Способ моделирования психомоторных пароксизмов Советский патент 1990 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к невропатологии и психиатрии.

Цель изобретения - повышение воспроизводимости способа,.

Способ осуществляется следующим образом

Крысе линии Вистар производят 17-25 ежедневных однократных внутри- брюшинных введений пикротоксина в дозе 1,0-1,3 мг/кго Первые 3-4 введения пикротоксина не вызывают у животного никаких поведенческих реакций В дальнейшем отмечается появление и прогрессирующее нарастание выраженности судорожных проявлений от отдельных миоклонических вздрагиваний до генерализованных клонйко-тони-, ческих припадков с падением на бок, вегетативными расстройствами (мочеиспускание, саливация) и постприступной депрессией После 17-25 введений пикротоксина генерализованные судорожные припадки,; Появление судорожных реакций указанной интенсивности служит критерием прекращения введений пикротоксина. На следующий день после последней инъекции эпилептоге- на животному д ают гексеналовый наркоз (100 мг/кг), после чего фиксируют в стереотоксическом аппарате. Скальпелем производят разрез мягких тканей головыQ По координатам стерео- токсического атласа определяют переднюю и латеральную координаты вентральной тегментальной областие При помощи бора в найденной точке сверлят трепанационное отверстие, в которое на глубину 8,0 мм опускают проводную канюлю с внутренним диаметром 0,6 мм. Канюлю фиксируют к костям черепа при помощи зубной пластмассы. После того, как пластмасса застыла, аналогичным образом производят бипятеральную имплантацию проводящей канюлио Для регистрации электрической активности структур головного мозга производят импланСл

тацию монополярных Константиновых электродов в гшгпокамп, хвостатое ядро, сенсомоторную кору, Индифферентный электрод фиксируют в носовых костях0 Фиксация электродов к костям черепа также осуществляется при помощи зубной пластмассы. Через 10-15 дней после операций (10 15629534

ствами. Генерализованные судорожные припадки отмечаются в дальнейшем после каждого введения пикротоксина. г На следующий день после 17-й инъекции пикротоксина, крысу под гексена- ловым наркозом (100 мг/кг) фиксируют в стереотаксическом аппарате, после чего производят билатеральную им

Изобретение относится к медицине, а именно к невропатологии и психиатрии. Цель - повышение воспроизводимости способа. С этой целью животному в течение 17 - 25 дней ежедневно внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0 - 1,3 мг/кг. Затем билатерально в зону вентральной тегментальной области вводят 20 - 30 нг мусцимола и через 5 - 10 мин после этого внутрибрюшинно вводят 1,0 - 1,3 мг/кг пикротоксина. Применение способа позволяет повысить воспроизводимость модели психомоторных пароксизмов на 53% по сравнению с прототипом.

15 дней - стандартный послеоперацион-JQ плантацию канюль в зону вентральной

20

25

ный период) крысе в условиях свободного поведения в проводящую канюлю вводят инъекционную канюлю с внутренним диаметром 0В4 мм, присоединенную к микроинъектору,, в кото- 15 рьч предварительно набран мусцимол, раз г.еденный в 0,9%-ном растворе NaClo Мусцимол вводят в количестве 20-30 нг в объеме 1-3 мкл растворителя; введение осуществляют в течение 2 мин, после чего еще в течение 2 мин инъекционная канюля остается к зоне введения для предотвращения вытекания раствора. Аналогичным образом производят введение мусцимола билатеральное Через 5-10 мин после окончания введения мусцимола крысе производят внутрибрюшинную инъекцию пикротоксина в дозе 1,0-1,3 мг/кг« Для регистрации электрической активности структур головного мозга животного сажают в индивидуальную экранированную камеру и присоединяют к элекгроэнцефалографу На 10-15-й минуте после введения консульсанта у животных наблюдают развитие психомоторных эпилептических припадков,

I

Пример 1, Крысе-самцу линии

Вистлр массой 250 г производят внут- рибришшнное введение пикротоксина в дозе ,3 мг/кг Наблюдение в течение 60 мин не выявляет у животного никаких судорожных реакцийо В дальнейшем

30

35

40

тегментальной области по координатам стереотаксического атласа: ,8; ,0; ,0„ Для регистрации электрической активности структур головно го мозга производят также имплантацию монополярных электродов в. сенсомоторную кору, хвостатое ядро (АР -0,3; ,5; Н 1,5) и дорсальный гиппокамп (АР -4,8; I 3,5, Н 3,5)0 Через 10 дней после операции животному при помощи микроинъек- торэ через канюли вводят мусцимол в дозе 30 нг в объеме 3 мкл Введение мусцимола не вызывает у животного ни каких поведенческих изменений„ Через 5 мин после микроинъекции мусцимола животному производят внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1,3 мг/ /кг0 Через 7 мин после введения эпи- лептогена у животного отмечаются сла бые судорожные вздрагивания головы. На 11-й минуте судорожные вздрагивания исчезают,, У животного появляются выраженные поисковые движения морды. Крыса совершает периодические пробеж ки по клетке,, перемежающиеся кратковременными остановками, во время которых: она как бы прислушивается к чему-то„ На 20-й минуте после введения пикротоксина крыса забивается в угол, перебирает передними лапами, пищит (немотивированная защита, вок лизация )0 При предъявлении световых (вспышка света), звуковых (хлопок по

тегментальной области по координатам стереотаксического атласа: ,8; ,0; ,0„ Для регистрации электрической активности структур головного мозга производят также имплантацию монополярных электродов в. сенсомоторную кору, хвостатое ядро (АР -0,3; ,5; Н 1,5) и дорсальный гиппокамп (АР -4,8; I 3,5, Н 3,5)0 Через 10 дней после операции животному при помощи микроинъек- торэ через канюли вводят мусцимол в дозе 30 нг в объеме 3 мкл Введение мусцимола не вызывает у животного никаких поведенческих изменений„ Через 5 мин после микроинъекции мусцимола животному производят внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1,3 мг/ /кг0 Через 7 мин после введения эпи- лептогена у животного отмечаются слабые судорожные вздрагивания головы. На 11-й минуте судорожные вздрагивания исчезают,, У животного появляются выраженные поисковые движения морды. Крыса совершает периодические пробежки по клетке,, перемежающиеся кратковременными остановками, во время которых: она как бы прислушивается к чему-то„ На 20-й минуте после введения пикротоксина крыса забивается в угол, перебирает передними лапами, пищит (немотивированная защита, вокализация )0 При предъявлении световых (вспышка света), звуковых (хлопок по

подобные введения пикротоксина произ-Д5 столу) t болевых (защипывание хвоста

водят однократно ежедневноо После 4-го введения эпилептогена у крысы через 15 мин после инъекции отмечаются судорожные вздрагивания головы и передних конечностей,, После 12-го зведения пикротоксина у крысы - через 20 мин после инъекции появляются повторные клонические судороги всего туловища и передних конечностей, которые через 3 мин после их возникновения переходят в генерализованный клонико-тонический припадок с. падением на бок, постприступной депрессией и вегетативными расстрой50

55

раздражителей крыса не реагирует на них, В ЭЭГ указанным поведенческим изменениям соответствует появление комплексов спайк-волновых разрядов частотой 4 кол/с, наиболее выраженных в гиппокампей Продолжительность отдельных пароксизмов составляет 30-60 с, частота их возникновения 0,5-1 в мино Общая продолжительность поведенческих и ЭЭГ изменений составляет 50 мин. Наблюдение в течение 90 мин после окончания психомоторных проявлений не выявляет у животного судорожных реакций.

0

5

0

5

0

тегментальной области по координатам стереотаксического атласа: ,8; ,0; ,0„ Для регистрации электрической активности структур головного мозга производят также имплантацию монополярных электродов в. сенсомоторную кору, хвостатое ядро (АР -0,3; ,5; Н 1,5) и дорсальный гиппокамп (АР -4,8; I 3,5, Н 3,5)0 Через 10 дней после операции животному при помощи микроинъек- торэ через канюли вводят мусцимол в дозе 30 нг в объеме 3 мкл Введение мусцимола не вызывает у животного никаких поведенческих изменений„ Через 5 мин после микроинъекции мусцимола животному производят внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1,3 мг/ /кг0 Через 7 мин после введения эпи- лептогена у животного отмечаются слабые судорожные вздрагивания головы. На 11-й минуте судорожные вздрагивания исчезают,, У животного появляются выраженные поисковые движения морды. Крыса совершает периодические пробежки по клетке,, перемежающиеся кратковременными остановками, во время которых: она как бы прислушивается к чему-то„ На 20-й минуте после введения пикротоксина крыса забивается в угол, перебирает передними лапами, пищит (немотивированная защита, вокализация )0 При предъявлении световых (вспышка света), звуковых (хлопок по

5 столу) t болевых (защипывание хвоста

0

5

раздражителей крыса не реагирует на них, В ЭЭГ указанным поведенческим изменениям соответствует появление комплексов спайк-волновых разрядов частотой 4 кол/с, наиболее выраженных в гиппокампей Продолжительность отдельных пароксизмов составляет 30-60 с, частота их возникновения 0,5-1 в мино Общая продолжительность поведенческих и ЭЭГ изменений составляет 50 мин. Наблюдение в течение 90 мин после окончания психомоторных проявлений не выявляет у животного судорожных реакций.

Таким образом, у животного воспроизведена модель психомоторного пароксизма.

Пример 2, Крысе-самке линии Вистар массой 220 г производят внут- рибрюгаинное введение пикротоксина в дозе 1,0 мг/кг. Наблюдение в течение 60 мин не выявляет у животного судорожных реакций, В дальнейшем подобные введения пикротоксина производят ежедневно однократно. После 12-го введения пикротоксина через 15 мин после инъекции у крысы отмечается появление слабых миоклбни- ческих вздрагиваний головы и передних конечностей0 На 17-й минуте после 18-го введения пикротоксина -у животного отмечаются повторные клони ческие судороги всего туловища и передних конечностей, которые в течение 5 мин переходят в генерализованный судорожный припадок с падением н бок, постприступной депрессией и вегетативными расстройствами. В дальнейшем судорожные припадки отмечаются в ответ на каждое введение пикротоксина,, На следующий день после последней (25-й) инъекции конвульсанта животное под гексеналовым наркозом ( 100 мг/кг) фиксируется в стереотак- сическом аппарате. По координатам сте реотаксического атласа, крысе проиэ- водят билатеральную имплантацию ка-i июль в зону вентральной тегменталыюй области (,8; 1 1,0; Н 8,0). Для регистрации электрической активности структур головного мозга производят имплантацию монополярных константановых электродов в сенсо- моторную кору, гиппокамп (АР -4,8; I 3,5; Н / 3,5), хвостатое ядро (АР -0,3; 1 1,5; Н 1,5)„ Индифферентный электрод крепят в носовых костях.

Через 10 дней после операции животному при помощи микроинъектора производят билатеральное введение в канюли мусцимола в дозе 20 нг в объеме 1 мкл. Введение мусцимола не вызывает у крысы никаких поведенческих изменений. Через 5 мин после микроинъекции мусцимола про из водя т внутри брюшинное введение пикротоксина в дозе 1,0 мг/кг. Через 10 мин после

5

0

5

0

0

5

0

5

0

введения пикротоксчна у животного отмечаются незначительные судорожные вздрагивания ГОЛОРЫ, продолжающиеся в течение. 5 мин. На 15-й минуте после инъекции-эпилептогена у крысы отмечаются выпаженные поисковые движения морды; животное как-бы принюхивается к чему-то. Крыса совершает периодические пробежки по камере, перемежающиеся кратковременными остановками, которые сопровождаются поисковыми движениями морды; забивается в угол камеры, перебирает передними лапами, пищит. Животное не реагирует на предъявление световых (вспышка света), звуковых (хлопок по столу), болевых (защипывание хвоста) раздражителей. Указанным поведенческим изменениям в ЭЭГ соответствует появление спайк- волновых комплексов частотой 5 кол/с, наиболее выраженных в гиппокампе. Продолжительность пароксизмов психомоторных реакций составляет 10-40 с, частота их возникновения 0,5-0,7 в мин. Общая продолжительность указанных поведенческих и ЭЭГ изменений составляет 40 мкн от момента возникновения о Наблюдение в течение 90 мин после окончания психомоторных нарушений . не выявляет у животного судорожных реакций.

Таким образом, у животного воспро- ил едена модель эпилепсии, в виде психомоторного пароксизма, i Применение способа позволяет повысить воспроизводимость модели психомоторных пароксизмов на 53% по сравнению с известным способом.

Формула изобретения

Способ моделирования психомоторных пароксизмов путем введения животному химических веществ, о т л и ч а ю- щ и и с я тем, что, с целью повышения воспроизводимости, животному в течение 17-25 дней ежедневно внут- рибрюшинно вводят гтикротоксин в дозе 1,0-1,3 мг/кг, затем билатерально в зону вентральной тегментальной области вводят 20-30 нг мусцимола и через 5-10 мин после этого внутри- брюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0-1,3 мг/кг.