Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности и касается получения стабильных и при хранении препаратов, а именно противоопухолевого средства на ос- нове производного хинолинкарбоновой кислоты.
В настоящем изобретении было открыто, что желчные соли, которые представляют собой основные продукты распада холесте- р ина в человеке, являются полезными солю- билизаторами, предотвращающими осаждение солей фенилхинолинкэрбоновых кислот во время получения объемного раствора и при воспроизведении из сублимиро- ванного состояния. Лекарственные растворы, полученные с этими солюбилиза- торами, являются стабильными и их можно легко высушить вымораживанием, чтобы Получить тонкие «садки без изменения действенности, После воспроизведения с помощью воды для инъекции раствор остается прозрачным и пригодным для внутривенного введения. Последующие исследования также показали, что имеется небольшое изменение активности и то сичностилекарства, если лекарство и желчносолевые солюбилизаторы растворяют вместе в растворе.
Высушенный вымораживанием порошковый препарат, описанный в настоящем изобретении, состоит по существу из активного противоопухолевого ингредиента, соли фенилхинолинкарбоновой кислоты, предпочтительно натриевой соли 6-фтор-2- (2-фторо-1,1 - бифенил-4-ил)-3-метил-4-хи- нолинкарбоновой кислоты, либо нэтриегюй соли .2(1,1 -бифенил-4-ил)-5-хлоро-3-метил- 4-хинолинкарбоновой кислоты, либо натриевой соли 2-(1,Г-бифенил-4-ил)-5-хлоро-3сю
СЭ
VI
00
ч со
СлЭ
метил-4-хинолинкарбоновой кислоты, и стабилизирующей системы. Стабилизирующая система достоит по существу из желчн со- левогосолкхЗДбилизатора и фармацевтически допустимого буфера или основания, которые могут довести значение рН до величины 8,5-11 в водном растворе.
Несмотря на то, что можно использовать любую соль фенилхинолинкарбоновых кислот, описанную в ЕР-133244-А1, предпочтительными кислотными солями являются те, которые описаны выше. Описание таких кислот в ЕР-133244 приложено здесь для ссылки.
Желчные соли, используемые в стабилизирующей системе, предпочтительно представляют собой холат натрия или дезоксихолат натрия. Можно также использовать соли других щелочных металлов (лития, калия) или органические соли. Полезны также соли других желчных кислот. Они включают дегидрохолевую кислоту, липохо- левую кислоту, гидродезоксихолевую кислоту, хенодезоксихрлевую кислоту, гликодезоксихолевую кислоту, теуродезок- сихолевую кислоту, гликохолевую кислоту и таурохолевую кислоту.
Любое фармацевтически допустимое основание или буфер можно использовать в композициях, которое будет давать первоначальное водное значение рН или рН при водном воспроизведении в диапазоне примерно 8,5-11, предпочтительно рН примерно 9. Полезные буферы и основания включают, глутамат натрия, фосфат натрия, глицин, гидроокись натрия, триэтаноламин и карбонат натрия. Предпочтительными материалами являются глицин или гидроокись натрия. Особенно предпочтительным является глицин.
Количества материалов в композициях основываются на лекарстве, т.е. на соли фе- нилхинолинкарбоновой кислоты. На каждую 1 часть по весу лекарства требуется не менее примерно 6,1 части по весу желчной соли, как правило, предпочтительное весо- .вое отношение лекарства к желчной соли находится в пределах от примерно 1:0,1 до 1:0,8.
Изобретение далее будет проиллюстрировано с помощью следующих примеров.
Пример 1. высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль б-фторо-2-(2 -фторо-1,1 -бифенил-4- ил)-3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты. Каждая 10 мл ампула содержала названное соединение (100 мг), холат натрия (40 мг) и глицин (40 мг).
Для изготовления 250 ампул:
0
5
0
5
0
5
0
5
0
5
Названное соединение (25 г) суспендировали в растворе холата натрия (10 г) и глицина (10 г) в воде для инъекций (950 мл). Значение рН полученной суспензии довели до 9,0-9,5 с помощью 1 н. раствора NaOH, и смесь перемешивали до тех пор, пока она не, стала прозрачной. Затем раствор довели до 1000 мл путем добавления воды для инъекций, а затем смесь отфильтровали через фильтр 0,22 микрона. Каждую 10 мл ампулу асептически заполнили 4 мл отфильтрованного раствора.
Ампулы поместили в лиофилизатор и замораживали при температуре от -40 до - 45 С в течение двух часов. Включили конденсатор; и температуре дали опуститься до -60°С. Затем ампулы откачивали при давлении 50-100 миллиторр при 20°С в течение 24 ч. Наконец.ампулы сушилу при 45°С в течение еще двух часов, чтобы получить тонкий белый осадок, который воспроизводили с помощью воды для инъекции (4 мл) до стабильного раствора для внутривенного использования.
Данные о 24-часовой стабильности воспроизведенного раствора названного соединения приведены в табл. 1. .
Концентрации лекарства определяли с помощью жидкостной хроматографии высокого давления. Среднее значение получено на основе четырех отдельных аликвот, взятых из композитного образца.
Пример 2. Высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль 2-(1,1 -бифенил-4-ил)-5-хлоро-3-метил- 4- хинолинкарбоновой кислоты.
Каждая 10 мл ампула содержала названное соединение (100 мг), дезоксихолат на трия (50 мг) и глицин (50 мг).
Этот препарат получили по способу, аналогичному описанному в примере 1. Получили порошок с аналогичными свойствами.
Пример 3, Высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль 6-фторо-2-(2 -фторо-1,1 -бифенил-4-ил)- З-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты.
Каждая 10 мл ампула содержала названное соединение (100 мг), холат натрия (80 мг) и гидроокись натрия (в достаточном количестве, чтобы довести значение рН до 9,0).
Этот препарат получили способом, аналогичным тому, какой описан в примере 1. Получили порошок с аналогичными свойствами.
Пример 4. Высушенный вымораживанием препарат, содержащий натриевую соль 6-фторо-2-(2 -фторо-1,1 -бифенил-4- ил)-3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты.
Каждая 20 мл ампула содержала название е соединение (500 мг), холат натрия (80 мг) и лицин (80 мг).
Для изготовления 250 ампул:
Названное соединение(125 г)суспенди- в растворе холатэ натрия (20 г) и глицина (20 г) в воде для инъекций (1195 мл). Значение рН полученной суспензии довели до 9,0-9,5 с помощью 1 н. раствора NaOH, и смесь перемешивали до тех пор, пока она не стала прозрачной. Затем раствор довели до 2000 мл путем добавления воды для инъекций при перемешивании, а затем отфильтровывали через фильтр 0,22 микрона. Кпждую 20 мл ампулу асептически заполнили 8 мл отфильтрованного раствора.
Ампулы поместили в лиофилизатор и замораживали при температуре от -40 до - в течение шести часов. Включили конденсатор, и температуре дали опуститься до -60°С. Затем ампулы откачивали при давлении 50-100 миллиторр при 20°С в течение 24 ч. Наконец ампулы высушивали п )и 45°С в течение еще четырех часов, что- б .I получить тонкий белый осадок, который воспроизводили с помощью воды для инъ- е сций (8 мл) до стабильного раствора для в нутривенного использования.
Пример 5. Изучение стабильности в осушенной вымораживанием натриевой с эли 6-фторо-2-(2 -фторо-1,1 -бифенил-4- и 1)-3-метил-4- хинолинкарбоновой кислоты.
Названное соединение приготовили так, как описано в примере 1. Высушенный в вмораживанием порошок запаяли в 10 мл а лпулах и хранили при различных условиях Д1я наблюдения стабильности. Как показа- нэ в табл. 2 приготовленные образцы были химически стабильными. Однако, при визу- апьном осмотре было отмечено проявление сзетло-коричневого цвета под действием быточного света.
Пример 6. Противоопухолевая активность in vivo включенной в рецептуру натриевой оли 6-фторо-2-{2-фторо-1,1 -бифенил-4-ил}- 3- етил-4-хинолинкарбоновой кислоты.
Приготовили раствор (1 мл), содержащий названное соединение (25 мг), холат натрия (10 мг) и глицин (10 мг), имеющий тзкой же состав, как и воспроизведенный раствор, описанный в примере 1. Затем к вышеуказанному добавили дистиллированную воду (4 мл), чтобы приготовить раствор 50 мг/кг. Последовательными двукратными разбавлениями дистиллированной водой раствора 50 мг/кг получили остальные три концентрации. Непрепарированный контрольный раствор получили путем растворе- ния названного соединения в дистиллированной воде, и его использовали
ио
до тех nopv пока он не перестанет быть прозрачным.
Противоопухолевая активность включенного в рецептуру и непрепарированного 5 материала по отношению к лейкемии L 1210 в мышах показана в табл. 3. Испытание проводили следующим образом. В день 0, мышей CDF1 внутрибрюшинно заражали 1x10 клетками мышиной лейкемии L 1210. В день
0 1 внутрибрюшинно вводили включенное в рецептуру или непрепарированное названное соединение, и инъекции продолжали делать раз в день до дня 9. Мышей наблюдали до тех пор, пока они не умирали.
5 Эти испытания показывают, что холат натрия и глицин не влияют на противоопухолевую активность названного соединения.
Пример 7. Сравнение безопасности
0 препаратов натриевой соли 6-фторо-2-(2 - фторо-1 -бифенил-4-ил)-3-метил-4-хинол - инкарбоновой кислоты в дистиллированной воде и в 1 % холате натрия/ 1 % глицина.
5 Было проведено сравнительное испытание названного соединения, чтобы оценить возможное различие летательных доз композиций, описанных здесь, и композиций, приготовленных путем растворения в воде.
0 Названное соединение препарировали в виде высушенной вымораживанием композиции, как в примере 1, и воспроизвели с помощью воды перед инъекцией. Два раствора названного соединения парентераль5 но вводили в самок мышей BeCaFi весом-. 17-22 грамма в виде однократных дозировок 0, 120, 144, 173 и 200 мг/кг. После введения соединения смертность оценивали дважды в день в течение 14 дней.
0Величины LDso, соответствующие им
доверительные интервалы и наклоны кривых реакции были следующими (см. табл. 4). Кроме того, десяти самкам мышей ВбСзР1 внутривенно вводили однократную
5 дозу носителя 1% холата натрия/глицина (рН 9,0) при 10 мл/кг. В результате этого контрольного введения носителя не наблюдалось никакой смертности.
Формула изобретения
0 Способ получения противоопухолевого средства на основе производного хинолин- кэрбоновой кислоты, отличающийся тем, что, с целью повышения стабильности, в качестве, производного хинолинкзрбоно5 вой кислоты используют натриевую соль 6-фтор-2-(2 - фтор-1,1 -бифенил-4-ил)-3-ме- тил-4-хинолинкарбоновой кислоты или натриевую соль 2-{1,1 -бифенил-4-ил)-5-хлоггЗ-метил-1- хинолинкарбоновой кислоты, причем натриевую соль 6-фтор-2-(2 - фтор-1,1 -бифенил-4ил)-3-метил-4-хинолинкарбоновой кислоты добавляют к холату натрия в соотношении 1:0,8 - 0,16, а натриевую соль 2-(1,1 -бифенил-4-ил}- 5-хлор-3-метил-4- хинолинкарбонрвой кислоты к дезоксихолату натрия в соотношении 1:0,5 и затем добавляют глицин и гидроокись натрия
до рН 9,0-9,5, проводят стерилизующую фильтрацию, лиофильно высушивают замораживанием при температуре от -(40-45) до -60°С и сушат 24 ч при давлении 50-100 млторр и температуре 20°С, а затем высушивают в течение еще 2-4 ч при 45°С.
Таблица 1
Время.ч
Процент оставшегося лекарства
Среднее 99,4 Стандартное отклонение
±0,1
Среднее 100,0 Стандартное отклонение
±0,2
Среднее 99,2
Стандартное отклонение
+ 0,2
(Исходная проба: 100,4 мг названного Соединения в 10 мл прозрачном
стеклянном пузырьке с резиновой пробкой. Приведенные цифры показывают процент от исходной пробы.
Время выживания: % Т/С (средний день смерти обработанных мышей/средний день смерти контрольных животных х 100)
Контрольные животные, которым вводили носитель, выживали в течение 8,5 дней (0,2% холата натрия, 0,2% глицина в дистиллированной воде)
Контрольные животные, которым вводили носитель, выживали в течение 9,0 дней (дистиллированная вода).
Физический внешний вид
Прозрачный раствор
Прозрачный раствор
Прозрачный раствор
Таблица 2
ТаблицаЗ
