Способ эпимеризации гиббереллин-7-альдегидов Советский патент 1984 года по МПК C07D307/93 

со ее со со Изобретение относится к способу эпимеризации п ббереллин-У-апьдегицов , которые представотяют собой гиббереллиновые производные, имеющие у гаестого атома основного скелета энт-гиббереллана альдегидную группу. Причем альдегидная группа может находиться в природном 6jb -по ложении или в эпиме15ном 6oi--положен У гиббереллин-7-аяьдеглдов основ ной скелет энт-гиббереллана является неизменным или малоизменен (например, секо-, гомо-, нор- или д нор-энт-гиббереллан, в данном случа в эпимерном виде или содержащий .многократные связи и в данном случае по разному замещен. Мечеными гиббереллин-7-альдегидами являются такие соединения, которые мечены тритием или дейтерием. Гиббереллинь как фитогормоны мно .гократного действия имеют большое б ологическое значение. Известно, что модификация структуры таких в природе существующих гиббереллинов ведет к соединениям с измененной биол гической активностью. Далее, гиббереллины используют в виде их меченых представителей, так например, для биотехнологических сп собов, для исследования биосинтеза, метаболизма, транспорта, распределе ния, способа действия и анализа соо ношения между структурой и действие этих фитогормонов и их частично син I ;тетических структурных аналогов,как нрва для синтеза новых активных вещес Известны гиббереллин-7-альдегиды которые имеют в естественном 6j4 -по ложении основного скелета энт-гиббереллана альдегидную группу M.Li Hchewski und G.Adam. Описание изобретения к патенту ГДР № 112 753 M.Lischewski und G.Adam. Tetrahedron Letters 2835 (1974). M.Lischewiiki und G.Adam. Описание изобретения к патенту ГДР № 120975. M.Lischewski und G.Adam, Tetrahedron Letters 2569 (1975). M.Lischewski und G.Adam, Z. Chem 16., 486 (1976) J.R.Hanson and J.Hawher, J.Chem. See.Chem.Comm. 1971, 208 und Phytochemistry 12, 1073 (1973). B.E. Cross, K.Norton und J.C.Stewerd, J.Chem.Soc.(c) 1968. 1054$ $.E,Cross und J.L.Gatfield, ibid 1971, 1539. Однако до сих пор не были синте:трованы гиббереллин-7-альдегиды, которые имели бы в эпимерном 6 oL-положении альдегидную группу. Известно получение меченых гиббереллин-7-альдегидов с альдегидной группой в 6JЗ-пoлoжeнии. Так, было описано получение или ,6- Н-гиббереллин-А/12 -альдегида и гиббереллин-А/р -альдегида. С J .R.Bearder , J .l lacmellan und В .O.Phinney, Phytochemistry , 2173, 2615. (1973); J.H.Graebe, P.Hedden und J.MacMillan Jochem, Soc. Ghem. Comm. 1975, 161; P. Hedden, J.Macmillan und B.C. Phiney, J. chem. Soc., Perkin 1, 1974, 5871. Однако, из-за жестких условий (длительное время реакций, большой избыток щелочи, повьппенные температуры) этот способ применим лишь к гиббереллинам, которые довольно стойки по отношению к щелочам и дает лишь,небольшой выход. Далее, известен синтез , 17- С-гиббереллин- А,г| -альдегида tB.Dockerill, R.Evans und J.R.Han son, J.Chem.Soc. Chem. Comm. 1977, 9191. . Такие замещеншз е критием на седьмой позиции гиббереллин-7 альдегиды тот недостаток, что при биосинтетическом или химическом превращении 7-альдегидной функции в карбоксильную группу является .: тритий, Целью изобретения является разра€ютка способа получения новых и доступных гиббереллин-7-альдегидов с альдегидной группой в бос-положении5 позволяющего получи1ь меченные гиббереллин-7--альдегиды с высоким выходом. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу эпимеризации гиббереллин-7-альдегидов гиббереллин-7-альдегид с альдегидной группой в боЬили 6 -положении или его 14(1-меченый аналог энолизируют щепочньЕм агентом, а затем подвергают обработке донором водорода или дейтерия или трития в атмосфере инертного газа в среде органического растворителя. Желательно в качестве щелочного агента использовать гидрид калия или диизопропиламид лития или 2,2, 6,6--тетраметилпиперидид лития, а перед энолизадией проводить защиту кислых атомов водорода в исходных соединениях ,

В качестве щелочных агентов испол зуют прежде всего сильные, но мало нуклеофильные щелочи. Таким образом с использованием сильных но мало ну.леофильных щелочей впервые возможно энолизировать C-iq -гиббереллин-7-апьдегиды с лактонным кольцом, пр1-1чем для образования энолата достточно добавлять щелочь в эквивалентном количестве или лишь в небольшом избытке (например, 1,1 эквивалент) . Это подходит для гиббереллин-7-альдегидов боз кислых атомов , водорода (например, гиббереллин-Аеэ-7-альдегид). При использовании гиббереллин-7-альдегидов с кислыми атомами водорода (например, гиббереллин-7-альдегиды, содержащие гидрок сильные или карбоксильные группы) целесообразно замещать эти атомы водорода. В качестве защитных групп для гидроксильных групп можно использовать, например, триметилсилильную группу, третичную бутилдиметилсилильную группу или тетрагидропиранильную группу. Помимо этого карбоксильные группы этерифицируют или нейтрализуют избытком щелочи. Энолизация гиббереллин-7-Ш1Ьдегидов в присутствии кислых атомов водорода тоже возможна. Однако здесь требуется соответственно больше эквивалентов щелочи, чтобы произошло образование энолата.

Предложенньш способ осуществляют в атмосфере аргона или азота в органическом растворителе, предпочтительно в абс. тетрагидрофуране или абс. диоксане. Исходные гиббереллин-7-альдегиды получают из вестными способами химическим путем jM.Lischewski и G.Adam. Описания , изобретений к патентам ГДР № 120875, кл. С 07 D 307/77; № 1 12753, кл. С 07 5/06; M.Lischewski п. G.Ada Tetrahedron Letters 19IA, 2835; ibid 1975, 2569; ibid. , 3691; Z.Chem , 486 (1976) или микробным путем J.R.Bearder, J.MacMillann B.O.Phinney, Phytochemistry 2, 2173 (1973); J.R.Hanson и J.HaulI:er, J.Chem. Soc. Cbqm.Comm. , 208 и Phytochemistry , 1073 (1973)1.

Как соединения со свойствами донора водорода, дейтерия или трития (в дальнейщем обозначены как доноры водорода, дейтерия или трития) могут быть использованы самые разные соединения с водородом, дспттерием или тритием, способными к обмену.

H-OR,

например , ,

H-OR. причем R является замещенной или незамещенной апкиль 1ой, арилной или ацильной группировкой, а также остатком органических или неорганических кислот. При использовании кислот образующиеся гиббереллин-7апьдегиды не подвергают щелочным или нуклеофильным условиям, что особенно важно для получения неустойчивых к щелочам гиббереллин-7-альдегидов. Независимо от того, исходят ли дпя мечения гиббереллин-7-альдегида с альдегидной группой в 6 /ь-положении или же с альдегидной группой в 6 -положении, всегда получают как меченые гиббереллин-7-ааьдегиды с альдегидной группой в 6/Ь-положении, так и меченые гиббереллин-7-альдегиды с альдегидной группой в 6с.-положении.

Как во время образования энолата, так и при превращении с донорами водорода, дейтерия или трития температура колеблется в широких пределах. Целесообразно работать в пределах между -78°С и комнатной температурой.

Обработку продуктов реакции производят по обычным методам, например путем хроматографии на колонке с применением органических растворителей. Следует отметить, что оба образовавшихся по способу изомеры характеризуются легкой хроматографической разделимостью.

Пример 1. К 330,4 мг (1 ммоль) гиббереллин-А-з;-7-альдегида (1л), растворенного в 15 мл абс.пиридина, добавляют 2 мл гексаметилдисилазана и 2 мг триметилхлорсилана. Остаатяют на 3 ч при комнатной температуре и после этого выпаривают в вакууме. После добавления насыщенного раствора NaHCOj исчерпывающе встряхивают с эфиром. Об-| едиHeHiibie эфирные фазы выступаюг безводным Mr,SOi, и выпаривают в вакууме. Остаток оставляют на ночь под вакуумом над Рц 010. После этого силилированный гиббереллин-7-альдегид растворяют в атмосфере аргона в 8 мл свободного от кислорода абс. ТГФ-е и добавляют при комнатной температуре 44 мг (1,1 ммоль) гидрида калия. После одного часа перемешивания при комнатной температуре добавляют 1 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл воды. Раствор оставляют на ночь для удаления защитных групп, потом выпаривают и после добавления насыщен ного раствора NaHCOs несколько раз встряхивают с этиловым эфиром уксу ной кислоты. Высушивание органических фаз с помощью и выпаривание в вакууме дает остаток, кот рый хроматографируют на 20 г силикагеля (Woelm). Вымывание с хлороформом (фракции1-35), хлороформом этиловым эфиром уксусной кислоты 9:1 об/об (фракции 36-60), хлороформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 8:2 об/об (фракции 61-60) и хлороформом/этил.овым эфиром уксу ной кислоты 7:3 об/об (фракции 91дает при объединении фракции 68-89 96 мг исходного альдегида 1о(. Из фракции 94-14 изолируют 143 мг 61% от теоретического зна чения 6-зпигиббереллин-А -7-альдегида (1сГ) (расчет выхода относител но превращенному альдегиду IQ) т.пл. 185-t87°C (из ацетона/н-гексана). СЫ1, (с 0,35 - этанол), МС: м/е 330 (М.+ или М), ИК(СНСз,): yмдt 3600 (ОН), 2730 и 1 725 (альдегид), 1775 (jy-лактон-СО) и 1665 ацетон-Д§ iOO МГц - 1н-51„р : б ШС (S, 18-Н), 2,75 (dd, j iO Гц и ,5 Гц, 6-Н 2,97 (d, j 10 Гц, 5-1П, 4,32 (m, 3-4), 4,89 и 5,21 (17 Гц) 5,84 (dd, Гц и ,5 Гц- 2-Е} 6,28 (dd, Гц и j 2 Гц, 1-Н) И 9,80 ррш (части на мио. частей) (d, ,5 Гц, 7-Н). Аналогично получают из 1 гиббереллин-7-апьдегида с альдегид ной группой в 6о1.-положении и 1,1 ммоль гидрида калия следующей гиббереллин-7-апьдегиды с альдегид ной группой в 6j -пoлoжeнии: 6-эп1 гиб6ереллин-А -7-альдегид (ij). Выход 153 мг 64% от теоретического значения (93 мг 1iQ получают), вы ывaниe с хлороформом этиловым эфиром уксусной кислоты 7:3 об/об, т.пп. 182-186° С (из аце тона/И-гексана), fC : м/е 332 (М) ИК (нуйол): ,д, 3410 (Ы. , ОН), 1755 ( -лактон-СО) и 1720 см (альдегид). 6-зпигиббереллин-А -7-альдегид (lllrf-). Шход 152 мг 68% от теоретического значения (86 мг 1 И Q получают), вы1 шание с хлороформом, аморфный, МС: м/е 316 (М), ИК ( (CHCL): 3610 (ОН), 2725, 2820 и 1725(альдегид) и 1775 см (;-лактон-СО), 6-3 пи ги бб ер елл и н-А г - 7 - ал ьд е гид 1У{) Выход 152 мг 2 70% от теоретического значения (97 мг 1Уа получают) , вымывание с хлороформом т.пл. 195-197 С (из хлороформа/н-гексана), МС м/е 314 () , ИК (нуйол): 3400 (Ьг., ОН), 1755 (j -лактон-СО) и 1720см (альдегид). 6-эпигиббереллин-Ад-7-альдегид (V б). Выход 150 мг 60% от теоретического значения (98 мг Va снова получают), вымывание с хлороформом/зтиловым эфиром уксусной кислоты :8 об/об, аморфный, МС: м/е 348 (), ИК (.нуйол).: 3400 (Ъг,, ОН), 1750 (у-лактон-СО) и 1720 см (альдегид). 6-эпигиббер еллин-Ад-7-ат ьде гид (Y1 б). Берется 30 мг (0,1 ммоль) У1а и 9 мг гидрида калия. Здесь не силилировать. Выход 14,2 мг 69% У1сГ(9,-7 мг У а снова получают), вым1)1вание с н-гексаном/хлороформом 4:6 об/об, аморфный, МС: м/е 300 (), ИК (CHCL): 725 и 1725 (ал.ьдегид), 1775 см (Ц лактон-СО). Пример 2, 330,4 мг (1 ммоль) гиббереллин-А2,-7-альдегида (IQ) силилируют аналогично примеру 1, Потом смешивают по каплям раствор -из 0(3), 0(13)-бис-триметилсилил--гиббереллин-Аз,-7-альдегида в 5 ,мл абс. ТГФ в атмосфере арона при -78С с раствором диизопропиламида лития (изготовленного из 2 абс. ТГФ, 111 мг диизопропиламина и 70 мг буТИЛ,Г1ИТИЯ ) . Оставляют на 10 1ин при , 10 мин при и 30 мин при 20°С и потом добавляют 2 мл воды и 1 мл ледяной уксусной кислоты. Теперь оставляют на 12 ч и потом обрабатывают аналогично примеру 1 и хроматографир пот . Выход 104 мг 50% от теоретического значения б-эпиг иббереллин-А .-7-аг ьдегяда {If) (122 мг lex получили назад), вы ывaниe с хлороформом/этиловым эфиром уксусной кис;тоты 7:3 7:3 об/об, физичегкнг и спе р: | .опи ческйе данные, как в примере 1 Пример 3. К 330 мг (1 ммол гиббереллин-А2,-7-альдегида (1а), который aнaлoгFчнD примеру 1 силили ровали, добавляют по каплям в атмо фере аргона при 5 мл абс.ТГФ и раствор 2,2 6,6-тетраметилпипёрид да (изготовленного из 2 мл абс.ТГФ 160 мг 2,2,6,6-тетраметилпиперидина и 70,4 мг бутиллития).Оставляют на 10 мин при -78°С, 10 мин при и 30 мин при и добавляют 1 мл метанола и 1 Мл ледяной уксусной кислоты. Оставляют теперь на 12 ч и обрабатывают аналогично по примеру 1 и остаток хроматографируют. Выход: 99 мг 47% от теоретического значения 6-эпигиббереллин-А1,-7-альдегида (Icf) (120 мг Id получают), вымывание с хлороформом этиловым эфиром уксусной кислоты 7:3 об/об, физические и спектроскопические данные как по примеру 1. Пример 4. Аналогично приме ру 1 из 1 ммоль гиббереллин-7-апьдегида с альдегидной группой в бл-положении и 1,1 ммоль гидрида калия получают следующие гиббереллин-7-альдегиды с альдегидной группой в 6 -положении: Гиббереллин-А5-7-альдегид (1а). Выход 99 мг 54% от теоретического значения (146 мг с получают) выьывание с хлороформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 8:2 об/об, т.пл. 172-175°С (из ацетона) 1ЫД + 118,8 (с 0,61; зтанол). МС: м/е 330 ( или М ), ИК (СНСЦ): УиАИй 3610 (ОН), 2723 2820 и 1725 (альдегид), 1775 (}лактон-СО) и 1635 ( ), 100 МПд - : о ° 1,14 (S, 18-Нз), 2,79(dd 10 Гц и J 2,5 Гц,6-Н) 3,29(d, J 10,5 Гц, 5-Н), 4,06(d, J 3,5 Гц, 3-Н), 4,93и 5,24 (т, П-Н), 5,90(dd, J 9,5 Гц и J 3,5 Гц, 26,39(d, J 9,5 Гц, 1-Н) и 9,84шшп (d, J 2,5 Гц, 7-Н). Гиббереллин-А -7-альдегид (11а Выход 90 мг 52% от теоретического значения (158 мг Мб получают), вымывание с хлороформом/этиловим эф ром уксусной кислоты 8:2 об/об аморфный, НС: м/е 332 ( или М) , ИК (СНСЬ): | jMAvic 3610 (ОНК 2725, 2820 и 1725 (ал1.дегид)н 1770 (-лактон-СО). Гиббереплин-А9-7-альдегид (1Уа ). Выход 94 мг 39% от теоретического значения (155 мг У1 ($ получают) вымывание с н-гексаном/хлороформом :9o6/(i6 т-.гш. 152-153;С (из эфира), МС: м/е 314 (М), ИК (СНСЦ): 3605 (ОН), 2725 и 1725 (альдегид) и 1775 ( 3 -лактон-СО) . Гиббереллин-Ав-7-альдегид (Уо ). &э1ход 95 мг 49% от теоретического значения 054 мг у б получайт) вьгМ)1вание с хлороформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 4:6 об/об аморфный, МС: м/е 348 (М) , ИК Снуйол): у„д4: 3400 (Ьг,, ОН , 1750 (j-лактон-СО) и 1720 (альдегид). Гиббереллин-Ад-7-альдегид (IQ) . Применяют только 30 мг (0,1 ммоль) 6-эпигиббереллин-А{ц-7-альдегид. Силилирования здесь не надо. Выход 9,3 мг 62% 7 IQ (15 мг 5 1 получают), вымывание с н-гексаном/ хлороформом 1:1 об/об, аморфный, МС: м7е 300 (М). Пример 5. К 330 мг (1 ммоль) гиббереллин-А -7-альдегида (1а), который аналогично примеру 1 силилировали, в атмосфере аргона добавляют 8 мл абс, ТГФ и 44 мг (1,1 ммоль гидрида калия. После часового перемешивания к эноляту добавляют при комнатной температуре 0,1 м.п -Н,0 (5,55 ммоль) (удельная радиоактивность 3 мКюри/ммоль), Теперь перемешивают три минуты и смешивают с 1 мл ледяной уксусной кислоты. Путем многократного выпаривания в вакууме и многократного добавления метанола возможно удалить нестабилыгый тритий. Для удаления защитных групп к остатку добавляют 8 мл ТГФ, 2 МП HjO и 1 мл ледяной уксусной кислоты и оставляют на ночь. После выпаривания в вакууме наливают басьщенный раствор NaHCO, несколько раз встряхивают с этиловым эфиром уксусной кислоты. Высушивание органической фазы с помощью Na2SOf, и выпаривание в вакууме дает остаток, который аналогично примеру 1 хроматогрлфируют. При вымывании с хлорофортпм/ этиловьгм эфиром уксусной кислоты 8:2 об/об получают 99 мг 30% от теоретического значения 6- Н -гиб9береллин-А -У-альдегида (1ft), имеющего удельную радиоактивность 1,37 мКюри/ммоль. Последовательное выбывание с хлороформом/этиловым з-фиром уксусной кислоты 7:3 об/об дает 145 мг 44% от теоретичрского значения 1б- н1-6-эпигиббереллин-А - -альдегида (1г) с удельной рад ;иоактивностью 1.,47 мКюри/ммоль, Физические и слектроскогшческие дан ные этих соединений как в примерах 1 и 4, Аналогично получают из t ммоль гиббереллин-7-альдегида с альдегидной группой в 6|Ь положении . 1 , 1 ммол гидрида калия и 0,1 мл .O (удельная радиоактивность 3 мКюри/ммоль) следующие 16- Н -гиббереллин-7-аль дегиды с альдегидной группой в 6о -положении и 6- Н -гиббереплин-7-альдегиды с альдегидной группой 6jb-положении (физические и спектроскопические данные полученных сое.динений см. в примерах 1 и 4). б- Н -гиббереллйн-А -7-альдегид (11%) и 6- Н4-6-эпигиббереллин-А -7-альдегид (Пг). Вымывание с хлороформом/этиловым эфиром уксусно кислоты 8:2 об/об, выход 93 мг 28% от теоретического значения 1 1 В (удельная радиоактивность 1,32 мКюри/ммоль) вымывание с хло7 реформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 7:3 об/об, выход 150 мг 45% от теоретического значения 11г (удельная радиоактивность 1,48 мКюри/ммоль). б- Н -гиббереллин-Ац-7-альдегид (111б) и С6- Н1-6-эпнгибберел лин-А -7-альдегид (1 1 1 г ) . Вымывание с н-гексаном/хлороформом 2:8 об/об, выход 91,5- мг 29% от теоретического значения 1116 (удел ная радиоактивность 1,35 мКюри/ммол аморфный, МС: м/е 316 (М), ИК (CHCl): мдад 3610 (ОН), 2725 и 1725 (альдегид) и 1775 см (лактон-СО), вымывание с хлороформо выход 149 мг 47% от теоретическо го значения И 1т (удельная радиоа тивность 1,49 мКюри/ммоль), Гб-Н -гиббереллин-А5-7-альдегид (1Ув) и 1б- Н -6-эпигиббереллин-А -7-альдегид (1Уг ). Вымывание с н-гексаном/хлороформом 1:9 об/об, выход 101 мг 32% от т ретического значения 1 в (удельная радиоактивность 1,39 мКюри/ммоль), вымьпзакие с хлороформом, гялход ,53 мг 49л. от теоретического значения 1Ут (удельная радиоактивность 1,5 мКюри/ммоль). L6- Н -гиббсреллиH-Ag-7-альдегид (Ув) и 6- Н -6-эпигибберел- лин-Ад-7-а.г1ьдегид (У г ). Вымываииб. с хлороформом/этиловым эфиром уксусной кислоть 4:6 об/об, выход 100 мг 29% от теоретического значения V ь (удельная радиоактивность 1,0 мКюри/ммоль), вымывание с хлоpCiCpMOM/этиловым эфиром уксусной кислоты 2:8 об/об, выход 147 мг 42% от теоретического значения Vr (удельная радиоактивность 1,2 мКюри/ммоль), -гиббереллин-А(|-7-альдегид (У1е) и IB- H -6-эпигиббереллин-Ад-7-альдегид (У1г). Применяют 30 мг (0,1 ммоль) У1а и 9 мг гидрида калия. Здесь не надо силилирования, вымывание с н-гексаном/ хлороформом 1:1 об/об, выход 9,9 мг 33% от теоретического значения yife (удельная радиоактивность 1 1 ,42 мКюри/ммоль), вымывание с н-гексаном/хлороформом 4:6 об/об, выход 13,8 мг 46% от теоретического значения У1 Г (удельная радиоактивность 1,5 мКюри/ммоль). 16- Н1-гиббереллин-А 2 льдегид (УШ) и Г6- Н1-6-эпигиббереллин-Ад -7-альдегид (IX). К раствору,, состоящему из 3,16 мг (0,01 ммоль) гиббереллин-Ад -7-альдегидг, (УП) в 0,5 МП абс. ТГФдобавляют при комнатной температуре в атмосфере аргона 1 мг гидрида калия. После часового перемешивания добавляют 0,1 мл (удельная радиоактивность 3 мКюри/ммоль) и после трех минут наливают 0,5 мл ледяной уксусной кислоты. Потом выпаривают в вакууме и с целью удаления трития, способного к обмену, остаток растворяют в этиловом эфире уксусной кислоты и несколько раз встряхивают с 2%-ным водным НС1. После высушивания с помощью Na2SO и выпаривания в вакууме получают после тонкослойного хроматографического разделения на силикагеле (Merck). 1,27 мг 40% от теоретического значения Гб- НЗ-гиббереллин-A.,J --7-альдегида (УШ) : т , пл . 160162 С (из ацетона/н-гексана), МС: м/е 316 idM) , ИК (CHCl): 2730 (альдегид; -и 1710 см- (br., ), 1,1 мг 35% от теоретического значения -6-эпигиббереллин-А,(:2. гида (IX), аморфный, МС: м/е 316 (), ИК (СНС1з): УМАКЬ 2730 (альдегид) и 1705 см- (Ьг, ). Аналогично, получают из 1 ммоль гиббереллин-7-альдегида с альдегид ной группой в бо -Положении, 1,1 мм гидрида калия и О,1 мп Н20 (удель ная радиоактивность 3 мКюри/ммоль) следующие t6- H -гиббереллин-7-альд гиды с альдегидной группой в ложении и С6- К -гиббереллин-7-ал дегиды с альдегидной группой в бЬложении (физические и спектроскопи ческие данные выявленных соединений представлены в примерах 1 и 4). Сб- Н1-гиббереллин-А,-7-апьдегид (1в) и Н -6-эпигиббереллин-Аз-7-альдегид 1г. Выкй шаиие с хлороформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 8:2 об/об, выход 103 мг 31% 1 (удельная радиоактивность 1,5 мКюри/ммоль), Вы№ 1вание с хлороформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 7:3 об/об, выход 148,3 мг 45% от теоретического значеш1я 1 г (удельная радиоак тивность 1,38 мКюри/ммоль). С6- Hj-гиббереллин-А -7-альдегид (lie) и t6- H -6-эпигиббереллин -А -7-альдегид (.1 1г). Вы№1вание с хл роформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 8:2 об/об, выход 86,5 мг 26% от теоретического значения 11 6 (удельная радиоактивность 1,43 мКюри/ммоль). Вымывание с хлороформом/этиловым эфиром уксусной кислоты 7:3 об/об, выход 163 мг 49% от теоретического значения 1I г (удельная радиоа тивность 1,33 мКюри/ммоль). t -гиббереплин-Ац-7-альдегид ( П 1 &) и 6- НЗ-6-эпигиббереллин-Ац-7-альдегид (П1г). Вымывание с н-гексаном/хлороформом 2:8 об/об, выход 82 мг 26% от теоретического значения Ills (удель ная радиоактивность 1,5 мКюри/ммоль вымывание с хлороформом, выход 161 мг 51% от теоретического значения I 1 1 г (удельная радиоактивность 1,31 мКюри/ммоль). Сб- Н }-гиббереллин-А5-7-альдегид (1У.) и 16- Н1-6-эпигиббереллин-А15-7-альдегид (1Уг). й 1мывание с н-гексаном/хлороформом 1:9 об/об, выход 94 мг 30% от теоретического значения 1УсГ (удельная радиоактивность 1,5 мКюри/ммоль), вылывание с хлороформом, выход 157 мг 50% от теоретического значения lyf (удельная радиоактивность 1,36 мКюри/ммоль).. С6-Н -гиббереллин-А- -7-альдегид (У1в) и С6- Н -6-эгигиёбереллинг -Aq-7-альдегид (yiv). Берут 30 мг (0,1 ммоль) У1 rf и 9 мг гидрида калия. Силили ования здесь не надо. Вымывание с н-гексаном/хлороформом 1:1 об/об, выход 9,6 мг 32% от теоретического значения У 8 (удельная радиоактивность 1,5 мКюри/ммоль) вым шание с н-гексаном/хлороформом 4:6 об/об, выход 15,9 мг 53% от теоретического значения У1г (удельная радиоактивность 1,40 мКюри/ммоль). Пример 6. Аналогично примеру 5 энолат получают из 330,4мг (I ммоль) гиббереллин-Аз-7-альдегида (la) и 44 мг (1,1 ммоль) гид рида калия, которые превращают с помощью 0,1 ма (5,55 ммоль 99,9%-ная частота). Аналогичная обработка и хроматографирование дает Гб- Н -гиббереллин-А5-7-альдегид (Х): выход 102,5 мг 31% от теоретического значения, т.пл. 172-174 С (из ацетона/н-гексана), МС: м/е М или М) в ..Спектре протоны С5-Н и t/-Jl появляются как на сингулет, следовательно, () не видно, и 16- Н -6-эпигиббереллин-А: -7-альдегид СХ П : выход 142,3 мг 43% от теоретического значения, т.пл. 184-187°С (из адетона/н-гексана), МС: м/е 331 (М или в IH-ЯМР -спектре также протоны (5-Н) и С7-Н появляются как сингулет, () отсутствует. Пример 7. Аналогично примеру 5 энолат получают из 3,3 мг (0,) С17- С7-гиббереллин-А5-7-альдегида (удельная радиоактивность 0,23 мКюри/ммоль) и 4 мг гидрида калия, который после этого замещают тритием с помощью О, 1 0,1 мл HjO (удельная радиоактивность 3 мКюри/ммоль) . Аналогичная обработка и тонкослойная хроматография дают С 7- С, С- Н1-гиббереллин-А5-7-альдегид Судельная ра131дноактивность 0,23 мКюри/ммоль удельная радиоактивность Н: 1,39 мКюри/ммоль-) и t7- t, 6-Н -б-эпигиббереллин-А -У-альдегид(удельная радиоактивность С: 0,20 мКюри/ммоль, у ;ельная радиоактивность Н: 1,44 мКюри/ммоль). Предложенный способ позволяет получить меченые гиббереллин-7-апьдегиды с альдегидной группой в 6о -положении. Предложенный- способ общеприменим к гиббереллин-7-альдегидам, причем неустойчивые к щелочам структурные признаки не изменяются. Благодаря мягким условиям при проведении реак ции предложенный способ пригоден дл эпимеризации и мечения далее -гиб береллин-7-альдегидов с лактонным кольцом, например, можно получать б- Н -гиббepeл лин-Aд-7-aльдeгид, -гиббереллин-А;-7 альдегид, -гиббереллин-А1,-7-апьдегид, -гиббереллин-Аз-7-альдегид, гиббереллин-А,-7-апьдегид, -гибберелин-Ад-7-альДегид и -гиббереллин-А5-7-альдегид, которые до сих пор не было возможности получать другим путем. Кроме того, предложенный способ позволит получать известные мечены гиббереллины-7-альдегиды, например Б- Щ-гиббереллин-А -7-альдегид с большими выходами, чем раньше описано. Также получение двойных меченых йббереллин-7-альдегидов возможно с иимощью предложенрюго способа. Например, получают таким образом 1 7- , 6-И1 -гиббереллин-А -7-aiibдегид tr D 7- с, б- Н -6-эпигиббереллин-Аз-7-шп дегид из С17- С -гиббереллин-А5-7-альдегида , 1 5-5н1 -гиббереллин-А5-7-апьдегид и 1 --Н., -6-эпигиббереллип-А5 7-ааьдегид из tl - Hl-гиббереллин-А5-7-альдегида, а также , 1 З- НТ-гиббереллин-А -7-альдегид и , 1 5- Н -6-эпигиббереллйн- -Л;-7-альдегид из С15- Н1-гиббереллин-Ач,-7-альдегида. Полученные по предложенному способу гиббереллин-7-альдегиды с альдегидной группой Ё 6(1-положении показывают измененную биологическую активность по сравнению с исходными веществами. При этом характерно для полученн з1х меченых гиббереллин-7-альдегидов то, что мечение устойчивое и достигается с большой удельной радиоактивностью. Так как метку легко можно обнаружить или локализовать и она находится на такой позиции, на которой до сих пор не было обнаружено биохимических изменений, эти соединения, например, отлично подходят для исследования биосинтеза или метаболизма. Кроме того, полученные по предложенному способу меченые гиббереллин-7-апьдегиды служат исходными веществами для получения меченых природных гиббереллинов и их производных .

1 . СПОСОБ ЭПИМЕРИЗАЦИИ ГИББЕРЕЛЛИН-7-АЛЬДЕГИДОВ, отличающийся тем, что гиббереллин-7-альдегид с альдегидной группой в 6 еЛ- или 6/ -положении или его 14с-меченый аналог енолизируют щелочным агентом, а затем подвергают обработке донором водорода или дейтерия или трития в атмосфере инертного газа в среде органического растворителя. 2.Способ по п. 1, о т л и ч а ющ и и с я тем, что в качестве щелочного агента используют гидрид калия или динзопропиламид лития или 2,2,6,6-тетрамётилпиперидид лития. 3.Способ по п. 1,отлича ющ и и с я тем, что перед енолизацией проводят защиту кислых атомов водорода в исходных соединениях.fi