Способ определения фазы инфильтрации при туберкулезе легких Советский патент 1992 года по МПК G01N33/48 

v

4V

Ё

Использование: в медицине, а именно в фтизиатрии и клинической цитологии. Сущность изобретения: подсчитывают количество флуоресцирующих альвеолярных макрофагов в мазках из бронхоальвеолярного смыва, предварительно обработанного 2,5%-ным спиртовым раствором калиевой соли зоэина, и при содержании их ниже 44,7% относительно общего числа определяют фазу инфильтрации. Предлагаемый способ прост, в техническом исполнении, достаточно информативен (100%) и позволяет объективно уточнять диагностику фазы инфильтрации при туберкулезе легких, без чего затруднен выбор оптимальной тактики консервативного или хирургического лечения, в также диспансерного наблюдения. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии и клинической цитологии.

Целью изобретения является повышение точности определения фазы инфильтрации при различных формах туберкулеза легких и упрощение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Бронхоальвеолярный смыв собирают в мерную коническую центрифужную пробирку и центрифугируют при 1500 об/мин в течение ТО мин. Надосадочную жидкость удаляют пипеткой, оставляя 1 мл. Боковым качанием пробирки осадок рееуспензирует- ся в оставшейся надосадочной жидкости. В пробирку добавляют 1 мл смеси трех частей сыворотки крови с одной частью 2,5%-ного спиртового раствора калиевой соли эозина. Окрашенную смесь центрифугируют при 1000 об/мин в течение 10 мин. Надосадочную жидкость удаляют. Каплю осадка наносят на обезжиренное предметное стекло. Мазок высушивают при комнатной температуре.

Микроскопирование проводят на люминесцентном микроскопе типа Люмаш, МЛ или с люминесцентной приставкой к обычным микроскопам при использовании входного светофильтра СС-4, запирающего ЖС-18 и объектива масляной иммерсии. При микроскопироаании на желтовато-сером фоне хорошо просматриваются два типа альвеолярных макрофагов. Одни флуоресцируют желто-зеленым или светло-желтым светом, другие не флуоресцируют, так как они окрасились эозином в видимой области спектра и выглядят красными в проходящем свете. Макрофаги легко и четко дифференцируются по окраске. Подсчитывается не менее 100 альвеолярных макрофагов и, если среди них выявляется менее 48% флуорес2

Ч 00 CJ

цирующих, это свидетельствует о фазе инфильтрации при различных формах легочного туберкулеза.

П р и м е р 1. Больной К, 24 лет. Клини- ко-рентгенологический диагноз: инфильт- ративный туберкулез IH сегмента правого легкого в фазе распада, БК-. При поднаркозной бронхоскопии произведен бронхо- альвеолярный смыв из Н сегмента правого легкого. После обработки клеток смыва и приготовления мазков по вышеуказанной методике при люминесцентном микроеко- пироваЯми подсчитано 152 альвеолярных макрофага. Флуоресцирующие макрофаги составили 58%. Цитохимическое заключение: Признаков инфильтрации нет, процесс в стадии формирования туберкуломы. Больному через 5 дней произведена резекция Hi сегмента справа. Гистологическое заключение: Туберкулома с полостью распада без признаков перифокального воспаления.

П р и м е р 2. Больной С. 41 год. Клини- ко-рентгежэлогический диагноз: инфильт- ративный туберкулез 1-Й сегментов справа в фазе распада и обсеменения, Б.К+. При поднаркозной бронхоскопии взят бронхо- альвеолярный смыв из Н сегмента справа. После обработки клеток смыва и приготовления мазков при люминисцентной микроскопии подсчитано 120 альвеолярных макрофагов. Флуоресцирующие макрофаги составили 23%. Цитохимическое заключение: Туберкулез легких в фазе инфильтрации. Через одну неделю больному выполнена резекция 1-Й сегментов справа. Гистологическое заключение: Инфильтра- тивный туберкулез с распадом без признаков отграничения.

Для апробации способа проведены кли- нико-рентгено-лаборатор ше исследования у больных туберкулезом легких 1 условиях стационаре. Обследовано 54 больных, из них 16 с туберкуломами, 5 - фиброз«о-ка- вернозным туберкулезом, 11 - силикотубер- кулезом и 22 с инфидьтративным туберкулезом легких. 26 больных в последующем были прооперированы и оценка активности туберкулезного процесса (определение фазы процесса) проводилась у них с использованием также патологоана- томических данных. Срок от проведения клинико-реитгено-лабораторных исследований до оперативного вмешательства не превышал 2-3 недель.

Фаза инфильтрации клинически диагностирована у 26 человек с инфильтратив- ной, фиброзно-кавернозной формами туберкулезе легких и силикотуберкулезом. Больные предъявляли жалобы на кашель с мокротой, слабость, потливость. В гемограмме отмечался лейкоцитоз, сдвиг лейкоцитарной формулы влево, увеличение СОЭ. Изменения в белковом спектре характеризовались уменьшением альбумино-глобулинового коэффициента, увеличением cci - и гамма-глобулинов . Рентгенологически у всех больных в легких определялись ин- фильтративные изменения, у большинства с деструкцией и малоинтенсивными очагами

обсеменения в окружающей ткани. Выделение микобактерий с мокротой установлено у 87% больных. Для больных силикотуберкулезом рентгенологически было характерно медленное прогрессирование процесса в

виде увеличения икфильтративных фокусов на протяжении ряда предшествующих лет. Фаза рассасывания и уплотнения определялась у 28 больных с инфильтративным туберкулезом, туберкуломой и силикотуберкулезом. Для этой группы было характерно отсутствие жалоб или жалобы на небольшой кашель без мокроты. Сдвигов в гемо- и про- теинограммах не было. Бактериологическое исследование дало отрицательный резу л ьтат. Рентгенологически группа характеризовалась отсутствием инфильтративных изменений в ткани легких. У больных силикотуберкулезом рентгенологическая картина была стабильной на протяжении

последних 3-5 лет.

При патологоанатомическом исследовании оперированных частей легких с различными формами туберкулеза гистологически фаза инфильтрации характеризовалась наличием перифокального экссудэтивного воспаления. В зоне туберкулезного фокуса в альвеолах, в межуточной или грануляционной ткани отмечалось накопление полиморфноя- дерных лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов

и макрофагов, отек стромы, отложение фибрина или гомогенных мелкозернистых эози- нофильных масс. Альтернативное повреждение кровеносных сосудов в участках экссудации способствует появлению

очагов казеозногр некроза при существующей ткани и инфильтрирующих клеточных элемента.

Фаза рассасывания и отграничения воспаления характеризовалась ослаблением

экссудативной реакции прежде всего за счет исчезновения полиморфноядерных лейкоцитов, уменьшения отекай рассасывания фибринозных отложений. Увеличилось количество гистиоцитов и эпителиоидных

клеток. Наблюдались гигантские много- ядерные клетки Пирогова-Ланганса. Местами элителиоидные клетки формировали гранулематозные образования, где отмечалось разрастание коллагеновых волокон.

Тканевая перифокальная реакция приобретала продуктивный характер с увеличением массы фибринозной ткани, которая, цирку- лярно охватывая фокус, отграничивала его от окружающей неизмененной легочной ткани.

Патоморфологические и гистологические исследования подтвердили, что в фазе инфильтрации с выраженной экссудатив- ной реакцией в бронхеальвеолярном смыве уменьшается количество флуоресцирующих макрофагов до 20-40%. В фазе рассасывания с нарастанием фиброза и формированием капсулы вокруг очага количество флуоресцирующих макрофагов возрастает до 60-80%. Таким образом, морфологически установлено, что отграничение инфиль- тративного процесса в легких соответствует нарастанию количества флуоресцирующих макрофагов в окружающей респираторной ткани легкого.

Проведенные исследования у указанных больных показали, что фаза инфильтрации при туберкулезе легких цитологически

0

5

0

5

характеризуется снижением количества флуоресцирующих макрофагов в бронхо- альвеолярном смыве из пораженного сегмента. Данные исследования приведены в таблице.

При использовании предлагаемого метода правильный диагноз был установлен во всех случаях.

Формула изобретения Способ определения фазы инфильтрации при туберкулезе легких путем микроскопического исследования макрофагов в бронхоальвеолярном смыве, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, проводят обработку бронхоальвеоляркого смыва в равных соотношениях со смесью 2,5%-ного спиртового раствора калиевой соли эозина и сыворотки крови взятых в соотношении 1:3, подсчитывают флуоресцирующие макрофаги и при их количестве менее 44,7% относительно общего количества макрофагов определяют фазу инфильтрации.