Штамм парамиксовируса кур, используемый для приготовления диагностических препаратов Советский патент 1992 года по МПК C12N7/00 A61K39/145 

Изобретение относится к вирусологии и может быть использовано для получения ди- агностикума парамиксовирусов.

Известны данные об изоляции парамиксовирусов от различных видов домашних и диких птиц.

В результате экологического изучения диких птиц было выявлено, что штамм вирусов Юкейпа( парамиксовирус2-го серотипа) является антигенно вариабельным,

Однако отсутствуют сведения об изоляции от домашних птиц дрейф-вариантов вируса Юкейпа, отличающихся от прототипных штаммов по антигенным характеристикам структурных белков.

Цель изобретения - получение штамма вируса Юкейпа Курица/Алма-Ата/71/87, обладающего специфической иммуногенно- стью, позволяющей использовать его для приготовления диагностических препаратов при идентификации вновь выделенных парамиксовирусов птиц.

Предлагаемый штамм Курица/Алма- Ата/71/87 представляет собой вирус, родственный в антигенном отношении штамму Курица/СССР/1 /86. Новый штамм выделен от кур в сентябре 1987 г. при вирусологическом обследовании домашних птиц Алма-Атинской области Казахской ССР и хранится в коллекции Института вирусологии им, Д.И.Ивановского АМН СССР (депозит ГКВ № 2230).

Антигенную структуру штамма изучали в РТГА с использованием набора референс- сывороток к парамиксовирусам 1-9 сероти- пов, а также к вирусам гриппа с гемагглюти- нинами подтипов Н1-Н13 и нейраминида- зой № 1-9. Результаты, представленные в таблице показывают, что штамм Курица/Алма- Ата/71/87 проявил частичное, но не полное антигенное родство с эталонным вирусом Курица/СССР/1/86.

Активность репродукции. Выделенный от кур вирус Курица/Алма-Ата/71 /87 репродуцируется в системе куриного эмбриона

о ел

при оптимальной (37°С) и повышенной (41° С) температурах до инфекционного титра 6-8 Ig ЭИДбо/0,2 мл. Штамм обладает высокой гемагглютинирующей (титр гемагг- лютинации 1/256-1/512) и иммуногенной активностью.

Гемагглютинирующая активность. Вирус обладает широким спектром агглютинации эритроцитов. Он одинаково хорошо агглютинирует эритроциты кур, уток, морской свинки, крысы и мыши, но не взаимодействует с эритроцитами барана, свиньи. лошади и крупного рогатого скота.

Терморезистентность Л 5б-признак).у. Вирус, выделенный от кур, и прототипный штамм Курица/СССР/1/86 обладают тем- пературочувствительным гликопротеидом НМ(Т5б-5мин).

Ингибиторочувствительность. Исследуемый штамм проявляет чувствительность к термолабильным ингибиторам сывороток кролика и мыши и термостабильным ингибиторам сыворотки морской свинки, но был резистентен по отношению к сывороточным ингибиторам барана, свиньи, уток, кур, крысы.

Адсорбционно-элюирующая активность. Представленный штамм, также, как и эталон Курица/СССР/1/86, обладает слабой адсорбирующей активностью по отношению к фор- малинизированным эритроцитам кур.

Патогенные свойства. Штамм Кури- ца/Алма-Ата/71/87 не проявляет латоген- ности для однодневных цыплят при интра- назальном, внутрибрюшинном и интраце- ребральном заражении.

Штамм, выделенный от кур, предназначен для производства парамиксовируснопэ антигена, который может быть использован при серологической диагностике. С этой целью штамм размножают путем заражения 9-10-дневных куриных эмбрионов в ал- лантоисную полость

Диагностическую иммунную сыворотку получают на кроликах породы шиншилла

или на белых крысах. В качестве антигена для иммунизации используют вирус, сконцентрированный центрифугированием при 24 об/мин в течение 2 ч. Титры гемагглюти- нации составляют 1/10000-1/20000.

Схема иммунизации. Первую иммунизацию проводят подкожно в область шейных и подколенных лимфатических узлов путем 15-20 точечных инъекций концентрированного антигена (100 мкг) в смеси с полным

адьювантом Фрейнда. Через Знед проводили повторную иммунизацию животных подкожно (с адьювантом) и внутривенно (без адьюванта) равным количеством антигена. Кровь у животных берут из краевой вены уха

через 7 дней после второй иммунизации Иммунную сыворотку освобождают от неспецифических ингибиторов обработкой отечественным препаратом нейтраминида- зы из нехолерного вибриона. Титр иммунной сыворотки заявляемого штамма в РТГА с гомологичным антигеном составлял 1/20 480-1/40960. с гетерологичными антигенами парамиксовирусов 1-4, 6-9 серотипов - реакции отрицательны,

Таким образом, предлагаемый штамм парамиксовируса Курица/Алма-Ата/71 /87, выделенный от кур, и приготовленные на его основе диагностические препараты могут быть применены в вирусологической

практике для идентификации вновь изолированных штаммов парамиксовирусов и обнаружения антител в сыворотках различного происхождения.

Формула изобретения

Штамм парамиксовируса кур ГВК №2230, используемый для приготовления диагностических препаратов.

Использование: вирусология, для получения диагностикума парамиксовирусов. Сущность изобретения: предложен штамм парамиксовируса птиц, который представляет собой дрейф-вариант вируса Юкейпа. Предложенный штамм может быть использован в качестве модели при изучении дрейфовых процессов у вирусов группы Юкейпа, а также как диагностический препарат при диагностике инфекций, вызванных вирусом этого серотипа. 1 табл.