СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ D-РИБОЗЫ! :.\ i „ii I iiU ' ~'-<У'-'-. ••:':'Ц"'~"' '^[ ..JA^ij i ^ilr-i Советский патент 1965 года по МПК C07H1/00 C07H3/02 

Известен способ получения D-рибозы-, фиксированно меченной тритие.м, заключающийся в том, что О-рибоно-у-лактон восстанавливают борогидридом лития, меченным тритием, в растворе пиридина. Для очистки разбавленный неактивным носителем продукт выделяют из реакционной смесп трехкратной перекристаллизацией из смеси метанола и 2-пропанола.

С целью повышения чистоты целевого продукта, предложен способ получения D-рибозы, фиксированно меченной тритием, заключающийся в том, что В-рибоно-у-лактон восстанавливают борогидридом натрия, меченным тритием, в растворе сухого тетрагидрофурана. Для очистки разбавленный неактивным носите. продукт выделяют из реакционной смеси добавлением к раствору анилина и сернокислого натрия. Образующуюся при этом комплексную соль «а-анилин-М-О-рибопиралозида-1-Т с сернокислым натрием .подвергают гидролизу.

Пример 1. Реакцию восстановления проводят в закрытой пробирке в атмосфере чистого азота. Выделившийся в процессе -реакции тритий сжигают над окисью меди при 270°С до образования ЪО. К 0,0877 г (90,4 мкюри) борогидрида натрия-Т добавляют раствор В-рибоно-у-лактона (0,5003 г) в сухом тетрагидрофуране (30 лгл)..

Реакционную смесь оставляют на 20 час при комнатной температуре. Затем в течение часа К смеси добавляют по каплям 14 мл воды.-

Реакционную .массу упаривают досуха в вакууме при 35-40°С. Сухой остаток растворяют в воде, водный раствор обрабатывают смолами КУ-1 и ЭДЭ-10П в статических условиях до отсутствия натрия и кислоты. Полученный нейтральный раствор очищают углем, фильтруют и фильтрат упаривают в вакууме (35- 40°С) до сиропа.

Выход чистого сухого сиропа 0,320 г (63% в пересчете на лактон). В этом количестве сиропа найдено 78,5 мг С-рнбозы-1-Т (по анализу), -15,5°. Выход В-рибозы-1-Т

15,5% от теоретического в пересчете на лактон.

После анализа водный раствор D-рибозы-1-Т снова высушивают до сиропа, как указано выще. Получают 0,270 г сиропа, содержащего 68 мг рибозы (10,5 мг рибозы израсходовано на анализ).

К сиропу (0,270 г) добавляют водный раствор, содержащий неактивную D-рибозу . (0,932 г). Чистый прозрачный воДный раствор, содержащ.ий синтетический сироп (0,270 г) и неактивную рибозу (0,932 г) снова упаривают до сухого сирой а (1,3 г).

Сухой сироп растворяют в кипящ ем (абсолютном) метаноле (1,0 мл). К полученной смеси добавляют 1 мл «зопропанола и заправку D-рибсзы. Смесь оставляют на льду на 5-6 суток. Через сутки к смеси добавляют еще 1 мл изопропанола.

Получают 0,770 г (77% в пересчете на взятую рибозу) кристаллического продукта.

Анализ кристаллов: содержание основного вещества 81,5%; 19,35° (вводе); удельная активность 4,72 мкюри/г.

Очистка кристаллов О-рибозы-1-Т.

На очистку берут 0,610 мг В-рибозы-1-Т, 0,75 мл метанола и 1,5 мл изопропанола.

Получают 0,430 г .кристаллов (70,5% в пересчете на взятую рибозу).

Анализ кристаллов: содержание Основного вещества 88,5%; аро -19,85°; удельная активность 4,65 мкюри/г.

Приведенные данные показывают, что очистка В-р-ибозы-1-Т перекристаллизацией не является эффективным методом, так как содержание основного вещества в кристаллах остается низким (88,5%) и увеличивается после дополнительной очистки лищь на 7%.

Пример 2. К 0,0807 г (83,4 мкюри NaBH4T добавляют раствор 0,501 г D-р.ибоно-у-лактона в 30 мл тетрагидрофурана.

Получают 0,260 г чистого сиропа, содержащего 80,0 лг 0-р:Ибозы-1-Т, a.f 19,8°.

Выход О-рибозы-1-Т 15,85% от теоретического в .пересчете на лактон.

После анализа получают 0,190 г сиропа, содержащего 58,5 мг рибозы. Носитель (неактивная рибоза) 0,877 г. Веего ри-бозы 0,-936 г. Из нее выделяют 2,75 г комплексной соли«аанилин-М-0-рибопираноз ида-1-Т с сернокислым натрием. Разложением комплексной -соли получают 1,07 г а-анилин-М-О-рибофуранозида-1-Т. Гидролизом последнего выделяют 0,570 г 0-рибозы-1-Т (в виде сиропа). Кристаллизацией сиропа в условиях описанных выще получают 0,330 г 0-рибозы-1-Т в виде кристаллического продукта.

Анализ кристаллов: содержание основного вещества 98,5%; - 23,6°; удельная активность 2,95 мкюри.

Перекристалл-изацией О-рибозы-1-Т качество продукта не изменяется.

Таким образом, выделение 0-рибозы-1-Т через комплекопую соль «а-анилин-Ы-О-рибопиранозида-1-Т с сернокислым натрием позволяет получать продукт, не требующий дополнительной оч-истки, пригодный для синтеза фиксированно меченных нуклеозидов и нуклеотидов.

Предмет изобретения

Способ получения D-рибозы, фиксированно меченной тритием, восстановлением D-рибоно-у-лактона с помощью -комплексных гидридов металлов в среде органического растворителя -с последующим выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повыщения ЧИСТОТЫ продукта, в качестве комплексного гидрида металла используют бо-рогидрид натр.ия, меченный тритием, в полученный раствор добавляют анилин и сернокислый натрий и образующуюся при этом .комплексную соль «к-анилин-М-О-рибопиранозида1-Т с сернокислым натрием подвергают гидролизу.