Способ получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного Российский патент 2025 года по МПК A61K36/537 A61K31/197 A61K31/198 B01D11/02 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способам получения лекарственных средств из растительного сырья, и касается получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного (Salvia officinalis L.), которая может быть использована в медицинской практике как противомикробное, антиоксидантное и противоопухолевое средство. Изобретение планируется к использованию для разработки технологий лекарственных форм для лечения заболеваний, ассоциированных, в первую очередь, грамположительными бактериями, преимущественно в рамках симптоматической терапии острых респираторных инфекций верхних дыхательных путей и инфекционных заболеваний полости рта.

Карнозоловая кислота представляет собой соединение дитерпеноидной структуры, более детально абиета-8,11,13-триен, замещенный гидроксигруппами в положениях 11 и 12 и карбоксигруппой в положении 20. Карнозоловая кислота - кристаллы от бесцветного до светло-желтого цвета, легко растворяется в ацетоне, хлороформе и нерастворима в воде. Соединение идентифицировано в растениях рода Rosmarinus L. и Salvia L. Большинство известных способов выделения карнозоловой кислоты реализованы с использованием в качестве исходного растительного сырья листьев розмарина лекарственного (Rosmarinus officinalis L.) и условно могут быть разделены на технологии получения карнозоловой кислоты в рамках комплексной переработки сырья (разделения нескольких индивидуальных соединений сырья) и индивидуального выделения карнозоловой кислоты. Для последнего варианта способов выделения чаще всего используется метод колоночной хроматографии для получения карнозоловой кислоты с высокой степенью чистоты.

Из исследованного уровня техники выявлен способ разделения карнозоловой и урсоловой кислоты экстракта розмарина лекарственного, базирующийся на методе жидкость-жидкостной экстракции (CN 114773425 А от 22.07.2022). Техническая сущность изобретения включает в себя экстрагирование сырья розмарина этанолом при соотношении массы розмарина к этанолу 0,1:1 кг/л, фильтрацию и концентрирование до содержания твердых веществ в растворе ~ 20%, жидкость-жидкостную экстракцию со смешанным растворителем - н-гексан:дихлорметан (1:0,1), концентрирование и охлаждение фаз для перекристаллизации карнозоловой кислоты и урсоловой кислоты с чистотой 71,38% и 21,48% соответственно. С точки зрения антропогенной нагрузки существенным недостатком способа выделения соединений розмарина является использование в технологии растворителя, относящегося согласно ОФС 1.1.0008.15 Государственной Фармакопеи XV издания «Остаточные органические растворители» к 1 классу токсичности растворителей -дихлорметана. Также способ не позволяет получить соединения высокой степени чистоты и требует использования дополнительных стадий очистки для использования выделенных соединений в пищевой и фармацевтической промышленности.

Известен способ комплексной переработки листьев и цветков розмарина лекарственного (CN 105669432 от 15.06.2016) с выделением урсоловой кислоты, карнозола и карнозоловой кислоты. Техническая сущность изобретения заключается в том, что лекарственное растительное сырье розмарина экстрагируют двукратно органическим растворителем (1:3 ~ 1:5)в течение 1 часа для каждой экстракционной процедуры, очищают активированным углем при перемешивании смеси (30 мин), концентрируют при пониженном давлении досуха, растворяют в 70-80% этаноле (1:3 ~ 1:5), фильтруют. Содержание урсоловой кислоты в фильтрате составило 30 ~ 40%. Дальнейшее концентрирование при пониженном давлении позволяет получить карнозоловую кислоту и карнозол, содержание которых составляет 40-45%. Несмотря на существенное снижение длительности цикла получения соединений описанный способ выделения индивидуальных соединений розмарина позволяет получить урсоловую кислоту, карнозол и карнозоловую кислоту низкой степени чистоты.

Известен способ получения карнозоловой кислоты из розмарина лекарственного (CN 102115442 A от 06.07.2011). Техническая сущность изобретения заключается в том, что на первой стадии для подготовки к колоночной хроматографии силикагель диспергируют в растворе фосфорной кислоты и этанола, вакуумируют ультразвуком, проводят рециркуляцию этанола и сушат для получения неподвижной фазы фосфорная кислота-силикагель; далее экстракт листьев розмарина растворяют в этил ацетате и смешивают с неподвижной фазой фосфорная кислота-силикагель, извлекая этилацетат; полученную смесь помещают на хроматографическую колонку, защищая систему азотом от коррозии, элюируют смесью этилацетат тексан (~5:95-18:82). Карнозоловую кислоту с чистотой 92% получают кристаллизацией соединения при перегонке полученного элюата.

Также известен способ выделения и очистки карнозоловой кислоты (CN 104058955 A от 24.09.2014), сущностью которого является выделение кислоты с помощью колоночной хроматографии при атмосферном давлении. Более детально, способ получения карнозоловой кислоты с чистотой выше 98% заключается в том, что методом ультразвуковой экстракции (при соотношении листьев розмарина и 75% спирт (1:16), мощности ультразвука - 200 Вт, времени извлечения - 40 мин и температуре - 35°С) получают экстракт розмарина, далее колонку традиционно «набивают» смесью силикагеля и экстракта розмарина, элюируют смесью бутилацетата и петролейного эфира (в объемном соотношении от 4:1 до 4:10) при температуре от 60°С до 90°С и скорости потока от 2 мл/мин. до 8 мл/мин, собирают сегментированные фракции, объединяют фракции одинакового состава, концентрируют полученный раствор под вакуумом до кристаллизации карнозоловой кислоты.

Известен способ получения карнозоловой кислоты с чистотой 95% из листьев розмарина лекарственного (CN 113956153 А от 21.01.2022).

Сущностью способа получения карнозоловой кислоты является экстрагирование листьев розмарина 60-80% спиртом на водяной бане с обратным холодильником при 50-80°С, концентрирование полученного фильтрата, разбавление водой, получение осадка неочищенного экстракта, содержащего карнозоловую кислоту; растворение экстракта в щелочи на водяной бане при 30-60°С в течение 20-60 мин (рН=7,0-9,5), добавление кислоты до рН=2,0-3,0, фильтрование выпавшего осадка, растворение осадка в спирте, смешивание с полиамидом (сорбентом для колоночной хроматографии), загрузка колонки «сухим» способом и элюирование подвижной фазы в градиентном режиме (вода - щелочной раствор), «подкисление» каждой фракции кислотой до рН=2,0-3,0, сбор осадка, сушка и перекристаллизация карнозоловой кислоты из раствора.

Из исследованного уровня техники выявлен способ получения карнозоловой кислоты из экстракта розмарина лекарственного (CN 115025077 А, опубл. 09.09.2022). Сущностью известного изобретения является способ получения карнозоловой кислоты, включающий в себя стадию получения жирорастворимого экстракта розмарина (замачивание лекарственного растительного сырья розмарина - высушенных стеблей и листьев - в водноэтанольной смеси до состояния «твердожидкой смеси», элюирование смеси на хроматографической колонке, разделение водо- и жирорастворимых компонентов методом ротационного выпаривания, сушка липидной («жировой») фракции), стадию растворения полученного экстракта в н-гексане (1:100) и экстрагирования карнозоловой кислоты и ее производных 3% раствором натрия гидрокарбоната, стадию осаждения карнозоловой кислоты из раствора хлористоводородной кислотой (рН=3) и стадию кристаллизации при температуре 4°С в течение 4 ч. Полученное в эксперименте соединение -карнозоловая кислота - представляет собой порошок желтого или светло-желтого цвета с чистотой 98%. Существенным недостатком способа получения карнозоловой кислоты является длительная стадия получения жирорастворимого экстракта, который является ключевым продуктом для выделения кислоты, включающая этапы колоночной хроматографии и фракционирования методом роторного выпаривания экстрактов.

Также известен способ получения высокоочищенных карнозола и карнозоловой кислоты из водноэтанольного экстракта цветков или листьев розмарина лекарственного в одном экстракционном цикле (CN 108358945 A от 30.01.2018). Сущность изобретения базируется на разделении ведущих соединений дитерпеноидной фракции сырья розмарина лекарственного на колонке смесью органических растворителей (хлороформ, метанол, петролейный эфир). Полученные фракции объединяют, выпаривают при низком давлении. Карнозол и карнозоловая кислота, выделенные по формуле данного изобретения, обладают чистотой 98% или более.

Из исследованного уровня техники выявлено, что колоночная хроматография - наиболее часто используемый метод при получении карнозоловой кислоты из растительного материала. Несмотря на возможности метода достигнуть удовлетворительного разделения соединений розмарина в опыте и получить карнозоловую кислоту высокой степени чистоты, колоночная хроматография имеет недостатки, связанные с нежелательной адсорбцией, вызывающей «размазывание» веществ на колонке и как следствие значительные потери. При условии низкого содержания карнозоловой кислоты в лекарственном растительном сырье данный недостаток приобретает важное значение при формировании траекторий последующих разработок выделения карнозоловой кислоты из лекарственного растительного сырья.

Также предшествующий уровень техники в большинстве своем использует в качестве лекарственного растительного сырья - источника карнозоловой кислоты - листья, побеги, экстракты розмарина лекарственного. С точки зрения культивирования лекарственного растения для покрытия потребности в сырье розмарин лекарственный является менее морозостойким по сравнению с шалфеем лекарственным. При легком минусе побеги розмарина подмерзают, а при температуре ниже 8-10°С растения погибают. Таким образом, шалфей лекарственный является более перспективным источником получения кранозоловой кислоты для фармацевтических целей.

Задача заявляемого изобретения является разработка нового способа получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного.

Техническим результатом заявленного изобретения является повышение технологичности способа за счет исключения стадии колоночной хроматографии; повышение экологичности производства за счет исключения из технологического цикла высокотоксичных растворителей.

Разработка технологической схемы получения карнозоловой ксилоты, максимально приближенной к технологиям, используемым на фармацевтическом производстве (циркуляционная экстракция). При этом достигается значительное сокращение расхода растворителя в производственном цикле за счет использования экстракторов непрерывного цикла типа Сокслета, а также регенерированного экстрагента.

Технический результат заявленного изобретения достигается за счет того измельчают листья шалфея лекарственного до размера частиц не более 1 мм, затем укладывают измельченные листья в двойной слой марли - «резервуар» для растительного сырья, помещают «резервуар» в циркуляционный экстрактор Сокслета, заливают в экстракционную колбу н-гексан в соотношении: измельченные листья шалфея:н-гексан ~ 1:12, собирают экстрактор Сокслета с экстракционной колбой и обратным холодильником и устанавливают на кипящую водяную баню, экстрагируют листья шалфея лекарственного посредством рециркуляции н-гексана при температуре кипения в течение 2 часов, получают экстракт листьев шалфея лекарственного, проводят дважды обработку экстракта в делительной воронке 10% раствором натрия гидрокарбоната в соотношении, равным объему полученного гексанового экстракта, добавляют к объединенным воднощелочным извлечениям разведенную хлористоводородную кислоту до рН=3, обрабатывают дважды в делительной воронке н-гексаном в соотношении, равным объему воднощелочных фракций, с объединенными гексановыми извлечениями проводят упаривание экстракта под вакуумом при температуре кипения н-гексана до момента образования пересыщенного раствора, концентрированный жидкий экстракт высушивают на воздухе, полученные кристаллы собирают и подвергают вакуумной сушке.

Детали, признаки, а также преимущества настоящего изобретения следуют из нижеследующего описания реализации заявленного технического решения с использованием чертежей, на которых показано:

Фиг. 1 - электронные УФ-спектры гексановых экстрактов из листьев розмарина лекарственного, полученных заявленным способом методом циркуляционной экстракции в аппарате Сокслета, в диапазоне длин волн 200-400 нм: по оси абсцисс обозначена длина волны (λ, нм), по оси ординат (А) - оптическая абсорбция раствора А. Спектр соответствует УФ-спектру стандартного образца карнозоловой кислоты с максимумом адсорбции при 285 нм.

Фиг. 2 - спектр ЯМР 1Н (полученный методом протонного ядерного магнитного резонанса) карнозоловой кислоты, выделенной из листьев шалфея лекарственного по заявленному способу получения.

Фиг. 3 - спектр ЯМР 13С (полученный методом ядерного магнитного резонанса углерода) карнозоловой кислоты, выделенной из листьев шалфея лекарственного по заявленному способу получения.

Способ осуществляется следующим образом.

Способ получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного, заключается в том, что растительное сырье - листья шалфея лекарственного - предварительно измельчают до размера частиц не более 1 мм, затем укладывают измельченные листья в двойной слой марли («резервуар» для растительного сырья), помещают «резервуар» в циркуляционный экстрактор Сокслета, заливают в экстракционную колбу н-гексан в соотношении: измельченные листья шалфея:н-гексан ~ 1:12, собирают экстрактор Сокслета с экстракционной колбой и обратным холодильником и устанавливают на кипящую водяную баню, экстрагируют листья шалфея лекарственного посредством рециркуляции н-гексана при температуре кипения в течение 2 часов, получают экстракт листьев шалфея лекарственного, проводят дважды обработку экстракта в делительной воронке 10% раствором натрия гидрокарбоната в соотношении, равным объему полученного гексанового экстракта, добавляют к объединенным воднощелочным извлечениям разведенную хлористоводородную кислоту до рН=3, обрабатывают дважды в делительной воронке н-гексаном в соотношении, равным объему воднощелочных фракций, с объединенными гексановыми извлечениями проводят упаривание экстракта под вакуумом при температуре кипения н-гексана до момента образования пересыщенного раствора, концентрированный жидкий экстракт высушивают на воздухе, полученные кристаллы собирают и подвергают вакуумной сушке.

В цикле экспериментов по разработке способа выделения карнозоловой кислоты сырье шалфея лекарственного представляло собой высушенные листья культивируемого на территории Ботанического сада лекарственных растений ФГБОУ ВО «Казанский государственный медицинский университет» полукустарника Salvia officinalis L. Листья шалфея заготовлены в соответствии с общими требованиями к заготовке и сушке растительного сырья. Листья шалфея лекарственного соответствовали показателям ФС 2.5.0051.15 «Шалфея лекарственного листья» и дополнительно измельчались до размера частиц 1 мм для максимального увеличения поверхности контакта фаз, уменьшения внутреннего диффузионного сопротивления и, как следствие, снижения длительности процесса экстрагирования (Salamatin А.А, Khaliullina A.S, Khaziev R.S. Extraction of aromatic abietane diterpenoids from Salvia officinalis leaves by petroleum ether: Data resolution analysis // Industrial Crops and Products. - 2020. - Vol. 143. - Art. №111909; патент RU 2786889 C1, МПК A61K 36/61, A61K 127/00, B01D 11/02, A61P 31/04, МПК A61K 35/78, опубл. 26.12.22).

Заявленный способ получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного осуществляется в целом по следующей последовательности действий:

1 - берут сырье - листья шалфея лекарственного - и проводят его предварительное измельчение до размера частиц не более 1 мм;

2 - измельченные листья укладывают в двойной слой марли («резервуар» для растительного сырья);

3 - помещают «резервуар» в экстрактор Сокслета (прибор для лабораторного воспроизведения метода циркуляционного экстрагирования) таким образом, чтобы «резервуар» с сырьем свободно входил в экстрактор и омывался экстрагентом и его парами;

4 - заливают в экстракционную колбу н-гексан в качестве экстрагента в соотношении: измельченные листья шалфея:н-гексан ~ 1:12;

5 - устанавливают экстрактор Сокслета на экстракционную колбу, сверху экстрактора Сокслета закрепляют обратный холодильник и устанавливают экстракционную систему на кипящую водяную баню;

6 - экстрагируют листья шалфея лекарственного посредством рециркуляции экстрагента (н-гексана) при температуре кипения в течение 2 часов, получают экстракт листьев шалфея лекарственного;

7 - переносят полученный экстракт в делительную воронку и обрабатывают 10% раствором натрия гидрокарбоната в соотношении 1:1 (предварительно измеряется объем гексанового экстракта);

8 - далее проводят жидкость-жидкостную экстракцию «ручным» способом в течение ~ 3 минут;

9 - далее водный слой собирают в делительную воронку;

10 - далее проводят вакуумную сушку густого экстракта с получением целевого продукта;

11 - проводят контроль целевого продукта на соответствие нормам качества;

12 - экстрагент н-гексан регенерируют и используют для экстрагирования новой партии сырья - листьев шалфея лекарственного;

10 - действия, описанные в п. 7-9 повторяют для реализации 2 этапа «жидкость-жидкостной» экстракции и получения объединенных щелочных фракций;

11 - далее формируют слой н-гексана на поверхности (верхний слой органического растворителя предотвращает вспенивание водной фазы);

12 - добавляют при перемешивании разведенную хлористоводородную кислоту (до рН=3) для нейтрализации натрия гидрокарбоната. При этом водная фаза меняет цвет от красноватого до оранжево-красного с переходом в желто-зеленый цвет;

13 - к экстракционной смеси добавляют н-гексан (в соотношении 1:1) (предварительно измеряется объем водной фазы);

14 - далее проводят жидкость-жидкостную экстракцию «ручным» способом в течение ~ 3 минут и оставляют до полного расслоения фаз;

15 - собирают водный и гексановый слой в колбу и мерный цилиндр соответственно;

16 - переносят водный слой из колбы в делительную воронку, используемую в п. 9-14.

17 - действия, описанные в п. 13-15, повторяют для достижения полноты экстракции карнозоловой кислоты в н-гексан.

18 - далее полученные гексановые извлечения подвергают вакуум-упариванию при температуре кипения растворителя (~69°С) до объема, не нарушающего предел растворимости карнозоловой кислоты (при упаривании в гексановом экстракте не должно появляться осадка).

19 - переносят концентрированный жидкий экстракт в стеклянный химический стакан объемом для кристаллизации карнозоловой кислоты при комнатной температуре.

20 - собирают полученные кристаллы со стенок стакана и подвергают вакуумной сушке для получения карнозоловой кислоты со степенью чистоты 95%.

Предложен способ экстрагирования и очистки карнозоловой кислоты с степенью чистоты 95%, который включает экстракцию и очистку карнозоловой кислоты с помощью комбинации метода циркуляционного экстрагирования и жидкость-жидкостной экстракции, учитывая химические свойства карбоксильной группы, присутствующей в структуре, и липофильные характеристики самой карзоловой кислоты.

Пример осуществления заявленного технического решения.

1 - берут 30,0 г измельченных до размера частиц 1 мм листьев шалфея лекарственного;

2 - сырье помещают в двойной слой марли, формируя «резервуар» для растительного сырья;

3 - далее «резервуар» помещают в экстрактор Сокслета таким образом, чтобы «резервуар» с сырьем свободно входил в экстрактор и омывался экстрагентом и его парами;

4 - в экстракционную колбу объемом 1000 мл заливают 350 мл н-гексана;

5 - экстракционную колбу соединяют с экстрактором Сокслета, присоединяют к обратному холодильнику и устанавливают экстракционную систему на кипящую водяную баню;

6 - проводят экстрагирование в течение 2 часов посредством рециркуляции н-гексана при температуре кипения растворителя (~69°С). При этом количество циркуляций составляет не менее 10 циклов;

7 - полученный экстракт помещают в делительную воронку объемом 1000 мл и добавляют 10% раствор натрия гидрокарбоната (в соотношении 1:1);

8 - экстракционную смесь взбалтывают «ручным» способом в течение ~ 3 минут и оставляют до полного расслоения фаз. В процессе «жидкость-жидкостной» экстракции водная фаза приобретает красноватый оттенок.

9 - водный слой полностью собирают в делительную воронку объемом 2000 мл;

10 - действия, описанные в п. 7-9 повторяют для реализации 2 этапа «жидкость-жидкостной» экстракции и получения объединенных щелочных фракций;

11 - в щелочные фракции вливают 10 мл гексана для формирования слоя толщиной 0.5-1 см на поверхности;

12 - добавляют при перемешивании разведенную хлористоводородную кислоту (до рН=3). При этом водная фаза меняет цвет от красноватого до оранжево-красного с переходом в желто-зеленый цвет;

13 - к экстракционной смеси добавляют н-гексан (в соотношении 1:1);

14 - экстракционную смесь взбалтывают «ручным» способом в течение ~ 3 минут и оставляют до полного расслоения фаз.

15 - водный слой собирают в колбу на 2000 мл, гексановый слой переносят в мерный цилиндр объемом 1000 мл;

16 - водный слой из колбы переносят в делительную воронку объемом 2000 мл, используемую в п. 9-14.

17 - действия, описанные в п. 13-15, повторяют для достижения полноты экстракции карнозоловой кислоты в н-гексан, при этом жидкость в мерном цилиндре имеет золотистый цвет;

18 - полученные гексановые извлечения подвергают вакуум-упариванию при температуре кипения растворителя (~69°С) до объема, не нарушающего предел растворимости карнозоловой кислоты;

19 - концентрированный жидкий экстракт переносят в стеклянный химический стакан объемом 250 мл для кристаллизации карнозоловой кислоты при комнатной температуре;

20 - полученные кристаллы собирают со стенок стакана и подвергают вакуумной сушке для получения готового индивидуального соединения карнозоловой кислоты со степенью чистоты 95%.

Таким образом, технологический выход целевого продукта (густого экстракта) от массы 30 г исходного сырья при получении фармацевтической субстанции в лабораторных условиях составляет 0,83% от массы исходного сырья.

Структура выделенной карнозоловой кислоты подтверждена данными 1Н-, 13С ЯМР спектроскопии. (Фиг. 2, Фиг. 3). Основная часть протонов карнозоловой кислоты (Фиг. 2) резонирует в интервале 0.9-3.7 м.д. В этой области наблюдаются 2 синглета и 2 дублета с КССВ 6.8. Гц соответствующим метальным протонам. Наличие ОН-групп при С-11 и С-12 фиксируется уширенными синглетами в 1Н ЯМР спектре при 5.7 и 7.0 м.д. В сильных полях при 6.6. м.д. наблюдается синглет ароматического протона при С-14.

В 13С ЯМР спектре (Фиг. 3) присутствуют все 20 сигналов атомов углерода. В сильных полях проявляются сигналы СН₃ группы (С-16, С-17, С-18, С-19). В области 120-145 м.д. расположены сигналы ароматических углеродов в различном окружении. В слабом поле 182.м.д. проявляется сигнал карбоксильной группы.

Предложенный способ способа получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного позволяет получить стабильное индивидуальное соединение, не требует специализированного дорогостоящего оборудования, высоких затрат на реактивы и растворители, исключает стадии длительной многостадийной очистки (реализуемой ранее методом колоночной хроматографии). Внедрение заявленного способа получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного на фармацевтическое производство позволит получать как стандартные образцы высокой степени чистоты, так и фармацевтические субстанции для разработки лекарственных средств с более низкими эксплуатационными расходами по сравнению с описанными традиционными решениями получения индивидуальных соединений растительного происхождения.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного. Способ получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного, включающий измельчение листьев шалфея лекарственного до размера частиц не более 1 мм, затем укладывают измельченные листья в двойной слой марли - «резервуар» для растительного сырья, помещают «резервуар» в циркуляционный экстрактор Сокслета, заливают в экстракционную колбу н-гексан в соотношении: измельченные листья шалфея:н-гексан ~ 1:12, собирают экстрактор Сокслета с экстракционной колбой и обратным холодильником и устанавливают на кипящую водяную баню, экстрагируют листья шалфея лекарственного посредством рециркуляции н-гексана при температуре кипения в течение 2 часов, получают экстракт листьев шалфея лекарственного, проводят дважды обработку экстракта в делительной воронке 10% раствором натрия гидрокарбоната в соотношении, равном объему полученного гексанового экстракта, добавляют к объединенным воднощелочным извлечениям разведенную хлористоводородную кислоту до рН=3, обрабатывают дважды в делительной воронке н-гексаном в соотношении, равном объему воднощелочных фракций, с объединенными гексановыми извлечениями проводят упаривание экстракта под вакуумом при температуре кипения н-гексана до момента образования пересыщенного раствора, концентрированный жидкий экстракт высушивают на воздухе, полученные кристаллы собирают и подвергают вакуумной сушке. Вышеописанное изобретение обеспечивает повышение технологичности способа за счет исключения стадии колоночной хроматографии, повышение экологичности производства, сокращение расхода растворителя, получение карнозоловой кислоты со степенью чистоты 95%. 3 ил.

Способ получения карнозоловой кислоты из листьев шалфея лекарственного, включающий измельчение листьев шалфея лекарственного до размера частиц не более 1 мм, затем укладывают измельченные листья в двойной слой марли - «резервуар» для растительного сырья, помещают «резервуар» в циркуляционный экстрактор Сокслета, заливают в экстракционную колбу н-гексан в соотношении: измельченные листья шалфея:н-гексан ~ 1:12, собирают экстрактор Сокслета с экстракционной колбой и обратным холодильником и устанавливают на кипящую водяную баню, экстрагируют листья шалфея лекарственного посредством рециркуляции н-гексана при температуре кипения в течение 2 часов, получают экстракт листьев шалфея лекарственного, проводят дважды обработку экстракта в делительной воронке 10% раствором натрия гидрокарбоната в соотношении, равном объему полученного гексанового экстракта, добавляют к объединенным воднощелочным извлечениям разведенную хлористоводородную кислоту до рН=3, обрабатывают дважды в делительной воронке н-гексаном в соотношении, равном объему воднощелочных фракций, с объединенными гексановыми извлечениями проводят упаривание экстракта под вакуумом при температуре кипения н-гексана до момента образования пересыщенного раствора, концентрированный жидкий экстракт высушивают на воздухе, полученные кристаллы собирают и подвергают вакуумной сушке.