Способ канюлизации ликворных пространств головного мозга Советский патент 1992 года по МПК A61M5/00 

Изобретение относится к области биологии, а именно к нейрофармакологии.

Цель изобретения - снижение травма- тичности и повышение эффективности использования животных.

Способ осуществляют следующим образом.

Животное помещают под лабораторный колокол и кладут туда вату, смоченную эфиром. После того, как у крысы возникают вестибулярные нарушения, дачу наркоза прекращают. Наркотизированную крысу фиксируют в стереотаксическом аппарате, скальпелем производят разрез покровных тканей черепа на протяжении 4-5 мм, в водителе стереотаксиса фиксируют и при помощи манипуляторов вставляют вертикально канюлю, которая выпотнена в виде иглы, имеют два боковых окна расположенных на уровне боковых желудочков, усики для фиксации в костях свода и основания черепа и мандрен.

По координатам атласа располагают кончик канюли в точке отстоящей от брегмы

на 1,5 мм латерально и 0,8 мм кзади. Производят введение канюли на глубину 9,7-10,0 мм от поверхности черепа. При этом канюля фиксируется в костях свода и основания черепа. Освобождают канюлю из водителя стереотаксиса, а крысу из рамы стереотаксиса.

Забор ДСЖ или введение препаратов производят практически сразу по окончании канюлизации. Эти процедуры повторяют необходимое число раз.

Пример. Крысе-самцу линии Вистар массой 270 г дают эфирный рауш-наркоз. После этого животное фиксируют в стереотаксическом аппарате СЭЖ-5. По саггиталь- ной линии скальпелем разрезают покровные ткани черепа на протяжении 5 мм и находят перекрест брегмы. В головке стереотаксиса зажимают иглу-канюлю и при помощи манипуляторов и отвеса выставляют ее вертикально. По координатам атласа располагают кончик канюли в точке, отстоящей от брегмы на 1,5 мм влево и 0,8 мм кзади, после чего вводят канюлю на глубину

VI СО

го со

9,7 мм от поверхности черепа. После завершения введения канюли ее освобождают из водителя стереотаксиса, а крысу - из рамы прибора,

Через 2 дня у крысы в условиях свободного поведения производят забор цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) при помощи инсулинового шприца и пупочного полихлорвинилового катетера, используемого в качестве переходника, получают 0,05 мл ЦСЖ. ЦСЖ замораживают и хранят при Т .

Еще через 2 дня животное подвергают электростимуляции (ЭС) коры мозжечка. Для этого крысу под эфирным рауш-нарко- зом фиксируют в стереотаксическом аппарате и через предварительно просверленное отверстие вводят биполярный электрод (пирамидная долька коры червя мозжечка). Через 10 мин после дачи наркоза производят сеанс ЭС(2 мВ, 100 Гц, 0,5 мс, 4 с) и электрод извлекают. После ЭС производят забор ЦСЖ (0,05 мл). ЦСЖ хранят приТ-18°СЧерез 5 дней животное подвергают ЭС хвостатого ядра. Для этого крысу под эфирным рауш-наркозом фиксируют в стереотаксическом аппарате и через высверленное бором отверстие по координатам атласа ,2, ,5, ,5 вводят биполярный электрод, фиксированный в головке стерео- таксиса. Через 10 мин после дачи наркоза

производят ЭС (2 мВ, 100 Гц, 0,5 мс, 3 с) и электрод удал я ют. После ЭС производят забор ЦСЖ (0,05 мл) при помощи шприца и катетеоа. ЦСЖ замораживают и хранят при

Т-18°С.

Через 6 дней (09.10.90) животное подвергают ЭС верхних бугорков четверохолмия. Для этого крысу под эфирным рауш-наркозом фиксируют в стереотаксическом аппарате и через высверленное бором отверстие по координатам атласа ,3, ,0, ,5 вводят биполярный электрод, фиксированный в головке стереотаксиса. Через 10 мин после дачи наркоза производят ЭС (4 мВ, 100 Гц, 0,5 мс, 5 с) и электрод извлекают. После ЭС производят забор 0,05 мл ЦСЖ при помощи шприца и катетера.

Формула изобретения

1,Способ канюлизации ликворных пространств головного мозга путем стереотак- сического введения и фиксации канюли с боковыми отверстиями в костях свода черепа, отличающийся тем, что, с целью снижения травматичности и повышения эффективности использования животных, канюлю дополнительно фиксируют в костях основания черепа.

2.Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют канюлю с заостренными выступами на обоих концах.

Изобретение относится к области биологии и может быть использовано в нейро- фармакологии. Способ позволяет снизить травматичность и повысить эффективность использования животных, что достигается стереотаксическим введением канюли, выполненной в виде иглы с заостренными выступами и боковыми отверстиями и фиксацией ее в костях свода и основания черепа. 1 з.п. ф-лы.