толщу эритроцитов и лейкоцитов, по разному задерживаются и преломляются их структурными образованиями. Это позволяет получить большую контрастность и выявить структурные образования в лейкоцитах.В окуляре микроскопа живые эритроциты и лейкоциты видны объемно.

Для получения монохроматического света используют осветительное устройство

с заменяющимся интерференционным светофильтром Я(лх . нм 588 и 547 ± 5. Устройство содержит параболическое зеркало, галогеновую лампу, интерференционный светофильтр, который легко заменяется, диафрагму, коллективную линзу и микроскоп.

Устройство работает следущим образом.

Пучок лучистой энергии, излучаемый галогеновой лампой, стабилизированный источник питания которой отражает луч от параболического зеркала, формирующего параллельный поток, поступающий на интерференционный светофильтр, после которого выделенное монохроматическое излучение потока ограничивают по мощности диафрагмой и собирают коллективной линзой после отражения зеркалом микроскопа во входное отверстие иммерсионного обьектиаа микроскопа.

Кровь для исследования эритроцитов и лейкоцитов берут традиционным методом. Исследование их под микроскопом в монохроматическом свете проводят в раздавленной капле под покровным стеклом

иммерсионным обьективом с увеличением 90Х, окуляр 10-15Х в затененной комнате.

Различная интенсивность микроабсорбции и изменение преломления монохроматического света в зависимости от распределения гемоглобина и других веществ в структурных образованиях эритроцитов и лейкоцитов создает разность освещения, повышение контрастности восприятия. Это позволяет более точно выявить структуру эритрбцитов при заболеваниях и микроструктуру живых лейкоцитов. У больных острыми лейкозами были выявлены микроцитоз и значительная деформация эритроцитов. При тяжелых активных гепатитах и циррозах печени в основном имеет место макроцитоз и значительная деформация. Среди атипичных форм эритроцитов имеют место эхиноциты, окантоциты, клетки в виде тутовых ягод, сплющенные, складчатые, дегенеративные. Под влиянием лечения больных в эритроцитах часто можно было наблюдать положительную динамику.

При исследовании живых лейкоцитов выявлено, что некоторые клетки имеют утолщенный вид, средина более тонкая. По внешнему виду лейкоциты несколько напоминают эритроциты. Но их поверхность неровная - холмистая или бугристая. Ядра, выделяясь большей интенсивностью затенения на фоне протоплазмы, не имеют четких границ.

При остром лейкозе преобладают лейкоциты малого диаметра, наружная часть клеток более утолщена. В ядрах в основном по 1-2 сложных ядрышка.

Пример 1. Исследовали эритроциты у здоровых лиц и больных. Основную группу составляли гематологические больные, из них с острым мйэлолейкоэом, хроническим миэполейкозом, хроническим лимфолейкозом. лимфогрануломатозом и анемиями

Мазки облучали монохроматическим светом с длиной волны для эритроцитов 588 нм, для лейкоцитов 547 им. У больных острым миэлолейкозом были в основном зритооциты среднего диаметра 6,8-7,2 мкм, реже стречались большого диаметра - 10,2 мкм и больше. У детей с острым лейкозом преобладали эритроциты малого диаметра б мкм

и меньше. Как правило, это отмечалось в начальной фазе болезни. У них чаще выявлялись изменения морфологической структуры эритроцитов: зазубренность по периферии, шиповидность, вид тутовой ягоды, зернистость и вдавления в центре клеток. Редко выявлялись вакуоли по овалу эритроцитов, дегенерация, а также большие уплощенные бледные эритроциты, окантоциты. У больных ррническим миэлолейкозом по сравнению с острым миэлолейкозом подобные изменения встречались реже. При хроническом лимфолейкозе преобладали эритроциты среднего и большого диаметра,, морфологические изменения

встречались относительно редко. Чаще нежели у здоровых лиц выявлялись куполообразные эритроциты в виде колпачка. Редко встречались складчатые, морщинистые и эритроциты с вдавлениями в центре.

У больных лимфогрануломатозом отклонения в диаметре эритроцитов были слабо выраженные. В крови больных анемиями изредка выявлялись атипичные формы: зхиноциты, окантоциты, шаровидные, бугристые. зернистые, на подобии тутовой ягоды, морщинистые, дегенеративные.

Способ позволяет получить высокую информативность при прижизненном исследовании эритроцитов и лейкоцитов, а также

простота позволяют применять его в любой клинической и научно-исследовательской лаборатории.

Формула изобретения Способ подготовки нативных препаратов клеток крови к исследованию путем приготовления мазк.ов с последующим облучением светом, отличаю щи и с я тем, что, с целью более четкого контраста эритроцитов и лейкоцитов, мазки облучают

монохроматическим светом с длиной волны для эритроцитов в пределах 588 нм, для лейкоцитов 547 нм.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным исследованиям крови. Целью является получение более четкого контраста лейкоцитов и эритроцитов на препарате. Цель достигается, тем что мазок облучается монохроматическим светом с длиной волны для эритроцитов в пределах 588 нм, для лейкоцитов - 547 нм. Способ позволяет выявить отклонения в структуре клеток, что позволяет проводить диагностику заболеваний.