Д. Г.-А. Вальковский, В. И. Мисюрев.Р. К. Дыбовский, В. В. Андрианов и М. А. ГулькоОрдена Ленина институт элементоорганических соединенийАН СССР Советский патент 1969 года по МПК A23J1/18 

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ ИЗ Изобретение относится к микробиологии, в частности, к области получения микробиологического пищевого белка из углеводородов нефти. Известен способ выделения белков из клеточного материала, например из бактерий, путем воздействия ультразвуковой кавитации на водную бактериальную суспензию. Для облегчения процесса выделения белков путем предварительного разрушения клеточнь1х оболочек с одновременной экстракцией жировых веществ предлагается клеточный материал перед воздействием кавитации обезвоживать, клеточную суспензию готовить на органическом растворителе. Для отделения растворителя дезинтегрированный материал сушат, например в вакууме, после чего белок экстрагируют раствором щелочи я изолируют его, например, осаждением кислотой в изоэлектрической точке. Предлагаемый способ заключается в следующем. Влажный клеточный материал сушат, например, экстр,акцией ацетоном, затем загру жают в 1кавцтационную мельницу вместе с ор ганическим растворителем и экспанируют опоеделенное время. КЛЕТОЧНОГО МАТЕРИАЛА вые вещества и витамины групп А и Д переходят в растворитель. Дезинтегрированный материал промывают растворителем до удаления остатков жировых веществ, после чего отделяют растворитель сушкой, например, в вакууме. Затем белок экстрагируют раствором щелочи и изолируют, например, осаждением кислотой в изоэлектрической точке. Пример 1. Свежие влажные рода Candida в количестве 100 г, полученные на чистых жидкнх нарафинах (сухой остаток 25 г), промывают сухим ацетоном для полного удаления воды. Навеску в 20 г обезвоженного клеточного материала обрабатывают в течение 15 мин в кавитационной мельнице при 7-10°С в хлористом метилене (50 мл) до степени разрушения «леток, .равной 98% (по данным электронной микроскопии). Разрушенный клеточный матер.иал отделяют от хлористого метилена на фильтре, дополнительно промывают хлорнстым .метиленом от липидов и растворитель удаляют сушкой в вакууме при 60-70°С. Затем 15 г клеточного материала (освобожденного от растворителя) экстрагируют 0,1 н. раствором NaOH, клеточные оболочки и нерастворимые примеси отделяю центрифугированием, а из раствора белки осаждают

4-4,5. Выпавшие белки промывают водой, ацетоном для удаления воды и сушат при 60- 70°С. Выход белков (при влажности 10%) составляет 70%. Элементарный анализ полученного продукN 13,6;

та дал следующие результаты.

С 48,2; Н 6,85; Р - следы.

Пример 2. Пекарские дрожжи Saccharam cerev так же, как в первом примере, промывают водой и сушат ацетоном. Сухой клеточный материал обрабатывают в кавитационной мельнице в течение 20 мин и при температуре 7-10°С. Степень разрушения клеточных мембран составляет 96%.

Навеску в 10 г разрушенного клеточного материала после удаления органического растворителя обрабатывают 0,1 н. раствором NaOH и после отделения на центрифуге клеточных оболочек белки из раствора осанадают 10%-иьш раствором уксусной кислоты.

После промывки водой и ацетоном и сушки при 60-65°С получено 2,15 г белка в виде белого порошка.

Выход продукта составляет 65%. При элементарном анализе получены следующие результаты: N 15,0%; Р - следы.

Предмет изобретения

Способ выделения белков из клеточного материала, например из микроорганизмов, предусматривающий воздействие кавитации на

клеточную суспензию, отличающийся тем, что, с целью облегчения процесса выделения белков путем предварительного разрушения клеточных оболочек с одновременной экстракцией жировых веществ, клеточный материал перед

воздействием кавитации обезвоживают, а для приготовления клеточной суспензии используют органический растворитель, причем от полученного в результате воздействия кавитации дезинтегрированного материала отделяют растворитель сушкой, например, в вакууме, и экстрагируют белок раствором щелочи с последующей его изоляцией, например осаждением кислотой в изоэлектрической точке.