Способ первичного семеноводства гибридов кукурузы Советский патент 1992 года по МПК A01H1/04 

СО

С

Использование:-сельское хозяйство и биотехнология, для оздоровления вирусов и микроразмножения. Сущность изобретения: размножение осуществляют путем вычленения экспланта, культивирования его на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавкой регуляторов роста, субкультивирования до получения побегов в течение 4-6 недель на питательной среде Мурасиге-Скуга при содержании в среде аммония азотнокислого 412-825 мг/л, после чего пересаживают побеги на питательную среду для получения растений-регенерантов. 1 табл.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к питомниководству, и может быть использовано при оздоровлении посадочного материала плодовых культур от вирусных и микроплазменных заболеваний и микроразмножении.

Цель изобретения - повышение укоре- няемости побегов и сокращение сроков получения растений-регенерантов. Перед посадкой побегов на питательную среду для получения растений-регенерантов осуществляют субкультивирование в течение 4-6 нед. на питательной среде Мурасиге-Скуга при содержании аммония азотнокислого 412-825 мг/л среды (1 табл.).

Способ осуществля ют следующим образом.

Меристему вычленяют из активно растущих верхушек побегов кленовых подвоев яблони 54-118, 62-396, 2-46-77 размером 0,5-1,0 мм и помещают в пробирки с питательной средой Мурасиге-Скуга с добавлением аминокислот, сахарозы, витаминов, цитокинина 6-бензиламинопурин (6-БАП) в количестве 0,5 мг/л среды. Через 2-3 мес развившиеся конгломераты побегов и почек расчленяют с целью получения большего количества растений каждого мериклона. Субкультивирование на этом этапе проводят в колбах емкостью 100-150 мл на той же среде, но с увеличенным количеством 6-БАП (до 1,5 мг.л). Длительность культивирования 3- 4 пассажа по 4-6 нед каждый. В конце этапа размножения, т.е. перед получением растений-регенерантов в среде Мурасиге-Скуга количество аммония азотнокислого снижают до 412-825 мг/л среды.

Для укрепления используют микропобеги длиной 1,5-2,0 см. Их высаживают на разбавленную вдвое по минеральному составу среду Мурасиге-Скуга с добавлением индолил-масляной кислоты (ИМК) в количеVJ

Ю О

со

CJ XI

стве 1-2 мг/л. Можно основания черенков предварительно обработать водным раствором ИМК в концентрации 50 мг/л в течение 18 ч и высадить их на ту же среду, но без гормонов.

Зависимость укоренения побегов, р/о, от концентрации аммония азотнокислого в среде для пролиферации перед укоренением показана в таблице.

Полученные данные свидетельствуют о высокой степени стимуляции процесса ри- зогенеза за счет снижения концентрации аммония азотнокислого в 2-4 раза в среде для пролиферации. При содержании в питательной среде Мурасиге-Скуга аммония азотнокислого 825 мг/л укореняемость кло- новых подвоев яблони увеличилась в 1,2 и 1,7 раза по сравнению с контролем или на 14 и 31 %; в количестве 550 мг/л - 1,2 и 2,7 раза или на 14 и 44%; в количестве 412 мг/л - в 1,2-1,5 раза или на 18-20%. Увеличение укореняемости побегов происходит без снижения степени пролиферации и увеличения сроков получения растений-реге- нерантов. Сроки появления корней значительно сокращаются. Так, в варианте с полным содержанием аммония азотнокислого у подвоя 54-118 на среде с ИМК 1,5 мг/л через 3 нед. укоренилось 47% побегов, в варианте с 550 мг/л - 54%, В опыте с

и

0

замачиванием микрочеренков в ИМК 50 мг/л -соответственно 26 и 50%. Количество корней и особенно их длина тоже возрастали.

Таким образом, предлагаемый способ регенерации растений из меристемы позволяет стимулировать процесс ризогенеза у микрочеренков за счет снижения концентрации аммония азотнокислого в питательной среде на этапе пролиферации, предшествующем укоренению.

Формула изобретения Способ размножения яблони в культуре

15 ткани, включающий вычленение экспланта, культивирование его на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавкой регуляторов роста и последующее субкультивирование до получения побегов, пересадку их на пи20 тательную среду для получения растений- регенерантов, отличающийся тем, что, с целью повышения укореняемости побегов и сокращения сроков получения растений- регенерантов, перед пересадкой побегов на 25 питательную среду для получения растений- регенерантов осуществляют субкультивирование в течение 4-6 недель на питательной среде Мурасиге-Скуга при содержании аммония азотнокислого 412-825

30 мг/л среды.