СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Советский патент 1996 года по МПК G01N33/483 

Изобретение относится к медицине, а именно к биологическим методам диагностики злокачественных заболеваний.

Цель изобретения повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Исследуемую сыворотку крови в объеме 1 мл разводят дистиллированной водой в соотношении 1:4, помещают кварцевую кювету с исследуемой средой в барабан спектрофлюориметра МРF-4 или F-3000 фирмы "Хитачи" (Япония). Задают длину волны возбуждения λ_в 314 нм, при определенной скорости записи спектра регистрируют амплитуду максимума флюоресценции в области длин волн 360 380 нм и после добавления 1%-ного раствора йода.

Если максимум флюоресценции возрастает, то диагностируют наличие злокачественного заболевания.

В случае полного или частичного гашения максимума флюоресценции наличие злокачественного заболевания отвергают.

Анализ спектров флюоресценции может проводиться в автоматическом режиме с использованием компьютерного спектрофлюориметра F-3000.

П р и м е р 1. Больной Успенский В.M. 1922 г.р. пенсионер, г. Новосибирск, диагноз при поступлении: хронический активный гепатит.

Сыворотку крови получают путем забора крови из вены с последующим центрифугированием. Через 1 2 ч после приготовления сыворотки крови в объеме 1 мл ее разводят в соотношении 1:4.

Разведение сыворотки заливают в кварцевую кювету спектрофлюориметра и помещают в барабан для проведения флюориметрического исследования на спектрофлюориметре F-3000, работающего в автоматическом режиме установки щели монохроматора. В микропрограмму задают значение длины волны возбуждения λ_в нм, скорость записи спектра 600 мм/мин. Машине дают команду на запись с выводом информации на экран дисплея. Запись спектра машиной проверяется в автоматическом режиме. Вручную, с помощью курсора, проводят сканирование спектрограммы по максимальным значениям амплитуд и соответствующим им длинам волн возбуждения и испускания. После чего по команде проводят запись спектрограммы на бумагу и ее расшифровку.

Добавляют в исследуемое разведение сыворотки 0,025 мл 1%-ного спиртового раствора йода и проводят запись спектра в строгом соответствии с вышеописанной методикой.

Анализируют спектры флюоресценции разведения сыворотки крови до и после добавления 1%-ного раствора йода, обращают внимание на относительную интенсивность максимума флюоресценции с λ_м 358,5 ± 2,2. Регистрируют ослабление максимума флюоресценции: до добавления йода λ_м 357,6 нм, А₁ 4,2 отн.ед. после добавления йода λ_м 358,2 нм, А₂ 0,9 отн.ед.

Рассчитывают относительный коэффициент после добавления йода к амплитуде флюоресценции до добавления йода; K 0,2, коэффициент значимости меньше 1.

П р и м е р 2. Больной Петренко В.М. 1951, НЗПП, цех 11, слесарь, г. Новосибирск.

Диагноз при поступлении: злокачественная анемия, цирроз печени.

Сыворотку крови получают путем забора крови из вены с последующим центрифугированием. Через 1 2 ч после приготовления сыворотки крови в объеме 1 мл ее разводят дистиллированной водой в соотношении 1:4. Разведение сыворотки заливают в кварцевую кювету спектрофлуориметра им помещают в барабан для флуоресцентного исследования на спектрофлуориметре F-3000, работающего в автоматическом режиме установки щели монохроматора. В микропрограмму компьютера задают значение длины волны возбуждения λ 314 нм, скорость записи спектра 600 мм/мин. Машине дают команду на запись спектра с выводом информации на экран дисплея. Запись спектра машиной проверяется в автоматическом режиме. Вручную, с помощью курсора, проводят сканирование спектрограммы по максимальным значениям амплитуд и соответствующим им длинам волн возбуждения и испускания. После чего по команде проводят запись спектрограммы на бумагу и ее расшифровку.

Добавляют в исследуемое разведение сыворотки 0,025 мл 1%-ного спиртового раствора йода и проводят запись спектра в строгом соответствии с вышеописанной методикой.

Анализируют спектр флюоресценции разведения сыворотки крови до и после добавления 1%-ного раствора йода, обращают внимание на относительную интенсивность максимума флюоресценции l 358,8 ± 2,2 нм. Регистрируют усиление максимума флюоресценции после добавления l₂ ^-.

До добавления йода l 358,3 нм, A₁ 2,8 отн.ед. после добавления йода l 358,6 нм, А₂ 5,6 отн.ед.

Рассчитывают относительный коэффициент значимости К 2. Коэффициент значимости больше 1. Наличие злокачественного заболевания подтверждается.

Использование: в медицине, онкология. Цель изобретения: повышение точности способа. Сущность: регистрируют спектры флюоресценции сыворотки крови до и после добавления раствора йода и по увеличению максимума флюоресценции в области длин волн 360 - 380 нм после добавления йода диагностируют злокачественную опухоль.

Способ дифференциальной диагностики злокачественных заболеваний путем исследования физических параметров сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, сыворотку разводят дистиллированной водой в соотношении (V:V) 1:4, регистрируют спектр флюоресценции при длине волны возбуждения 314 нм в диапазоне длин волн 360 380 нм до и после добавления 1% -ного раствора йода в соотношении (V:V) 200:1 и при отношении значений максимумов флюоресценции больше 1 диагностируют злокачественные заболевания.