СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СЫВОРОТОЧНОГО ГЕПАТИТА Советский патент 1974 года по МПК G01N33/576 

1

Изобретение относится к медицине.

Известен способ диагностики сывороточного гепатита путем взятия у больного крови из вены, отделения лимфацитов разделения их на 4 пробы к двум, из которых добавляют австралийский антиген, а две другие используют в качестве контроля.

Однако продолжительность установления диагноза указанным способом достигает более пяти суток.

Целью предложенного изобретения являегся упрощение и ускорение способа.

Для этого предлагается в кровь добавлять австралийский антиген и -инкубировать в течение 1,5-2 ч, окрашивать люминесцентным красителем, например акридиновым оранжевым, и выдерживать во влажной среде 15- 60 мин.

Кровь берут из пальца лейкоцитарным меланжером до метки 1 и смешивают в соотношении 2 : 1 с антикоагулЯНтом. В качестве антикоагулянта применяют, например, 3%-ный раствор трилона «Б в физиологическом растворе. Для больного ставят параллельно две пробы - опытную с австралийским антигеном и «онтрольную с физиологическим раствором. Антиген и раствор берут в отноилении к крови 2 : 1.

Обе пробы при температуре 37°С инкубируют в течение двух часов. Затем осторожно

перемешивая кровь, в виде капель переносят на предметные стекла и окрашивают люминесцентным красителем, например акридиновым оранжевым в разведенном виде 1 : 10000 на физиологическом растворе. Предметные стекла помешают во влажную камеру и при комнатной температуре выдерживают от 15 до 50 мин. Окрашенные препараты изучают с помощью

люминесцентного микроскопа. Можно пользоваться и другим микроскопом, но тогда и краситель должен быть другим. Оценку ведут морфологическим путем, т. е. подсчитывают, например, в трех разных местах количество

клеток крови в капле контрольной и опытной проб. Например, подсчитывают 100 клеток нейтрофилов в каждой пробе. Затем смотря г, сколько среди них не поврежденных нейтрофилов и сколько поврежденных.

В препаратах с австралийским антигеном при сывороточном гепатите различают три степени а.тьтерации пейтрофилов: бахромчатость цитоплазмы; клетки из круглых превращаются в вытянутые с разорвайными краями;

клетки разрушаются полностью, на их месте видны лишь «тени или «обломки.

Результаты альтерации выражают в процентах. Процент неспецифических повреждений, обнаруженных в контроле, вычитают из

процента поврежденных клеток в опыте.

Повреждение клеток у здоровых людей не превышает 10% (преимущественно первая степень повреждения), в то время как у больных сыворотным гепатитом лизис доходит до 50-55% и отмечаются все три степени повреждения. Весь анализ для диагноза проводится 3-4 час.

Предмет изобретения Способ диагностики сывороточного гепатита путем обработки крови антикоагулянтом с

последующим добавлением антигена, инкубацией и морфологической оценкой количества поврежденных клеток крови, отличающийс я тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, в кровь добавляют австралийский антиген и инкубируют в течение 1,5-2 ч, окрашивают люминесцентным красителем, например, акридиновым оранжевым и выдерживают во влажной среде 15-60 мин.