Способ дифференциальной диагностики острого и хронического активного гепатитов В Советский патент 1992 года по МПК G01N33/534 

Изобретение относится к медицине, в частности к гепатологии, и может быть использовано в инфекционных, гастроэнтерологических и гепатологических отделениях клинических больниц.

Известен способ дифференциальной диагностики острого вирусного гепатита (ОВП и хоонического активного гепатита (ХАГ) по клиническим данным.По этому способу для ХАГ характерна большая длительность заболевания, отсутствие преджелтушного периода, плотная консистенция печени и внепеченочные знаки.

Недостаток этого способа заключается в том, что клинические проявления ХАГ могут впервые развиваться при уже сформировавшемся патологическим процессе без предшествующего анамнеза, а преджел- тушный период при ОВГ достаточно вариабелен по срокам (от одного дня до нескольких недель) и не имеет характерной клинической картины. Кроме того, консистенция печени, определяемая пальпзторно. - субъективное понятие, она может быть достаточно плотной и при ОВГ. Самые распространенные внепеченочные знаки - сосудистые звездочки встречаются при ХАГ в 75% случаев. Таким образом, этот способ не является достаточно надежным. Известен способ дифференциальной диагностики ОВГ и ХАГ, основанный на определении уровней сывороточных транс- аминаз - аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферэзы (ACT). При увеличении содержания АЛТ и ACT в 10 и более раз относительно нормы диагностируют ОВГ, при их уменьшении - ХАГ. Недостатком этого способа является его низкая наЧ|

Ч

ю VJ л

Юо

дежность, т.к. повышение уровня ACT в 5 раз отмечается у 94,4% больных ОВГ и у 93% больных ХАГ, а АЛТ - у 97% больных ОВГ и 87,5% больных ХАГ.

Кроме того, известный способ не пригоден для дифференциальной диагностики в ранние сроки, т.к. активность трансминаз достигает максимума на 2-3 неделе заболевания.

Известен также способ дифференциальной диагностики ОВГ и ХАГ, который основан на определении в сыворотке крови уровня гамма - глубулинов турбодиметриче- ским методом. При увеличении их содержания выше нормы диагностируют ХАГ, а при их содержании, соответствующем норме - ОВГ.

Недостатком данного способа является его небольшая точность, что особенно проявляется во второй половине заболевания ОВГ, когда уровень гамма - глобулинов также может повышаться. Это объясняется тем, что подъем уровня гамма - глобулинов отражает активацию гуморального иммунитета, а не форму заболевания. Гуморальный иммунитет может активизироваться как при ОВГ, так и при ХАГ, т.к. в основе сравниваемых заболеваний лежит процесс воспаления (острый или хронический).

Целью изобретения является повышение точности дифференциальной диагностики.

Поставленная цель достигается тем, что в плазме крови радиоиммунологичёским методом определяют уровень лейкотриена (ЛТ) В4. При повышении его содержания относительно нормы диагностируют ОВГ, а при снижении относительно нормы - ХАГ.

Использование в заявляемом способе в качестве биохимического критерия ЛТ В4 позволяет повысить точность дифференциальной диагностики по сравнению с прототипом, т.к. выбранный критерий обладает высокой специфичностью. Это объясняется тем, что ЛТ В4 является медиатором воспаления, т.е. того процесса, который лежит в основе ОВГ и ХАГ. Он индуцирует адгезионные свойства полиморфно-ядерных лейкоцитов, усиливает их способность к агрегации, подвижность, способствует высвобождению лизоцина из лейкоцитов, обеспечивая таким образом адекватное развитие воспалительного процесса, направленного на выздоровление.

Именно поэтому при ОВГ возрастает потребность в ЛТ 84, и организм увеличивает его синтез, что сопровождается повышением его содержания в плазме крови.

Переход процесса в хроническую стадию сопровождается рассогласованием механизмов адекватного ответа, снижением порога чувствительности, нарушениями в процессе синтеза биологически активных веществ. Кроме того, при ХАГ происходит

нарушение в системе мононуклеарных фагоцитов, клетки которой в печени являются основными продуцентами ЛТ ВЧ, вследствие чего наблюдается снижение синтеза ЛТ В4 при хроническом воспалительном про0 цессе а ткани печени, и соответственно при ХАГ выявлено снижение уровня ЛТ В4 в плазме крови.

Способ осуществляют следующим образом.

5 1. Забирают у больного утром натощак 3,0 мл венозной крови в пластиковую пробирку, содержащую 0,2 мл 2% раствора ЭД- ТА. с помощью пластикового шприца. Центрифугируют кровь при 4000 об/мин в

0 течение 15 мин для деления плазмы, которую затем отбирают из верхнего слоя.

Определяют концентрацию ЛТ В4 в плазме крови радиоиммунологическим методом с помощью наборов фирмы

5 Amerstiam. Наборы позволяют с высокой точностью определить содержание ЛТ В4 по конкурентному связыванию (ЗН) Л Т и эндогенного ЛТ В4 в плазме крови с антителами к ЛТ В4. Разделение связанного с ан0 тителами и свободного ЛТ В4 достигается осаждением свободного ЛТ В4 суспензией древесного угля (декстрана). После центрифугирования измеряют активность суперна- танта.

5 Для определения содержания ЛТ 84 в диапазоне от 1,6 до 200 г/мл строится стандартная кривая из 6 точек. Для этого в 6 пробирок вместо проб добавляют стандартный раствор. При построении стандартной

0 кривой для каждой известной концентрации немеченных ЛТ В4 в пробе по величине радиоактивной метке в супернатанте рассчитывают процент связывания антисывороткой меченного (ЗН) ЛТ В4. На оси ординат откла5 дывают величину процента связывания меченого, а на оси абсцисс в логарифмическом масштабе - количество немеченного исследуемого вещества, соответствующего определенному проценту связывания.

0 При определении содержания ЛТ В4 используют антисыворотку, стандарты, буфер, входящие в набор реактивов для радиомму- нологического определения ЛТ 84.

Диагностируют ОВГ при увеличении

5 уровня ЛТ В4 в плазме крови относительно нормы, а при его снижении относительно нормы - ХАГ. Для установления нормы (N) содержания ЛТ В4 в плазме крови была исследована группа здоровых лиц (доноров) в количестве 20 человек

В таблице показаны результаты определения уровня ЛТ 84 а плазме крови у различных групп наблюдений.

Из таблицы видно, что при ОВГуровень ЛТ 84 повышается (в среднем в 3 раза), а при ХАГ уровень ЛТ 84 снижается в (среднем в 2 раза),

Изменения уровней ЛТ 84 при-ОВГ и ХАГ носят диаметрально противоположный характер различия сравниваемых показателей ().

П р и м е р 1, Больной И,, 27 лет, история болезни NS 368 поступил во 2-е отделение 2-й инфекционной больницы г. Харькова 27,09.89. с жалобами на тошноту после приема пищи, слабость, чувство тяжести в правом подреберье, желтушность склер, потемнение мочи.

Анамнез заболевания; считает себя больным в течение 2 месяцев, когда появилась слабость. За неделю до обращения к врачу появилось чувство тяжести в правом подреберье, тошнота, окружающие обратили внимание на желтушность склер. Больной был направлен районной поликлиникой в инфекционною больницу с подозрением на острый вирусный гепатит.

Анамнез жизни: с 1984 по 1986 годы являлся донором, в июле 1989 г. прооперирован по поводу язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Объективные данные: состояние удовлетворительное. Склеры и видимые слизистые иктеричны. Субикте- ричность кожных покровов. В легких визи- кулярное дыхание. АД 110/70 мм рт.ст. Тоны сердца громкие, ритмичные, ЧСС 60 в минуту. Язык чистый, влажный. Живот мягкий, участвует в акте дыхания, умеренно бо- лезненный при пальпации в правом подреберье. Печень на 2-3 см ниже края реберной дуги, край ее ровный, плотно-эластичный, поверхность гладкая. Селезенка не увеличена.

Лабораторные данные: анализ крови: эритроциты 4,4 1012 г/л, Нв 137 г/л ц.п.о, 9, тромбоциты 141-109 г/л, лейкоциты 4,0-10 г/л, эозин 2, пал. 2, сегменты 64, лимфоциты 23, моноциты 9, СОЭ 12 мм/ч. В анализе мочи обнаружены желчные пигменты. В сыворотке крови методом РОПГА обнаружен HBs Ag, ACT 3,4 ммоль ч/л, АЛТ 3,7 ммоль/л, гамма - ГТП 180 Е/л. ЩФ 5,1 Е/л, билирубин общий 41,5 мкмоль/л, билирубин прямой 18,4 мкмоль/л, билирубин непрямой 23.1 мкмоль/л. Протромбиновый индекс 65%. Общий белок 62,0 г/л, альбумины 56,5%, глобулины; 3,9%, аг 3,9%; /9-10,5%: у - 25,5%. А/Г 1,32.

Инструментальные данные: Эхосомо- скопия: печень умеренно увеличена в размерах, ткань ее однородной структуры, повышенной зхогенной плотности, Отмечаатся незначительное расширение желчных ходов. Селезенка не увеличена.

Сканирование печени: печень умеренно увеличена в размерах, распределение РФП диффузно- неравномерное, определяется

0 активация селезенки.

Проведенное исследование вызвало определенные сомнения в диагнозе острого вирусного гепатита В, в связи с чем у больного был дополнительно определен уровень

5 лейкотриена В4 в плазме крови, который составил 17,4 пг/мл. Кроме того, была произведена пункционная биопсия печени. Морфологическая картина биоптата ткани печени соответствовала характеру биоптата

0 при хроническом активном гепатите.

Для дальнейшего лечения больной был переведен в гастроэнтерологическое отделение Харьковского НИИ терапии.

П р и м е р 2. Больной А.. 35 лет, история

5 болезни № 579, поступил во 2-е отделение 22-й инфекционной больницы г. Харькова 30.10.89. с жалобами на боли в правом подреберье, тошноту, желтушность кожных покровов, темную мочу.

0 Анамнез заболевания: считает себя больным около двух недель, когда появилась легкая тошнота, субиктеричность склер. К врачу не обращался. В день госпитализации состояние значительно ухудши5 лось; желтушность кожных покровов усилилась, моча темная, боли в правом подреберье. При обращении в поликлинику он был направлен в 22-ю инфекционную больницу г. Харькова с диагнозом: острый вирус0 ный гепатит.

Анамнез жизни: из перенесенных заболеваний отмечает пневмонию в 1987 г., и в мае 1989 г., по поводу которых проходил стационарное лечение.

5Объективные данные: состояние удовлетворительное. Кожные покровы и видимые слизистые желтушной окраски. Внепеченочных знаков нет. Со стороны органов дыхания и сердечно-сосудистой сис0 темы патологии не выявлено. Живот мягкий, болезненный при пальпации в правом подреберье. Нижний край печени на 3-4 см ниже края реберной дуги, плотно-эластичный, ровный, болезненный при пальпации.

5 Пальпируется нижний полюс селезенки.

Лабораторные данные: анализ крови; эритроциты 4,5 1012 г/л, Нв 141 г/л: ц.пп. 0,9, тромбоциты 225 109 г/л, лейкоциты 6,8 109 г/л эозин 1, палочки 1, сегменты 44, лимфоциты 48, моноциты 6, СОЭ 18

мм/ч; в моче обнаружены желчные пигменты. В сыворотке крови методом РОПГА выявлен HBsAg, ACT 4,1 ммоль/ч.л., АЛТ 4,5 ммоль/ч.л., гамма - ГТП 210Е/Л, ЩФ 4,7 Е/л. Билирубин общий 56,8 мкмоль/л, прямой - 23,5 мкмоль/л, непрямой - 33,3 мкмоль/л. Протромбиновый индекс 72%. Общий белок - 72 г/л, альбумины 53,6%, глобулины: «1-3,2%, «2-4,2%, /3-7,4%, Х-31,6%, А/Г 1-17,

Инструментальные данные: Эхосоно- скопия: печень умеренно увеличена в размерах, ткань печени однородной структуры, со стороны желчевыводяПцих путей патологии не выявлено. Селезенка умеренно увеличена. Сканирование печени: печень умеренно увеличена в размерах, накопление РФП диффузно - неравномерное, отмечается активация ретикуло-эндотелиальной системы, повышенное накопление РФП в селезенке.

В результате проведенного исследования возникла необходимость проведения дифференциального диагноза между острым и хроническим активным гепатитами В. Поэтому у больного в плазме крови определили уровень ЛТ В4, который составил 119,4

пг/мл. Кроме того, была проведена пункци- онная биопсия печени. Морфологические изменения в ткани печени соответствовали изменениям, характерным для острого вирусного гепатита. Установленный диагноз: острый вирусный гепатит. Больной продолжил курс лечения в инфекционном стационаре.

Использование предложенного способа диагностики по сравнению с прототипом позволяет повысить точность на 31 % и специфичность способа, дает возможность назначить своевременную адекватную терапию, предотвратить реинфекцию у

больных ХАГ и расширить область применения способа.

Формула изобретения Способ дифференциальной диагностики острого и хронического активного гепатита В путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, в плазме крови радиоиммунологи- чески определяют уровень лейкотриека В4 и при повышении его уровня относительно

нормы в 3 раза диагностируют острый вирусный гепатит В, а при его снижении в 2 раза - хронический активный гепатит В.

Использование: в инфекционных, гастроэнтерологических и гепатологических отделениях клинических больниц для дифференциальной диагностики. Цель: повышение точности. Сущность изобретения: в плазме крови пациента радиоиммунологи- ческим методом определяют уровень лей- котриена В4. При повышении его содержания относительно нормы в 3 раза диагностируют острый вирусный гепатит В, а при снижении относительно нормы в 2 раза - хронический активный гепатит В. Положительный эффект: повышается точность диагностики на 31%, что позволяет назначить своевременную адекватную терапию, предотвратить рейнфекцию у больных и расширить область применения способа. 1 табл. сл с