СПОСОБ ФРАКЦИОНИРОВАНИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ Советский патент 1971 года по МПК A61K35/16 

Известен способ фракционирования сыворотки крови иутем осаждения гамма-глобулиновой фракции раствором сернокислого натрия.

Предлагаемый способ отличается тем, что осаждение гамма-глобулиновой фракции из сыворотки крови проводят водным раствором гипосульфита натрия. Этот способ технологически прост, ограничивает возможность соосаждения посторонни- фракций, позволяет быстро удалить примесь осадителя из полученной фракции белка или же оставить этот осадитель в .виде 1примеси, не требует дорогостоящей аппаратуры (например, холодильных установок).

Гипосульфит натрия, взятый в качестве осадителя, безвреден для организма, хорошо растворим в воде, растворы его стабильны.

Способ фракционирования сыворотки крови по предлагаемому способу состоит в следующем.

В эмалированную емкость (200-250 л) загружают сыворотку крови в объеме 100 л и при умеренном помешивании приливают 3,18 М раствор гипосульфита натрия со скоростью 8-12 л/мин.

Для осаждения гамма-глобулина из сыворотки крови крупного рогатого скота конечное объемное соотношение сыворотки и раствора гипосульфита иатрия должно составлять 1:1; для осаждения гамма-глобулина из сыворотки

крови свиней - 1 : 0,850.

Перед осаждением температура сыворотки крови и раствора гипосульфита натрия должна быть 17-19°С. Через 40-60 лшн после объединения сыворотки крови с 3,18М. раствора гипосульфита натрия смесь, содержащую флокулят гамма-глобулина, подают на суперцентрифугу (С ГО-150 или С ГО-100). Эту операцию, как и все прочие, проводят при комиатной температуре. Производительность центрифуги СГО-150 ;не более 160 л/час, на центрифуге СГО-100 не более 80 л/час.

Затем сырой осадок гамма-глобулина извлекают из poTOipa центрифуги и разделяют на

партии ло 1,0-1,5 кг. Каждую партию сырого осадка заворачивают в сверток при помощи трех - четырех слойной технической хлопчатобумажной ткани и помещают под пресс на 24-48 час. Затем растворяют осадок гамма-глобулина в обессоленной апирогенной воде. Перед растворением необходимо определить концентрацню беЛКа в осадке и .взвеоить весь осадок. После этого проводят расчет необходимого

количества воды по формуле

Р((1)

G - избранная концентрация гаммаглобулина в %;

Л - необходимое количество растворителя (воды) в л.

Необходимое количество консерванта ноля) можно рассчитать но формуле

ВР

Ф

200G

где Ф - количество фенола (в кг), которое необходимо добавить к растворителю (воде), чтобы в итоге конечная концентрация фенола в пренарате составляла 0,5%.

В отмеренном количестве воды, предназначенной для растворения осадка, сначала растворяют рассчитанное количество фенола, .после чего в данной фенолизированной воде растворяют осадок.

Полученный в результате предшествующих операций раствор гамма-глобулина сначала фильтруют через бумажную мезгу в фильтре Нутче под вакуумом. Затем препарат фильтруют через стерилизующие пластинки фильтра Зейтца ПОД положительным давлением.

Каждую серию стерильного раствора гаммаглобулина выдерживают в темном месте при комнатной темнературе 2-3 месяца.

После выдерлсивания препарата освобождаются от выпавщего осадка путем декантирования и разливают препарат в флаконы, которые (Предварительно были простерилизованы. Флаконы герметизируются резиновыми пробками.

Расфасованный нрепарат контролируется на стерильность, пирогенность, концентрацию белка, гипосульфита натрия и примеси других белковых фракций сыворотки крови.

Предмет изобретения

Способ фракционирования сыворотки крови, включающий осаждение белковых фракций

путем добавления к сыворотке крови водных растворов не тральных минеральных солей, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности гамма-глобулиновой фракции, в качестве нейтральной минеральной соли берут водный раствор гипосульфита натрия.