СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ jBHOMACcbf Советский патент 1972 года по МПК C12N1/16 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, точнее к способу получения биомассы.

Известен способ получения биомассы путем выращивания дрожжей, ассимилирующих-.углеводороды, например Candida, Torylopsis, Pichia на среде, содержащей в качестве источника углерода углеводородные фракции н-ефти в присутствии водной минеральной среды, содержащей источник азота, фосфора, калия, магния н стимулятора роста нри аэрацИИ среды.

Предлагаемый способ позволяет проводить смешанное культивирование углеводород-ассимилирующ.их дрожжей с углеводород-неассимилирующими дрожжами.

Это обеспечивает повышенный выход биомассы, более интенсивный рост микроорганизмов и новышенное содержание сырого протеина в биомассе.

Предлагаемый способ предусматривает выращивание дрожжей, ассимилирующих углеводороды, производить совместно с углеводороднеассимиЛИрующими дрожжами, пот рёбляющими метаболить, продуцируемые первыми дрожжами.

В -качестве углеводород-неассимилирующих дрожжей -используют семейство Cryptococcaeсае в частности виды Trichosporon pullulans, род Candida в частности вид utilis род Rhodo5 torula. в частности виды rubre я minuta род Torulopsis в частности вид psendaeria род Debaryomyces в частности вид hansenii.

Сырьем служат алифатические углеводороды с открытой цепью, имеющие от 9 до 30 ато10- мов в молекуле, и нефтяные углеводороды, богатые алифатическими углеводородами с открытой цепью.

Выращивание дрожжей ведут в следующих условиях; рН среды преимущественно равной

15:3,5-6,0, температура 25-40°С, концентрация углеводородов в водной нитательной среде от 0,01 до 1%.

Питательная среда . представляет собой раствор, содержащий помимо нефтяных угле20:..-водородов неорганических или органических азотсодержащих соединений, фосфорсодержащие соединения, а также неорганические соли и иногда органические соли. Кроме того, для ускорения роста микроорганизмов добавляют

Способ осуществляется следующим образом. Условия выращивания следующие: рН среды 3,5-6,0, температура 25-40 С, предположительно от 27-35°С, концентрация углеводородов нефти в питательной среде от 0,01 до 1%. Во время вЫращ-ивания в среду подают газ, содержащий свободный кислород. Смешивание дрожжей, ассимилирующие углеводороды, с углеводород-неассимилирующими дрожжами проводят в начале .культивирования или в процессе ферментавди. Пример 1.

Углеводород-ассимилирующие дрожжи Candida brumptii и некоторые углеводород-неассимилирующие дрожжи, такие как Candida utilis, Torulopsis psendaesia, Deboryomyces hansenii, Trigonopsis variabiles совместно культивируют. В 500 AIM колбу помещают 30 мл культуральной среды следующего состава, г:

Мочевина5,0

Хлорид «алия2,0

Сульфат магния2,0 г

Сульфат цинка0,03 г

Сульфат двухвалентного железа0,1 г

Пример 2.

Углеводород - неассимилирующие дрожжи Rhodotoruba rubra и некоторые углеводородассимилирующие дрожжи, указанные в таблиЭкстракт дрожжей1,0 г

Водопроводная вода1,0 г

рН5,0 г

а также 75% фосфорной кислоты 2,7 мл.

Дрожжи, предварительно пророщенные, после- промывания в воде добавляются так, чтобы концентрация клеток была около 1X10 мл. Культивирование проводят в течение 48 час при 33°С с встряхиванием. Затем определяют выход дрожжевых клеток и содержание сырого протеина в них. Результаты приведены в табл. 1.

Таблица 1

це 2, совместно Культивируют. Условия те ж&, что Б Примере 1. Результаты приведены в табл. 2.

Таблица 2

Пример

Углеводород-ассимилирующие дрожжи Candida guilliermondii и углеводород-неассимилирующие дрожжи Trichosporon cutancum совместно культивируют в аэробных условиях в течение 48 час в культуральной среде, состав которой указан в примере 1. Получившиеся культуры двух видов смешивают в соотношении 100 : О, 90 : 10, 80 : 20 и 70 : 30 соответственно. Каждую смесь размещают в количестве 10% в 18 л основной культуральной среды того же состава, помещенной в 30 л ферментатора. Эту см.есь подвергают культивированию при перемешивании со скоростью 100 об/мин при 33°С с аэрацией со скоростью 30 л в минуту. Углеводород, используемый в данном примере, представляет собой Н-парафин удельного веса 0,792 .при 4°С. Содержание Н-нара-фина 99,7% по весу и 0,025% по весу ароматических углеводородов. Выход дрожжевых клеток и содержание в них сырого протеина представлено в таблице 3.

Таблица 3

Пример 4.

Candida rigosa и Trichosporon pullulans как зерновые культуры смешивают в соотношении 100:0, 70:30 и 30:70 соответственно « каждую смесь добавляют к основной культуральной среде так, как и в примере 1. Культивирование нриводят непрерывно в качающемся ферментаторе, содержащем 18 л культуральной среды с перемешиванием со скоростью 1000 об/мин при 33°С и с аэрацией со скоростью 20 л в минуту. Через 68 час определяют степень ассимиляции и содержание сырого протеина в образующихся клетках. Результаты представлены в табл. 4.

Таблица 4

Предмет изобретения

0 Truchosporon cutancum.

5

0 в качестве углеводород-неассимилируюп1их дрожжей используют род Torulopsis в частности вид psendaeria.

5 дрожжей используют род Debaryomyces в частности вид hansenii.

9.Способ по пп. 1-8, отличающийся тем, что концентрацию углеводород в водной питательной среде поддерживают от 0,01 до 1%.