Способ определения количества @ -каротина в белоксодержащих продуктах Советский патент 1992 года по МПК G01N33/02 G01N33/48 

сл С

Изобретение относится к определению содержания Д-каротина в продуктах, содержащих белок. Цель изобретения - сокращение времени определения и упрощение анализа. Пробу материала обрабатывают полярным растворителем при механическом воздействии, экстракт переносят в делительную воронку, осадок декантируют и экстрагируют неполярным растворителем. К полученному объединенному экстракту добавляют воду, встряхивают для полной экстракции полярного растворителя из гек- санового экстракта. Окрашенный гексано- выйэкстрактподвергают спектрофотометрированию. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к определению содержания/ -каротина в пищевых продуктах, содержащих белок.

Цель изобретения -сокращение времени определения и упрощение анализа.

Для этого пробу обрабатывают полярным растворителем при соотношении объема полярного растворителя и массы пробы (5-7): 1. При механическом воздействии экстракт переносят в делительную воронку, осадок декантируют и экстрагируют неполярным растворителем при соотношении масс осадок: экстрагент 1:(5-15) 2-4 раза. Экстракт собирают в делительную воронку, добавляют воду в соотношении вода : объединенный экстракт 1:(2-6), встряхивают с целью полной экстракции полярного растворителя из гексанового экстракта. Нижний водно-спиртовой слой удаляют, а

окрашенный гексановый экстракт через фильтр с безводным N32S04 переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят до метки гексаном и определяют поглощение на спектрофотометре.

Содержание /5 -каротина (мг/г) определяют по формуле

Х

C-V

m

х| CJ О

сл

00

где С - количество каротина (мг) в 1 мг анализируемого раствора,определенное по гра- дуировочному графику;

V - объем анализируемого раствора, мл;

m - навеска вещества, г.

Построение градуировочного графика.

Навеску около 0,02 г кристаллов /3 -каротина, взвешенных с погрешностью не более 0,0002 г, тщательно переносят в мерную колбу на 100 см3, предварительно заполненную на 1 /3 гексаном. Следы каротина со стенок воронки и колбы смывают небольшими порциями по 5 см3 гексана. Объем раствора в мерной колбе доводят до метки гексаном и тщательно перемешивают (раствор А). Из колбы отбирают пипеткой соответственно 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; 1,4; 1,6; 1,8; 2,0 мл раствора А и доводят до метки гексаном. Определяют оптическую плотность полученных стандартных растворов на спектрофотометре при 451 нм. На основании полученных данных строят график зависимости оптической плотности стандартных растворов от концентрации в них /3 -каротина. По градуировочному графику определяют величину С.

Пример 1. Навеску плавленого сыра переносят в ступку и обрабатывают этанолом в соотношении 1:5, подвергают механической обработке, экстракт сливают в делительную воронку, осадок в ступке шесть раз экстрагируют гексаном в соотношении 1:5, Экстракт переносят в делительную воронку, добавляют воду в соотношении вода : объединенный экстракт 1:6, встряхивают, нижний водно-спиртовой слой удаляют. Гексановый экстракт через фильтр с безводным NaaS04 переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят до метки гексаном.

Поглощение раствора определяют на спектрофотометре СФ-26М на длине волны 451 нм. В качестве контрольного раствора используют гексан.

Содержание/ -каротина (мг/г) определяют по формуле

X

,С-У

m

где С - количество каротина (мг) в 1 мл анализируемого раствора, определенное по градуировочному графику;

V-объем анализируемого раствора, мл;

m - навеска вещества, г.

Пример 2. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают при соотношении его объема и массы пробы 7,5:1, четыре раза экстрагируют гексаном в соотношении 7,5:1, добавляют воду в соотношении 7,5:1.

Пример 3. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 10:1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 15:1, добавляют воду в соотношении 10:1.

Пример 4. Осуществляют аналогично

примеру 1, но этанолом обрабатывают в со5 отношении 2,5:1, шесть раз экстрагируют

гексаном в соотношении 30:1, добавляют

воду в соотношении 2,5:1.

В связи с тем, что не происходит полного связывания влаги в образце, количество 0 гексана для экстракции увеличивается вдвое.

Пример 5. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 10:1, добавляют воду в соотно- 5 шении 5:1. Такое количество гексана на экстракцию оказалось избыточным, последняя порция гексана не была окрашена.

Пример 6. Осуществляют аналогично

примеру 1, но этанолом обрабатывают в со0 отношении 12,5:1, три раза экстрагируют

гексаном в соотношении 10:1, добавляют

воду в соотношении 12,5:1.

Пример 7. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в со- 5 отношении 5:1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 5:1, добавляют воду в соотношении 5:1.

Произошло неполное извлечение /5 -каротина, так как такого количества гексана 0 недостаточно для полного извлечения.

Пример 8. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 5:1, один раз экстрагируют гек- 5 саном в соотношении 30:1, добавляют воду в соотношении 5:1.

При этом происходит неполное извлечение.

Пример 9. Осуществляют аналогично 0 примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 7,5:1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 20:1, добавляют воду в соотношении 7,5:1.

В таблице приведены результаты опре- 5 деления содержания {3 -каротина, стандартное отклонение и доверительный интервал, полученные в опытах по примерам 1,2,3, 6 и 9.

Пример 10. Осуществляют аналогич- 0 но примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 7,5:1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 2,5:1. При этом происходит неполное извлечение/9-кароти- на.

5 Предлагаемый способ определения /3 -каротина обеспечивает по сравнению с известным сокращение расхода растворителей, уменьшение объемов воды на промывку, а также уменьшение безвозвратных потерь растворителя. Все это улучшает условия труда.

Формула изобретения 1. Способ определения количества -каротина в белоксодержащих продуктах, предусматривающий экстракцию растворителем /3-каротина из пробы и измерение показателя, коррелирующего с количеством /2-каротина в исследуемой пробе, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени и упрощения, перед экстракцией пробу обрабатывают полярным растворителем при соотношении объема последнего и

,020

,050

,070

0,017 0,021 0,018 0,023 0,020

О, ОМ) 0,01(7 0,05) 0,056 0,048

0,068 0,064 0,062 0,072 0,075

0,121

0,100

0,07

Опыт 1 ±2,9б-10-э

±6,23-10

-3

-5

±6,71-10

,020

,050

,070

0,017 0,021 0,018 0,023 0,020

0, 0, 0,051 0,01)6 0,053

0,071 0,061) 0,068 0,072 0,075

0,121

0,071

0,060

Опыт 2 ±3,766-10

,-э

±4,26-10

±5,

,020

,050

,070

0,021 0,022 0,018 0,024 0,019

0,01)6 0, 0,01)1) 0,053 0,051

0,074 0,068 0,066 0,069 0,072

0,115

0,075

0,048

Опыт 3 + 2,9б-иГ

+ 4,53-Ю 3

±3,96-

0

массы пробы (5-7): 1, полученный осадок декантируют и экстрагируют, причем в качестве экстрагента используют неполярный растворитель при соотношении м,асс осадок : экстрагент 1:(5-15), при этом обработку неполярным растворителем осуществляют 2-4 раза с последующим объединением полученных экстрактов и промывают их водой при соотношении вода : объединенный экстракт 1:(2-6).

±3,77-10--3

±3,21-10 3

-5

±5,01-10

-з

±3,77-10

,-

,-э

+ 4,26-10

-з

±0,0107

±1,96-10

±3,87-10

±5,63-10

Продолжение таблицы