Способ приготовления питательной среды для получения бактериального препарата молочнокислых бактерий Советский патент 1975 года по МПК C12B3/00 

В Ka- iecTBe основного ксмпонента среды можно использовать и подсырпую сыворотку, предзарительпо гидролизовав в ней белки. Для этого в сыворотку (без отделения белков) нри рН 6.5-7,0 н темнературе 5357°С добавляют протомезентерин в внде 5%-кого раствора. Подготовка мезентерина, выдержка среды с ним, добавление комнонентов н стернлизацня нроводятся так же, как и в предыдущей среде.

Выработка бактернального нрепарата в условнях лаборатории и цеха биопрепаратов показали активное размножение молочнокислых стрептококков в новой питательной среде. Это подтверждается активным сннжением велнчины рН, хорошей микроскопической картиной, увеличением выхода готового препарата в 1,5-2 раза, получением препарата с более постоянным количеством клеток (360-560 млрд./г против 83---850 млрд./г) и повышенной активности (36-48 Т протнв29- 35°Т) при выдержке препарата в молоке (1 г на 1 л) в течение 2 час при температуре 30°С.

Приготовление питательной среды (расчет на 10 л) осуществляют следующим образом.

300 г сухого обезжиренного молока растворяют в 2 л водопроводной воды с температурой 45°С в течение 30 мин (к конну растворения t воды 42-43°С).

Раствор молока фильтруют и вносят в 8 л водопроводной воды с температурой 57°С. Далее вносят раствор фермента протомезентерина Г10Х, который готовят следующим образом. В навеску фермента 0,7 г (свертывагощая активность 300 тыс. ед) добавляют 15 мл водонроводной воды с температурой 30°С. Перемешивают и выдерживают при этой температуре в термостате 10 мин.

Гидролиз белка длится втечение 1,5 час. Затем вносят следующие компоненты:

Дрожгкевой автолнзат100 мл Натрий лимоннокислый

трехзамещенный100 г

Глюкоза100 г

Марганец сернокислый1,6 г

рН среды доводят до 7,0-7,1. Готовую среду стерилизуют при 1 атм 15 мин.

Порция (0,5-1г) бактериального препарата должна содержать не менее 100-150 млрд. клеток. При получении препарата с содержанием клеток в 1 г свыше 200 млдр. и активности выше 30°Т расфасовка его ведется по 0,5 г, а при 100-200 млрд. и активности 29-30°Т - по 0,7-1 г. За счет этого снижается количество порций полученного препарата.

Предмет изобретения

Способ приготовления нитательной среды

для получения бактериального препарата молочнокислых бактерий, включающий добавление протеолитического ферментного препарата в молочные продукты, например сыворотку, выдержку полученной смеси с последующим добавлением в полученный гидролизат лимоннокислого натрия, дрожжевого автолизата, глюкозы н сернокислого марганца, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса приготовления среды и повышения выхода бактернального препарата, в качестве протеолитического ферментного препарата используют протомезентерин, выдержку смесн осуществляют при 53-57°С в течение 1-2 час, а препарат вводят в виде

5%-ного раствора.