Способ выявления альтернариозной инфекции у семян пшеницы Советский патент 1993 года по МПК A01C1/08 

Изобретение относится к сельскому хсг- . зяйству, в частности к способам фитопатологической экспертизы предусматривающей выявление скрытой альтернариозной инфекции в зародышевой зоне семян пшеницы, что может быть использовано в получении здоровых проростков для использования их в селекционном и семеноводческом процессах выведения высокоурожайных сортов яровой пшеницы и повышения урожайности имеющихся сортов.

Известен способ анализа семян зерновых культур на фузариоз и гельминтоспори- оз, принятый за прототип, предусматривающий дезинфекцию и раскладку их на питательные агаровые среды с последующим микроскопированием. Семена дезинфицируют сулемой (1:1000), формалином (1:300). марганцовокислым калием (0,5%), хлорноватистым натрием (0,5%), 1% раствором борной воды, 96% или 50% раствором спирта (семена погружают на 3 мин. вынимают, просушивают на фильтрах и раскладывают на питательные среды). Рекомендуемые питательные среды следующие:

мальцпептонный агар, клевероглюкозный агар, овсяной агар, свекловичный агар, сусловый агар. Используют также картофельный агар. Очищают нарезают кубиками 200 г картофеля, 1 л воды, кипятят 40 мин. Жидкость с фильтровывают, добавляют 20 г агара, 1-2 капли 50%-ного раствора лимонной кислоты на 10 мл среды, кипятят до растворения агара, разливают в пробирки. При приготовлении картофельно-глю- козного агара все производят как в первом случае только еще добавляют 20 г глюкозы. Недостатком отмеченного способа является то, что он рекомендуется только для выделения грибов из рода фузариум и гель- минтоспориум. Испытание предлагаемых сред для определения грибов из. рода Alternaria приводило к тому, что питательные среды зачастую зарастали грибами из рода Мисог, что затрудняло выявление грибов из рода Alternaria, кроме того ни одна из отмеченных питательных средств и средства дезинфекции семенного материала не имели той высокой точности оценки выявления скрытой альтернариозной инфекции в зародышевой зоне пшеницы.

(Л

С

VI ч

4 СО

JSW Сл)

Цель изобретения - разработка способа оценки селекционного и семеноводческого материала на устойчивость к альтернзриоэ ной инфекции, а также дающего возмож ность выделения здоровых проростков пшеницы для использования их в биотехнологии селекционного и семеноводческого процессов.

Поставленная цель достигается тем, что семена пшеницы дезинфицируют в 96%- ном спирте, извлекают и переносят сквозь пламя спиртовки и раскладывают на подкисленный соляной кислотой картофельный агар.

Способ изучался на мягкой и твердой сортах пшеницы, имеющих различное экологическое происхождение и полученных с различных агротехнических фонов. В анализ шли раздельно чернозар одышевые ибе- лозародышевые семена. Полученные здоровые проростки и проростки с пораженной зародышевой зоной грибами рода Alternaria выращивались в вегетационных и полевых опытах на темно-каштановой почве в условиях сухой степи Северного Казахста- на.

Пример. Отбирают 20-30 семян испытываемого сорта и переносят в чашки Петри с 96% спиртом, сразу же извлекают пинцетом каждое зерно и проносят его сквозь пламя спиртовки для полного сгорания спирта, прогрева и обеззараживания поверхности семян. Раскладывают эти семена на подкисленный соляной кислой картофельный агар в чашки Петри. При высеве белозародышевых альтернариозных семян, через сутки сквозь лопнувший перикарпий вместе с ростом главного корешка наружу пробивается пучок мицелия грибов рода Alternaria. Формирование колоний и споро- ношение гриба происходит на третьи сутки.

Картофельный агар готовят следующим образом: 200 г очищенного, нарезанного кубиками картофеля заливают 1 л водопроводной воды, доводят до кипения, настаивают 1 ч, отжимают через марлю. В

Фильтрат добавляют 30 г сахара (3%), 15 г ai ар-агара (1,5%) и доводят водой объем до прежнего уровня. Затем стерилизуют 30 мин при 120°С. Перед анализом семян картофельный агар разогревают и добавляют фиксаиал соляной кислоты в концентрации 0,1 r/зкв (на 1 л среды - 5 мл HCI).

Разработанный способ позволил выявить высокую зараженность семян твердой и мягкой пшеницы грибами рода Alternaria в условиях сухой степи Северного Казахстана (табл. 1).

Патогенную нагрузку грибов рода Alternaria в зоне зароша несут внешне здоровые белозародышевые семена пшеницы (табл. 2).

Опасность представляют чернозародыше- вые альтернариозные семена пшеницы, несущие высокую нагрузку грибов, что обуславливает заметно большую поражае- мость грибов структурных элементов колоса пшеницы. Патогенное действие грибов рода Alternaria негативно сказывается на полевой всхожести и урожайности пшеницы.

Период хранения семян пшеницы в течение трех лет способствует стопроцентному поражению зародышевой зоны грибами рода Aiternarla. Это отрицательно влияет на жизнеспособность семян пшеницы и снижает урожайность этой культуры до 3,5 ц/га (табл. 3).

Обработка белозародышевых альтернариозных семян химическими протравителями беномил, байтан слабо подавляет грибы рода Alternaria в зародышевой зоне пшеницы (табл. 4).

Использование предлагаемого способа анализа семян пшеницы на зараженность зародышевой зоны грибами рода Alternaria позволило выявить широкую распространенность и патогенность этого заболевания, резко снижающего полевую всхожесть, а также возможность отбора здоровых проростков для биотехнологических целей в селекции и семеноводстве.

Использование: в сельском хозяйстве при оценке селекционного материала на устойчивость к альтернариозной инфекции. Сущность изобретения: семена выдерживают в спирте для дезинфицирования. Помещают их на питательный субстрат из картофельного агара при рН 2-3 с добавлением 3 % сахара и выдерживают на нем в течение 3 суток. Альтернариозную инфекцию выявляют путем микроскальпирования. 4 табл.

Формула изобретения Способ выявления альтернариозной инфекции у семян пшеницы, включающий дезинфекцию семян в спирте, выдерживание на питательном субстрате и микроскопиро- .вание, отличающийся тем. что. с целью повышения точности способа, после дозинфекции семян в спирте их обрабатывают пламенем, а в качестве питательного субстрата используют картофельный агар при рН 2-3 с добавлением 3% сахара, при этом выдерживание семян на субстрате ведут в течении 3 суток.

Интенсивность заражения грибами рода Alternaria зародышевой зоны различных сортов

пшеницы

Таблица 2 Средний диаметр колоний гриба Alternaria на структурных.элементах колоса пшеницы, мм

Таблица 3 Увеличение количества альтернариозных семян в зависимости от срока хранения

Таблица 1

Урожайность, г/м2

Т а б л и ц а 4 Действие протравителей на рост грибов рода Atternarla