СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФРАКЦИЙ КАЗЕИНА МОЛОКА Советский патент 1971 года по МПК G01N33/04 

Изобретение относится к области химического анализа молока.

Известен способ определения фракций казеина молока, предусматривающий разбавление агара в буфере, содержащем мочевину, заливку полученного геля в камеру, растворение казеина в буфере, внесение раствора казеина в гель, установку камеры в кювету с буферным раствором, с последующим проведением процессов электрофореза, фиксаци и сущки геля, а также окрашивания электрофореграммы, определения количества фракций путем элюирования раствором щелочи и определения оптической плотности фракций.

Цель .изобретения - более полное качественное и количественное определение фракции казеина.

Это достигается тем, что разба1вление агара, растворение казеина и установление камеры ,в кювету осуществляют с .использованием боратно-ацетатного буфера с рН, равным 8,6- 8,9, .при этом концентрацию буфера в КЕОзете устанавливают в два раза меньше, чем пр.и разбавлении агара.

Для приготовления боратно-ацетатного буфера используют ацетата .натрия 47,5 г, борной кислоты 52,56 г и буры 76,28 г на 10 воды.

перед его разбавлением удаляют термолабильные фракции.

Процесс электрофореза .проводят при концентрации белка, равной 1,5-2,5%, температуре +2-8°С в течение 17-18 час с использованием платиновых электродов.

Используют общий казеин коровьего молока, полученный кислотным переосаждением и высушенный холодным ацетоном.

Переносят 45 г Корсаковского агара в щирокогорлую колбу Еа 2 л с меткой. Заливают водой, перемешивают ,и оставляют па 3-4 час. Воду сливают через марлевые фильтры, находящиеся на горлышке колбы. Через эти же

фильтры пр,и .помощи воронки заливают :воду. Перемешивают и оставляют на ночь. Воду сливают как можно полнее и объем суспензии агара доводят водой до метки 2 л. Гомогенный раствор агара получают нагреванием в

кипяченой водяной бане (преимущественно не более 2 час путем глубокого погрулсевия колбы в воду).

Раствор агара фильтруют па воронке Бюхнера через ватные фильтры (фильтры предварительно .промывают кипяченой водой па воронке). Фильтр собирают, нагревают до 70- 75°С и отфильтровывают снова. В раствор добавляют мертиолат и хранят в холодильнике. Затем используют электрофоретичеокую ка