Способ получения сывороточного альбумина Советский патент 1976 года по МПК A61K38/38 C07K1/30 A61K38/00 

Осадка II + III. В центрифугате, полученном после отделепия осадка фракции П + П и содержащем 25 об. % спирта, доводят концентрадию «априлата натрия до 0,3%, рН снижают до 4,5. Раствор выдерживают при 20°С в течение 20 мин. Образовавплийся осадок отделяют центрифугированием, который служит для дополнительного извлечения альфа- и бета-глобулинов и альбумина. Осадок растворяют в дистиллированной воде, осветляют фильтрацией, рН доводят до нейтральных значений. Полученный раствор содержит 15% альфа-глобулинов, 25% бетаглобулинов и 60% альбумина. В центрифугате снижают концентрацию водородных ионов до 3,3. После перемешивания в течение 30 мин рП доводят до 4,5, затем отделяют образовавшийся осадок. Процесс проводят нри положительной температуре. Осадок содержит альбумин, бета-глобулины и денатурированные белки. Центрифугат охлаждают до -8°С, оставляют для созревания осадка на 24 ч. Осадок, содержащий нистый альбумин, отделяют центрифугированием. Осадок чистого альбумина растворяют в аиирогенной дистиллированной воде в соотношении 1 :4, лиофильно высушивают. Порошок альбумина растворяют в апирогенной дистиллированной воде до концентрации 20%, рН раствора снижают до 3,3 и выдерживают 30 мин. Затем раствор осветляют фильтрацией при рН 4,5 и среду нейтрализуют до рП 7,0. Полученный раствор содержит им;мунофоретически чистый альбумин, устойчивый « шротреву при 60°С в течение 10 ч с целью инактивации вируса гепатита, причем для стабилизации раствора не требуется дополнительного добавления стабилизирующих веществ. Пример 3. Сырьем служит экстракт плаценты, содержащий 2,5% белка, тканевые белки, гемоглобин до 50% от общего белка, пирогенные субстанции. Процесс ведется аналог,ично примеру 1, за исключением количества (каприловокислого натрия, используемого для фракционирования. Каприлат натрия добавляют до концентрации в растворе 0,2%, что связано с пониженным содержанием белка в исходном материале. Пример 4. Исходное сырье -плазма или сыворотка бычьей крови. К 50 л такой сыворотки добавляют 96%-ный опнрт до его конечной концентрации в растворе 25 об. %. Перед добавлением спирта в сыворотку вводят каприловокислый натрий до концентрации его в растворе 0,3%. После растворения каприлата натрия рП раствора доводят до 3,3. В этих условиях белковую смесь выдерживают при 20°С в течение 40 мин, после чего рН защелачивают до 4,5. Образовавшийся осадок отделяют центрифугированием. После отделения осадка темшературу центрифугата снижают до -8°С и раствор выдерживают в течение 4в ч для образования осадка. Отделенный осадок содержит альбумин и следы глобулинов. Осадок разво1дят аиирогенной дистиллированной водой в соотношении 1 : 4 и подвергают лиофилизации. Сухой порошок альбумина растворяют апирогенной дистиллированной водой до требуемой концентрации. В полученном растворе рН доводят до нейтральных значений, затем смещают концентрацию водородных ионов до 3,3. После 20 мин выдержки рП среды доводят до нейтральных значений. Обработанный таким образом раствор фильтруют для осветления и отделения следов глобулинов, стерилизуют фильтрацией и стерильно разливают по флаконам. Формула изобретения 1.Способ получения сывороточного альбумина из белковых растворов, содержащих альбумин, путем разделения смеси белков этиловььм спиртом, отличающийся тем, что, с целью повышения степени очистки препарата, этиловый спирт добавляют к белковому раствору до концентрации 18-35 об. %, одновременно добавляют соль жирной кислоты, например каприлат натрия, в количестве 0,1-0,6% прн О-30°СирП 2,0-5,0, выпавший осадок отделяют центрифугированием, извлекают альбумин из осадка и центрифугата, концентрируют и отделяют от спирта известными приемами. 2.Способ 1ПО п. 1, отличающийся тем, что, с целью стабилизации целевого продукта, после удаления спирта снижают рН до 3,3 и вновь повышают до 7,0.