СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ Советский патент 1972 года по МПК C12N9/48 

Изобретение относится к -микробиологичеС1КОЙ промышленности.

Из1Вйстен сиосОб получения лроте олитических ерм&нтов -путем выращивания их продуцентов, например Aspergillus terrkola, ла питателвдой среде, содержащей источШики углерода, азота, в присутствии Минеральных солей.

Предлагаемый юпособ поз1воляет получить более высокий выход протеолитических ферменггов, а также сократить срок .ферментации.

Это достигается тем, что в качестве .И|Сточника азота используют ок-сидат тидролизяюго лигнина iB количестве 2-4% ло азоту (то Кьель,далю), а в качестве источника углерода используют мелассу в количастве, раВИом 0,5% по редуцирующим вещества1М.

При ПредлагаемоМ способе |П10луче«ия Протеолитических ферментов в состав фермеитациоиной среды вводят оассидат лигии.на в количестве 2-4% |Ио азоту, ко.торый является продуктом окислИтелыной деструкции гидролизиого липнина асислородом в.оздуха в .присутствии аммиака и содержит 0,8-1% амМ01НИЙНЫХ солей оргач1ических кислот (муравьиной, янтарной, у1усусиой) и в большом количестве азот в (Виде сульфата аМ|МО Ния, ам1МОНийНых солей органических кислот и других соединений азота.

Оксидат лигнина является благоприятным и легкоусвояемым источником азотного литания для лродуцентов протеолитических ферментов. Ферментационная среда в качестве источника углерода содерж,ит мелассу в количестве 0,5% по редуцирующи.м веществам. Добавление мелассы .способствует обогащению ферментационной среды витаздииными и биологически активны1ми веществами.

Состав ферментационной среды, %:

азот оксидата е виде

2-4 сульфата аммония

аМмон.ийные соли орга0,8-1 нических .кислот

0,5 (по РВ)

.меласса 1,37

КН2Р04 0,12

MgS04 0,01 ZnS04 0,05 MnSO4 0,015 FeSO4

Пример. В ферментационную среду (состав указали вьипе) после стерилизации и доведения рН до 6,8-7,0 засевают проросщие конидии Aspergillus terricola 3374. Биосинтез протеолитических ферМентов осуществляют пуТам глубинного культивирования продуцента в колбах Эрле 1мейера на качалке при .По окончании срюка выращя.залпя б су гриба отделяют фпльтровалием, фе НЫй препарат выделяют пу.тем осаждеи тырьмя этанола с |Последу вы.сушиванием, Определение 1пр:отеолитичес,ко.й актнвиостл (;ПО Ансону) проводят иепосредстйелио в фильтрате культуралыюй жидкости, а также в p.aiCTBO.pe сухого лреларата фермента. В таблице .приведены сравнительлые данные |Ио получению протеазы .Продуцеятом Aspergillus terricola 3374 на спе-цифической ферментаЦиоогиой среде, состав мийвралыных солей которой взят за юснову для дааного способа. Предмет изобретем и я 1.Способ полу.чеиия протеолитических ферментов -путем шыращиеания их .продуцентов, налрп.мер Aspergillus terricola, «а питателыной среде, содержащей истОЧНИКИ углерода, азота, .в присутствии минеральных солей, отличающийся тем, что, с целью .повышения выхода и активиости ферментов, а также сокращения процессов ферментации, в качестве источника азота исПОЛьзуют оксидат гидролизного лигиина в количестве 2-4% ио азоту (.по Кьельдалю). 2.С|По.соб ПО 1П. 1, отличающийся тем, что в качестве источника углерода используют Мелассу в количестве, равно м 0,5% по редуцирующим веществам.