Способ моделирования ВИЧ-инфекции Советский патент 1993 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к области медиины и может быть использовано для изучеия патогенеза СПИД и разработки новых

методов диагностики и лечения заболеваия.

Целью изобретения является прибликение к клиническому течению заболевания

а счет персистенции вируса в лимфоцитах

рови, паренхиматозных органов, ЦНС.

Дель достигается путем введения вируса в

остный мозг.

Известно, что в организме человека ЗИЧ поражает Т-лимфоциты, поэтому вве- , ение его в орган, где формируются В-лим- юциты не должно было бы приводить к азвитию патологического процесса, В про- ивоположность этому, у животных неожиданно развивается качественно новый атологический процесс, заключающийся в юрмировании ВИЧ-инфекции и заболева- ия, что является неожиданным. Таких дан- х в литературе нет.

Сущность способа заключается в следующей последовательности операций:

1.Животное фиксируют.

2.Волосяной покров в области бедра дезинфицируют.

3.Вируссодержащий материал вводят шприцем в берцовую кость.

Пример1.5 морских свинок массой 150-200 г были заражены в трубчатые (берцовую) кость концентрированным образом ВИЧ 1 штамма ZMB с содержанием белка 5,3 мг/мл в дозе 0,1 мл. Через 2 месяца у двоих животных отмечено снижение массы, потускнение волосяного покрова, адинамия. Через 7. дней одно из пало. Животное №2 погибло через 23 дня после первых клинических проявлений, при этом потеря в массе по сравнению с контролем составила 28%. Животное № 3 погибло без каких-либо клинических проявлений заболевания через 3,7 месяца после заражения. Животные № 4 и № 5 наблюдались 6 месяцев без клиниче00

со

VJ W

ел ел

нических проявлений заболеваний. На вскрытии у свинки Мг 1 отмечено увеличение селезенки и лимфоузлов; № 2 - увеличение селезенки и пневмония; № 3 - увеличение брыжеечных лимфоузлов, № 4 и Мг 5 - изме- ненийчке выявлено. При исследовании сывороток на наличие антител к ВИЧ в иммуноблотинге выявлены антитела к следующим бейкам ВИЧ - № 1, 2 - др120. Р55/53, р24- р17; №3 др120, р55/53. р24; N; 4 - рбб, р55/53, р24; № 5 - рбб, р24; Мг 6 - р24. При помощи цепной полимеразной реакции (PCR) с праймерами 816, 817 и 818, 819 показано наличие интеграции генома ВИЧ 1 в ДНК лимфоцитов крови животных № 4 2, 3, 4. При патоморфологическом исследовании в головном и спинном мозге - выраженная пролиферация макроглии, дегенеративные изменения в нейронах и их частичная гибель, образование многоядерных клеток. Периваскулярная инфильтрация лимфоидными клетками, микроглиальные узелки (№1,2, 3). В селезенке - образование периартериальных фолликулов (Мг 1, 2, 3, 4). В лимфатических узлах - атрофия фолликулов с истощением паракортикальной зоны (Мг 1,2, 3, 4). В печени - дистрофия гепатоцитов, периваску- лярная инфильтрация (Мг 1, 2, 3).

Заключение: результаты серологического, молекулярно-биологического и морфологического исследований свидетельствуют о наличии у животных № 1, 2, 3, 4 ВИЧ-инфекции.

Приме р 2. Три морских свинки массой 120-150 граммов были заражены, как описано в примере 1. Через 2,8 месяца у животного № 1 отмечено резкое похудание (потеря в массе 20%), развитие адинамии, спустя 3 дня свинка погибла при наличии пневмонии. Оставшиеся два животных погибли через 4, 5,5 месяца после заражения от истощения и развития пневмонии. Антитела в сыворотках крови были обнаружены у всех 3 животных к белкам др120, рбб, р55/53. р24. Методом PCR геном ВИЧ в ДНК лимфоцитов обнаружен у животных №

1 и Мг 3, в клетках селезенки у морской

свинки Мг 2. Морфологические изменения

соответствовали описанным в примере № 1.

Заключение; у всех животных этой груп5 пы установлено наличие ВИЧ-инфекции.

П р и м е р 3. Три морских свинки, массой 100-200 г были заражены, как описано , в примере fsfe 1, через 1,6 месяца животное NJ 1 погибло от диспепсии. Животное Мг 2

0 погибло через 3,7 месяца после заражения от пневмонии. Животное № 3 оставалось клинически здоровым в течение всего периода наблюдения (6 мес.). Присутствие гена ВИЧ в ДНК клеток почки и селезенки отме5 чено у морских свинок Мг 1 и 2.

П р и м е р 4. Пяти морским свинкам, массой 150-200 г как описано в примере Мг 1 было введено плацебо (неинфицированные ВИЧ клетки и тимоген). На протяжении

0 всего периода наблюдения (8 мес.) животные оставались здоровыми. При вирусологическом исследовании никаких признаков ВИЧ инфекции не выявлено.

Как видно из примеров 1-3 у животных

5 после заражения их ВИЧ в берцовую кость развивается ВИЧ-инфекция, которая сопровождается образованием антител, диссе- минацией вируса во все органы и ткани и на последнем этапе клинической манифе0 стацией. Таким образом, в результате предложенного способа удалось получить экспериментальную модель инфекционного процесса ВИЧ на мелких лабораторных животных. Эта модель может быть использова5 на для изучения патогенеза СПИД и разработки методов диагностики и лечения.

Формула изобретения Способ моделирования ВИЧ-инфекции

0 путем заражения лабораторных животных, отличающийся тем, что, с целью приближения к клиническому течению заболевания за счет персистенции вируса в лимфоцитах крови, паренхимотозных органах,

5 ЦНС заражение осуществляют введением инфицированного материала внутрь берцовой кости.

Изобретение относится к области медицины. Целью изобретения является получение экспериментальной модели инфекционного процесса, вызываемого ВИЧ, на мелких лабораторных животных. Сущность изобретения состоит в приближении к клиническому течению заболевания за счет персистенции вируса иммунодефицита человека в лимфоцитах крови, паренхиматозных органах. ЦНС лабораторных животных путем введения вируса внутрь берцовой кости. Изобретения может быть использовано при изучении патогенеза СПИД и при разработке новых методов диагностики и лечения заболевания.