Способ укоренения побегов орехоплодных, полученных IN VIтRо Советский патент 1993 года по МПК A01H4/00 

со

с

Использование: в сельском хозяйстве и биотехнологии, в частности, при получении посадочного материала орехоплодных в культуре ткани. Сущность изобретения: укоренение побегов проводят на питательной среде Мурасиге-Скуга, содержащей в своем составе макроэлементы с четырехкратным разбавлением, 60 г/л сахарозы. Культивирование осуществляют в темноте в течение 5-7 сут, после чего пересаживают на питательную среду Мурасиге-скуга, содержащую макроэлементы в четырёхкратном разбавлении, 30 г/л сахарозы и дополни- тельно 7 г/л агара. Выращивание на этой среде проводят при шёстнадцатйчасовом фотопериоде. 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии,, а именно к способу культивирования растений in vitro, и может быть использовано в лесоводстве, питомниководстве.

... Известно, что для коренения побегов Ьрехоплодных, полученных в культуре ткани, применяют питательные среды, содержащие ауксины, или проводят обработку базального конца побегов гормонами перед их посадкой непосредственно в субстрат.

Предлагается также двухэтапное укоренение побегов, при котором на первом этапе индуцируют корнеобрззование в темноте, в присутствии ауксинов(ИМК). Появление корней наблюдают на этой же среде, но при добавлении активированного угля или при уменьшении ауксинов.

Наиболее близким к предлагаемому решению является способ укоренения побегов лещины, полученных in vitro, при котором побеги помещали основанием в

жидкую культуральную среду K(h), состоящую из половинной концентрации минеральных солей Ченга с ИМК (10 мг/л). и выдерживали при температуре 25±2°С с фо- топерирдом 18 часов. Через 5 суток побеги переносили на свежую жидкую среду того же состава, но без ИМК.

Недостатком прототипа является то, что этот способ используют для монокультуры.

Целью изобретения является расширение, числа укореняемых видов орехоплодных, размножаемых микроклональным способом, для лесоводства и питомниковод- ства. . ;... ....

Это достигается тем, что укоренение ореха грецкого проводят в два этапа: сначала на жидкой питательной среде с ауксинами (10 мг/л), при температуре 25±3°С, а затем на безгормональной среде того же состава.

VJ о

го ю VI о

CJ

В отличие от прототипа в предлагаемом способе укоренение ореха грецкого побеги выдерживают от 5 до 7 суток в темноте на жидкой питательной среде Мурасиге-Скуга, микроэлементы которой разбавляют в 4 раза, количество сахарозы увеличивают до 60 г/л, а затем переносят на эту же среду, но уже с 7 г/л агара. Количество сахарозы уменьшают-до 30 г/л. Побеги культивируют при 16- чафовбм фотопериоде.

Приме р. Побеги, полученные при микроклональном размножении ореха грецкого и достигшего высоты 18-20 мм, помещают базальными концами на мостики из фильтровальной бумаги в сахарные ста- канчики с жидкой питательной средой Мурасиге-Скуга состава, приведенного в табл. 1, и культивируют в темтоне при 25±3°С. Через 1, 3, 5, 7 или 10 суток побеги переносят на питательную среду того же состава, но без ИМК, количество сахарозы уменьшают до 30 г/л, добавляют 7 г/л агара и выставляют на 16-часовый фотопериод. Побеги выдерживают на этой среде до появления корней..

Контролем служат побеги ореха грецкого, которые выращивают 5 или 7 суток в темноте на жидкой питательной среде Мурасиге-Скуга с полным набором макроэлементов, 60 г/л сахарозы и 10 мг/л ИМК. Через 5 или 7 суток побеги переносят на 16-часовый фотопериод на питательную среду того же состава, но без ИМК, с количеством сахарозы - 30 г/л и 7 г/л агара (табл.1).

Как видно из табл. 2, при 5-суточном выдерживании побегов на жидкой среде с

. Состав питательных сред, используемых при укоренении побегов ореха грецкого

in vitro . -

ИМК у 9,0% побегов корни появились через неделю выращивания на безгормональной среде. В дальнейшем число укорененных побегов увеличивается и через 4 недели достигает 72,0%. При 7-суточной экспозиции с ИМК к концу восьмой недели получают 6,0% укорененных побегов. В контрольных вариантах корни не появились.

Таким образом, осуществлено укоренение побегов ореха грецкого, полученных в культуре In vitro.

Заявляемое техническое решение позволяет расширить объект растений, укореняемых In vitro.

Формула изобретения Способ укоренения побегов орехоплодных, полученных in vitro, включающий культивирование побегов при температуре 25±2°С на жидкой питательной среде, содержащей в своем составе макроэлементы, индолилмасляную кислоту в количестве 10 мг/л и сахарозу, последующую пересадку на безгормональную питательную среду и выращивание до корнеобразования и получения растений-регенерантов, отличающийся тем, что культивируют побеги в течение 5-7 сут, в темноте на питательной среде Мурасиге-Скуга, с четырехкратным разбавлением макроэлементов, содержащей 60 г/л сахарозы, последующую пересадку на питательную среду Мурасиге-Скуга с четырехкратным разбавлением макроэлементов, содержащую 30 г/л сахарозы и дополнительно 7 г/л агара, а выращивание на этой среде проводят при шестнадцатичасовом фотопериоде.

Таблица 1

Количество укорененных побегов ореха грецкого на питательной среде Мурасиге-Скуга при разведении 1:4 макроэлементов и с добавлением ИМК

(Юмг/л)

Продолжение табл.1

Таблица 2