Способ размножения вишни в культуре ткани Советский патент 1991 года по МПК A01H3/00 

1

(21)4680568/13

(22) 19.04.89

(46) 30.07.91. Бюл. №28

(71)Московская сельскохозяйственная академия им. К.А.Тимирязева

(72)Н.В.Агафонов, О.Н.Аладина, И.В.Жаркова. В.В.Фаустов и А.Г.Матушкин (53)581.143(088.8)

(56)Попов Ю.Г.. Высоцкий В.М. Культура стеблевых верхушек In vitro, как метод ускоренного размножения плодовых и ягодных растений. Вестник с/х науки, 1978, № 3. (54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ВИШНИ В КУЛЬТУРЕ ТКАНИ

(57)Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при клокаль- ном микроразмножении косточковых культур, в частности вишни. Целью изобретения является улучшение укореняемости побегов, повышение выхода растений - регенератов и повышение их приживаемости при высадке в нестерильные условия. Поставленная цель достигается тем, что перед вычленением апикальных меристбм растение вишни обрабатывают 0,05-0,075%-ным водным раствором паклобутразола. При этом вычленение меристем осуществляют в весенний период следующего года, после чего их помещают на питательную среду для введения в культуру ткани и после подращивания пересаживают на питательную среду с цитоканалами и культивируют до получения побегов. Побеги пассируют на питательную среду для укоренения, а затем полученные растения - регенераты переносят на питательный субстрат в нестерильные условия. При осуществлении способа процент пролифирирующих почек на среде с цитокининами до 45-75% против 20% в известном способе. Укореняемость возрастает до 50-80%, а в результате значительно возрастает количество полученных при размножении данным способом саженцев. 2 табл.

-ч.

МЭ

е

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при клокальном микроразмножении косточковых культур, в частности вишни. Целью изобретения является улучшение укореняемости побегов, повышение выхода растений - регенераторов и повышение их приживаемости при высадке в нестерильные условия. Поставленная цель достигается тем, что перед вычленением апикальных меристем растение вишни обрабатывают 0,05 - 0,075%-ным водным раствором паклобутразола. При этом вычленение меристем осуществляют в весенний период следующего года, после чего их помещают на питательную среду для введения в культуру ткани и после подращивания пересаживают на питательную среду с цитоканалами и культивируют до получения побегов. Побеги пассируют на питательную среду для укоренения, а затем полученные растения - регенераты переносят на питательный субстрат в нестерильные условия. При осуществлении способа процент профилирующих почек на среде с цитокининами до 45 - 75% против 20% в известном способе. Укореняемость возрастает до 50 - 80%, а в результате значительно возрастает количество полученных при размножении данным способом саженцев. 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при кло- нальном микроразмножении косточковых культур, в частности вишни.

Цель изобретения - улучшение укореняемости побегов, повышение выхода растений-регенератов, повышение их приживаемости при высадке в нестерильные условия.

П р и м е р. В период активного роста побегов на маточном растении проводят обработку маточных растений вишни водным раствором паклобутразола в концентрации 0,025,0,05.0.075% по д.в.. Внесение препарата в почву производят рано весной до сокодвижения в тех же концентрациях.

Весной следующего года с обработанных деревьев заготавливают верхние части побегов длиной до 1 см и боковые вегетативные почки с участком стебля. В качестве эксплантата используют верхушечные меристемы с двумя-тремя примордиальными листьями (300-400 мкм). Эксплантаты стерилизуют и проводят введение эксплантатов в культуру путем посадки меристематических верхушек на модифицированную питательную среду Мурасиге- Скуге и после подращивания в течение 3-х недель пересаживают на питательную ереО О (Л Ч) СО

О

у Готре с цитокинином 6-БПА в количестве 0,5 мг/л. После получения побегов в большем количестве, чем исходные эксплантаты, их пересаживают на среду Мурасиге-Скуга половинного состава, содержащую в качестве регулятора адксмн/ - ИМК в количестве 0,5 мг/л.

Условия выращивания: 16-ти часовой день, освещенность 3-5 тыс.лк, температура 22-26°С.

Испытания проводят на сорте вишни Апухтинская с крайне низкой эффективностью размножения в культуре ткани,

Результаты по изучению влияния предварительной обработки маточных растений водным раствором паклобутразола на образование боковых почек и образующихся из них побегов представлены в табл.1.

Как видно из табл.1, при обработке маточных растений водным раствором паклобутразола в концентрации 0,05, 0,075%, iпроцент пролифирирующих почек возрастает до 45-75%.

Несмотря на то, что внесение паклобутразола в почву (до сокодвижения 200 мл на дерево) в ряде случаев оказывает положительное влияние на пролиферацию пазушных почек и укореняемость микропобегов, большие выпады при пересадке в нестерильные условия существенно снижают общий выход растений. 8 связи с этим предпочтение следует отдать способу обработки - опрыскиванию препаратом в указанном интервале концентраций.

Отмечается высокий процент микрочеренков, пригодных для укоренения, В этом же варианте на этапе укоренения наиболее активно протекает процесс ризогенеза (укореняемость 80%), а появление корней у основной части побегов отмечается на 30 дней раньше, чем в контроле. При этом у микропобегов формируется более сильноразвитая система (в несколько раз увеличивается количество корней и Л порядков ветвле- ния, их длина, что, несомненно, играет большую роль при пересадке пробирочных растений в нестерильные условия, (табл.1). Влияние обработки раствором паклобутразола на укореняемость побегов, полученных на питательной среде Гобре, показано в табл.2.

Как видно из табл.2 укореняемость побегов в культуре ткани возрастает с 20% на контроле без обработки маточных растений до 50-80% на варианте с обработкой пакло- бутразолом.

Также из табл.2 видно, что при использовании предварительной (за год) обработки маточных растений-регенерантов раствором паклобутразола положительно сказывается на приживаемость в нестерильных условиях, значительно повышается процент

прижившихся растений: до 98% в сравнении с 12,5% без обработки.

Получаемый положительный эффект проявляется на конечном результате размножения - увеличивается количество саженцев, полученных предлагаемым способом (до 264 шт.) в сравнение с 1 шт на варианте без обработки.

Вычленение апикальных меристем через год после обрабртки маточных растений

паклобутразола обусловлено тем, что опрыскивание деревьев проводят летом в период активного роста побегов, а лучшее время года для введения эксплантатов в культуру - февраль-март, т.е. ранний весенний период следующего года. Тогда интенсивнее протекают процессы регенерации, и при ранних сроках посадки есть возможность получить растения-регенеранты к октябрю- ноябрю этого же года.

Таким образом, использование в технологии микроразмножения обработки маточных растений вишни трудноразмножаемых сортов водным раствором паклобутразола стимулирует пролиферацию пазушных почек, сокращает и упрощает этап укоренения, обеспечивает высокий выход пробирочных растений, имеющих хорошо развитую корневую систему.

Формула изобретения

Способ размножения вишни в культуре ткани, включающий вычленение апикальных меристем с маточных растений, введение эксплантатов в культуру путем посадки

на питательную среду и подращивания, пересадку на питательную среду с цитокини- нами и культивирование до получения побегов, пересадку побегов на питательную среду с ауксинами для укоренения и высадку полученных растений-регенерантов на субстрат в нестерильные условия, отличающийся тем, что, с целью улучшения укореняемости побегов, повышения выхода растений-регенерантов и повышение их

приживаемости при высадке в нестерильные условия, перед вычленением апикальных меристем в период интенсивного роста побегов на маточном растении его обрабатывают водным раствором паклобутразола

5 Б концентрации 0,05-0,075% по д.в., причем вычленение апикальных меристем осуществляют Б весенний период следующего года.

Т а б л н ц а 1

Влияние способа обработки растений растиором п.пклобутрлзола на пролифирацию почек и ускорлемость шюни

20

1,3

Таблице 2

Влияние обработки маточных растения на укоренение ,. пнхол РПСТРННЙ - дегенератов вишни

испытуемый сорт Апухтинская.

Редактор В.Ковтун

Составитель С.Куваева Техред М.Моргентал

20

.0,5

Корректор И.Муска