Способ подготовки биологической ткани к гистологическому исследованию Советский патент 1993 года по МПК G01N1/28 

Изобретение относится к биологии и медицине, в частности анатомии.

Цель изобретения - получение сохранных срезов с большой площади.

Способ осуществляют следующим образом,. ;

Сердца с предварительно налитым рен- тгеноконтрастной застывающей массой кровеносными сосудами фиксировано в 10% нейтральном формалине. После замо- раживани-я в холодильнике до минус 7°С отдельные куски расчлененного по зонам сердца примораживают водой с помощью двуокиси углерода к столику замораживающего микротома. Затем производят оттаивание верхнего слоя примороженного куска плоским металлическим равномерно подогреваемым теплоносителем с температурой до плюс 4°С и через пограничный слой толщиной не более 500 мкм между замороженной и оттаявшей частями производят разрезание при шаге микровинта микротома в 2000 мкм, 1000 мкм и 500 мкм. Процедура оттаивания и срезывания повторяется

до получения пакета срезов всей толщины органа или ткани.

Пример 1. Препарат сердца с предварительно налитыми застывающей рентге- ноконтрастной массой артериальными сосудами фиксируют в 10% нейтральном формалине 50 суток. После определения по произведенным макроангиограммам ко- лич.ества и топографии бассейнов кровоснабжения и крупных артериальных магистралей с их разветвлениями препарат сердца расчленяют на одиннадцать кусков и замораживают равномерно в холодильнике до минус 7°С. Эти куски водой примораживают двуокисью углерода к столику большого замораживающего микротома. После оттаивания верхних слоев плоским теплоносителем с температурой до 40°С производят разрезание через пограничный слой, толщина которого около 500 мкм. Повторяя циклы размораживание-разрезание при ходе микровинта в 500, 1000, 2000 мкм получают без сминания и крошения пакеты срезов равномерной толщины в 500. 1000 и

ел

00

о

ю ы

2000 мкм, необходимой для рентгеновской микроангиографии.

Пример 2. Препарат селезенки с предварительно налитыми застывающей рентгеноконтрастной массой артериальными сосудами фиксируют в 10% нейтральном формалине 50 суток, Затем, после определения по произведенным макроангиограм- мам количества и топографии бассейнов кровоснабжения и крупных артериальных магистралей с их разветвлениями замораживают равномерно в холодильнике до минус 7°С, Эти куски поочередно фиксируют водой к столику большого замораживающего микротома примораживанием двуокисью углерода. После оттаивания верхних слоев плоским теплоносителем с температурой до 40°С производят разрезание через пограничный слой (между замороженной и оттаявшей частями с температурой около 0°,,,2°С), толщина которого около 500 мкм. Повторяя циклы размораживание-разрезание при ходе микровинта микротома в 500, 1000 и 2000 мкм получают без сминания и крошения пакеты срезов равномерной толщины в 500, 1000 и 2000 мкм, необходимой

для рентгеновской микроангиографии. Длина срезов: 3,5...9 см, ширина срезов: 1,5...4 см.

Способ позволяет получить качественные, сохранные срезы больших поверхностей с биологической ткани.

Формула изобретения Способ подготовки биологической ткани к гистологическому исследованию путем ее замораживания и приготовления срезов

на криостате с последующей фиксацией и окрашиванием, отличающийся тем, что, с целью получения сохранных срезов с большой площади, замораживание проводят до температуры минус 7-11 °С, а перед

приготовлением срезов ткань на толщину среза подогревают до 0- плюс 2°С.

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии. Цель - получение сохранных срезов с большой поверхности ткани. Цель достигается тем, что замороженные срезы до минус 7-10° перед приготовлением срезов прогревают на толщину среза до 0 плюс 2°С. Срезы, полученные таким образом, не трескаются, не сминаются, что важно особенно при изготовлении толстых срезов предварительно инъецированной рентгеноконтрастными веществами ткани.