Способ определения фибринолитической активности плазмы крови Советский патент 1980 года по МПК G01N33/48 

1

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии.

Известен способ определения фибринолитической активности плазмы 5 крови путем выделения эуглобулиновой фракции плазмы крови, растворения ее в растворе борнокислого натрия с последующей инкубацией этой фракции с растворами тромбина fQ и определением времени полного лизиса сгустка фибрина 1,

Однако данный способ не позволяет дифференцировать ферментативный и неферментативный фибринолиз,

Целью изобретения является дифференцирование ферментативного и неферментативного фибринолиза.

Указанная цель достигается тем, что эуглобулиновую фракцию плазмы 20 делят на две части, в одну из которых добавляют протаминсульфат в концентрации 0,01-0,05% по весу, а в другую 0,85-0,9% раствор NaCE и после добавления в обе пробирки хло- 25 ристого кальция по времени лизиса фибринового сгустка в 1-й пробирке определяют ферментативный фибринолиз, во 2-й - суммарный, включающий ферментативный и неферментативный фибри- д

нолиз, а по разнице между ними неферментативный фибринолиз.

Способ осуществляют следующим образом.

Получают эуглобулиновую фракцию плазмы, для чего к О,5 мл плазмы добавляют 8 мл дистиллированной воды и 0,15 мл 1%-ной уксусной кислоты (рН 5,2). Смесь оставляют в холодильнике (4-6°С) на 20-30 мин, после чего центрифугируют в течение 1015 мин при 1800-2000 об/мин, надосадочную жидкость удаляют, а осадок растворяют в 5 мл раствора борнокислого натрия, помешивая тонкой стеклянной палочкой , После этого пробу делят на две равные части по 2,5 мл. В одну пробирку приливают раствор NaC& в концентрации 0,850,9%, а в другую - протаминсульфат в концентрации 0,01-0,05 % подвесу. Далее пробы инкубируют при 37°С в течение 5-10 мин, после чего в обе пробы добавляют 0,25 мл 0,025 М раствора СаСе , помещают в пробирки тонкие стекля1жые палочки, вокруг которых образуется сгусток фибрина, и замечают время от начала образования сгустка до его полного лизиса при . Для расчета процента ферментативного фибринолиза (% ФФ) в эуглобулин вой фракции плазмы предложена следующая формула: % ФФ д f X 100, где А - время лизиса сгустка фибрин полученного из эуглобулиновой фракции плазмы, проинку бированной с физиологически раствором ЫаСЕ; В - время лизиса сгустка фибрин полученного из эуглобулиновой фракции плазмы, проинку бированной с раствором протаминсульфата. Процент неферментативного фибрин лиза (%НФ) в эуглобулиновой фракции плазмы вычисляют следующим образом % НФ 100 - % ФФ Предлагаемый способ позволяет по сить надежность способа и четко диф ференцировать ферментативный и неферментативный фибринолиз, . Формула изобретения Способ ойределения фибринсхпитиче кой активности плазмы крови путем выделения эуглобулиновой фракции ее, растворением последней в растворе борнокислого натрия с последующим добавлением хлористого кальция и проведением лизиса образовавшегося фибринового сгустка, отличающ и и с я тем, что, с целью дифференциации ферментативного и неферментативного фибринолиза, эуглобулиновую фракцию плазмы делят на 2 части, в одну из которых добавляют протаминсульфат в концентрации 0,010,05% по весу, а в другую 0,85-0,9% раствор NaCe и после добавления в обе пробирки хлористого кальция по времени лизиса фибринового сгустка в 1-й пробирке определяют ферментативный фибринолиз, во 2-й - суммарный, включающий ферментативный и неферментативный фибринолиз, а по разнице между ними - неферментативный фибринолиз. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1, Kowaeski Е. , Корее М, , Niewiarowski. S, On EvoCution of tfie Enggobubin Method for the Determination of Fibrino ysis, t/.ceinicae Pathoeogy ,1959, 12, p. 215-218.