Способ определения диссоциации крови и оксигемоглобина Советский патент 1974 года по МПК G01N33/16 

1

Изобрвтбнмв относится к обт,стн медицины.

Известен способ получения кривой диссоцмацн крови« заключающийся в том, чтс задают определенное парциальное давление кислорода в ячейке и определяют насыщение геиоглобнна кислородом, при этом pOj меняют линейно, а информацию с молекулярных свойствах гемоглобина получают по форме сигмовидной кривой насыщения.

Целью изобретения является обеспечение быстрой записи и расчета кривых оксигенации с определением активного выброса кислорода эритроцитами при диагностике гипоксических состояний и анемий, связанных с дефицитом гемоглобина.

Это достигается тем, что линейно изменяют суммарное содержание кислорода в ячейке, линейно изменяют насыщение гемоглобина киС лородом, а инфориацию о молекулярных свойствах гемоглобина получают по сипювидной форме изменения сво

бодного кислорода.

На фиг.1 изображен график совмещения трех повторных записей кривой диссоциации одного раствора оКСигеМОглобина человека (при нелрерывной подаче раствора гидросульфита. 02р - растворенный 02 в ячейке); на фиг. 2 - график полярографической записи кривой диссоциации оКСигемоглобина человека, на фиг.З - график записи киаетики перехода системы гемоглобин - 02

от одного состояния равновесия к другому.

Кривую диссоциации крови и оксигемоглобина получают следующими способами.

Пример I. Раствор оксигемоглобина человека получают путем гемолиза эритроц,лтов, трижды промытых физиологическим раствором (эритроцитарные оболочки удаляют центрифугированием при 70СЮ в течение 30 мин,). Приготовляет раствор, содержащий 4,22б г гемоглобина в 1000 мл физиологического раствора С трис-HCt буфером i(0,005M; pH-7,4l) Т Метгемоглобин восстанавливают в гемоглобиндобаБленкем 2-5 капель раствора гидросульфита натрия, в трис-буфере (рН-7,2), Снимают типичные спектры дезоксигемоглобина и оКСигеМОглобина после насыщения раствора кислородом воздуха в течение 10 мин при непрерывном встряшии в колбе Эрленмй11йЕа (Т ЩГ. ати. давление Титрование в зам1снутой ячейке на 3 мл с вад,ЕТйрованлым электродом, сравиенля, с враща-ющися платиневым эле кгродом и ко-м би-нировандым микроэлйм-ентоы. Титрование растворо м гидрю.сульфита :натрйя (5 вас/ой:Ъ.ем) в Tpiic-HCJt буфере (10 вв:С/объе-м). Раствор гато;вят деред титровал-и,еи баз до-ступа воздуха ш воде, продутой чистым азотом (рН рас-ТВopai 7,42). Растзо-р сульфита пртют в- ячейку аво бюреткой АШ-12 .со скоро з-тъю Г,25 улк/сек-шлярограиша аапиеамы на поллрогра:фе Р-би (три пов торлых запж5.и: ти,1грован1ия ;одно 1Ч) растсвора оксигвмоглойина т.е,м ж-е ра СТ:ВО;р10-М гидросульфита), Дл ительность шждо го ти тровани-я 5,5 ман. Колобан,и.е рН в проце-сре ти-трования 0,01 На фиг.1 по ка.аано совшд-е.нйе. повторно залиСЫ.ва:.иых кр вых д иасоциадии, Пример 2. Зап.и,С:Ь кривой (см,, фиг,2) диссо-циации крови человек (до.нора). 5 мл крови и 2,8 мл рас твора даС (0,9). Условш наезде ния крови кислородом, аппаратура, раствор гидросульфита для титрования те же, что в примере I, Объем ячейки 5 мл.; Т 23ос, .напряжение 0,6; чувствительность. 1/20; усиление А). Раствор гидросульфита подают дискретными порциями по 0,1 мкл через микрометрическое устройство. Длительность титрования 2 мин 40.сек. Пример 3. Запись кинетики перехода системы от одного состояния равновесия к другому. Кровь кролика, (свежевзятая из ушдой веды) разбавле.на 1/2 физиологическим растшром, Т.26:0 С.Стр.€.лкой (см.фиг. 3), отмечено, введение 2 мкл раствора :гидросульф;И:та. Усиление самО:-писца х15 по сравнению с пр1м«ром ... ПРЕДМЕТ .ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ: олределе-ния дис юциаци;И кро:ви и окаиге мо. путем: со 3далия парциального давле-нш к-иолорода и насыщения ге-шгЛобй.на киС л..др,м, отличащййся тем, целью определения активного выбросе кислорода зри троцифами дшгнас тилв гипозсС:Ичес.Ких аостоянйй и анемМ, с-вя.занны.х с дефиц;И:Том ге«огло биш:, лияе;йно и-зменяж насьицание кислородом, а о моле. ;кулйрных свойствах гбшглоййна су,дят ПО С;игмовидно:й фо-рме изменения сво $одно1Ч) кислорода на кривой дисроциадии,.

WOO mjuLfiojiuOip

200 00 600 800 1000 120ff l ffOmfi

Фиг. / 2.fli