Способ моделирования деструктивного туберкулеза легких Советский патент 1982 года по МПК G09B23/28 

(5) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ДЕСТРУКТИВНОГО ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной фтизиатрии. Известен способ моделирования деструктивного туберкулеза легких путем иммунизации животных с последую щим введением микобактерий туберкулеза Г 1 . Однако известный способ не обес печивает получение туберкулезной ка верны, близкой к клиническому течению и пригодной для проведения длительных химиотерапеатических экспериментов, а также характеризуется ограниченной воспроизводимостью кавернозного процесса. Целью изобретения является приближение к клиническому течению заболевания. Поставленная цель достигается тем что согласно способу моделирования деструктивного туберкулеза легких пу тем иммунизации животных с последующим введением микобактерий туберкулеза иммунизацию проводят введением подкожно живых микобактерий бычьего типа (БЦЖ) в дозе 0,14-0,2 мг/кг веса через 1, месяца, далее внутрикожно вводят туберкулин, и при наличии папулы размером 15-f17 мм производят внутрилегочную инъекцию микобактерий человеческого типа в дозе 1, мг/кг веса, затем вводят сульфадиметоксин в дозе 4080 мг/кг веса в течение 10-12 дней. Способ осуществляют следующим образом. Морских свинок предварительно вакцинируют путем введения культуры БЦЖ подкожно в правую паховую область в дозе 0,2 мг/кг веса в 0,5 мм физиологического раствора. Через 1,5 мес после вакцинации при наличии чувствительности к туберкулину (размер папулы см) производят внутрилегочное заражение путем введения микотипа Hj-jRV в диафрагма л ьную долю правого легкого в.дозе 2 мг/кг веса в 0,2 мл вазеЛИН-ланолиновой взвеси. Соотношение ланолина и вазелина 1:2. Прокол производят с помощью шприца в Vl межреберье, по верхнему краю вниз лежащего ребра, на 1 см правее позвоночника, длина иглы 2 см, положение шприца перпендикулярно к туловищу животного. Иглу вводят во всю длину, вес каждого животного не менее 00 г. На следующий день после внутрилегочного заражения, утром натощак перо рально животным вводят сульфадиметоксин в дозе 80 мг/кг веса животного. препарат разводят в дистиллированной воде с добавлением сахара (20 г ..не ли тр воды). В последующие 9 дней препарат вво дят в дозе 40 мг/кг веса животного. Эта доза является достаточной, чтобы сохранить уровень создавшейся БАК (бактериостатической концентрации). Всего продолжительность курса лечения 10-12 дней. П р и м е р. Морской свинке весом 320 г проводят вакцинацию культурной ЦЖ в дозе 0,1 мг/кг сухого веса в 0,5 мг физиологического раствора. Указанную дозу вакцины вводят подкож но в правую паховую область. Через месяц определяют кожную чувствительность на введение альттуберкулина в разведении 1:10. С этой целью предварительно в левой паховой области стригут волосяной покров на участке площадью 9 см. Альттурберкулин вводят внутрикожно в количестве 0,1 мл приготовленного раствора. В результате внутрикожного введения туберкулина в центре обнаженного от волосяного покрова участка кожи образовывается папула - пуговка. На следующий день чувствительность кожи определяют измерением гиперемированного участка. По горизонтали это расстояние 15 мм, по вертикали 18 мм. . Через неделю животному вводят мик робактерии туберкулеза человеческого типа H-..RV в правое .легкое в дозе 1 мг. Приготовление суспензии для зараж ния. Микобактерии туберкулеза человеческого типа выращивают на кар тофельной среде с глицерином в течекультуру тщательно подсушивают между полосками стерильного бумажного фильт ра. 1 мг навески суспензируют в 0,2. мл вазелин-ланолиновой взвеси, соотношение вазелинового масла и ланолина равняется 2:1 соответственно. Приготовленную суспензию, предварительно подогрев до температуры не более , набирают в обычный туберкулиновый шприц, размер иглы 2 см. Весь процесс приготовления суспензии проводится в стерильных условиях. Ланолин и вазелиновое масло предварительно кипятят, Перед проведением прокола морскую свинку фиксируют на деревянном столике, положив на живот, направив передние и задние лапы таким образом, чтобы линия позвоночника была прямая, а лопатки подтянуты кверху. Справа от позвоночника в области 6-7 межреберья стригут волосяной покров и обнаженный участок кожи протирают спиртом. Прокол производят в 6-м межреберье на расстоянии 1 см справа от позвоночника по горизонтали и 0,8 см ниже угла лопатки. Иглу вводят на всю длину (2 см перпендикулярно к кожной поверхйости. Во избежание шока инфект вводится медленно. Вес животного к этому периоду 500 г. На следующий день после заражения, утром до кормления, морской свинке вводят per os 80 мг/кг сульфадиметоксина, суспензированного в 0,5 мл дистиллированной воды с добавлением 1 г сахара. На следующий день препарат вводят в дозе 40 мг/кг однократно в сутки в одно и то же время в течение 7 дней. Контроль за развитием патологического процесса в легочной ткани осуществляют рентгенологически через 1,5 мес после заражения в легочной ткани справа, при рентгенологическом обследовании отмечают очаг затемнения (фокус пневмонии). Через Л мес морскую свинку убивают путем декапитаци. В легких, справа. обнаружена каверна с плотной фиброзной стенкой. В остальных отделах правого легкого рассеяны немногочисленные туберкулезные бугорки. Левое легкое воздушно. В печени и селезенке туберкулезных изменений не обнаружено. При микроскопическом исследовании каверны обнаружено типичное строение ее стенки, состоящей из кавеознонекротического внутреннего слоя, неширокого слоя специфических грануляций и узкого слоя фиброзной ткани, инфильтроваиной лимфоидной клетками и сегментоядерными лейкоцитами.

Окружающая каверну легочная ткань воздушна, междолевые перегородки утолщены.

Предлагаемый способ применен на 60 морских свинках.

В результате применения предлагаемого способа получен 100 результат выживаемости.

Предлагаемый способ моделирования деструктивного туберкулеза легких позволяет получить близкую к клиническому течению туберкулезную каверну в легких в эксперименте.

Предложенная модель обладает лучшей воспроизводимостью и приводит к уменьшению экономических затрат на исследование.,

Формула изобретения

Способ моделирования деструктивного туберкулеза легких путем иммунизации животных с последующим введением микобактерий туберкулеза, отличающийся тем, что, с целью приближения к клиническому течению заболевания, иммунизацию проводят введением подкожно живых бактерий бычьего типа (БЦЖ) в дозе 0,,2 мг/кг веса через 1,5-2 месяца, далее внутрикожно вводят туберкулин, и при наличии папулы размером мм произвбдят внутрилегочную инъекцию микобактерий человеческого типа Hj-y V в дозе 1,52 мг/кг веса, затем вводят сульфадиметоксин в дозе «0-80 мг/кг веса в течение 10-12 дней.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Бондарев И.М. и др. Способ моделирования туберкулеза легких у морских свинок. - В кн.: Патогенез и саногенез очаговых деструктивных форм туберкулеза. М., 19б7, с. 33-38.