Способ определения фибринолотической и антифибринолитической активности крови Советский патент 1979 года по МПК G01N33/16 

Изобретение относится к медицине.

Известны способы спредепения фибринопитической и акткфибринопитической активности крови измерением концентрации фибрина реактивом Фолина-Чикалто. Указанные способы требуют для своего осуществления сравнительно много времени.

Цель изобретения - сокращение времени исследования.. Для этого измерение концентрации фибрина производят в пробах, содержащих эугпобулины и хлористый после 1 и 2 ч инкубации при 37 С, а также в пробе, содержащей эуглобулины, хлористый кальций и сыворотку после 2 ч инкубации. О фибринолитической активности эуг-лобулиновой фракции плазмы судят по снижению концентрации фибрина в пробах, содержащих эуглобулины и хлористый кальций за 1 ч а об антифибринолитичег;кой активности сыворотки - по разнице кониентрац га фибрина в пробах с сывороткой и без нее.

Дня вьшолнения определения в соответствии с изобретением в 3 пробирки вносят по 0,5 мл цитратной или окса- латной плазмы и добавляют по 9,5 мл дистиллированной воды и 0,15 мл 1%-ной уксусной кислоты. Пробирки выдерживают при 4 С в течение 30 мин и центрифугируют нрй 1500 об/мин 10 мин. Надосадочную жидкость отбрасывают, а осадок суигат фильтровальной бумагой и растворяют в 5 мл физиологического раствора, подщелоченного бурой йо рН 7,6. К одной из полученных проб добавляют 0,1 мл разведенной (1:9) сьшоротки этой же крови, а затем во все три пробы добавляют 0,5м 0,277% раствора хлористого кальция. Содержимое пробирок перемешивают стеклянньгми палочками, которые оставляют , и затем инкубируют пробы при 37 С. Пробу с сывороткой и еще одну пробу инкубируют в течение 2 ч, а оставшуюся пробу I ч. После инкубации пробы помещают в холодильник, в ,-3 который предварительно помещают трп контрольных пробирки с 8-10 мл фН зиологического раствора. Во время инку бации в термостате на папочках образуе ся сгусток фибрина, который промывают охлажденным физиологическим раствором сушат фильтровальной бумагой и перено сят в пробирки с меткой на 10 мл, в. которые предварительно налито по 2 мл 0,1 н, раствора едкого натра. Пробарки подогревают 5-10 мин на кипящей водяной бане до растворения сгустка и оставляют на ночь в холодильнике (опыт можно продолжать и не оставляя пробу на ночь). В каждую пробирку добавляют по 6 мл 12,5% раствора карбоната натрия, I МП 0,01 м раствора сушэфата ме перемешивают и через 10 кган ввод5зт по 1 мл реактива Фолина-Чикалто, разбавленного (1:2) дистиллированной водой. Череа 30-60 мин определяют оптическую плотность растворов в фотоколориметре с красным светофильтром в кювете 5 мм Контролем раствор, содержащий те же реактивы. Фнбринолитическую активность (Фа.%) определяют по формуламА А .. оптическая ппотнсють проб, инку6ировавш1 х ся I ч. А и н А-.-оптнчес;кая ппоткость проб, инкубировавшихся 2 ч. Антифибри-нопитнческзто активность определяют по разности фибринолсзгической активности в npofe с сывороткой к без нее. рмупа изобретения Способ опрадепения фнбркнопйтичесЕой и антифнбркнопнтической активности кро в0 измерением концентр 1цин фибрина реактивом Фопика-Чикапто, отличающ и и с я тем, что, с цепью сокращения времени исследования, измерения концентрапии фибрина производят в пробах, содержащих аугпобулины и хлористый после 1 и 2 ч инкубации при 37 С, а также в пробе, содержащей эуглобулины, хлористый кальций и сыворотку после 2 ч инкубации, причем о фибрннолитической активности эуглобулиновой фракции плазмы сздят по снижению концентрации фибрина в пробах, содержащих эуглобулины и хлористый кальций, . за I ч, а об антифибринол ггической активности сывораткг. - ио разнице кои центрадюГг фибргша к пробах с сывороткой и без нее.