1
Изобретение относится и области гематологии.
Извеотен способ консервирования врови путем добавления к крови ионое рвирующих растворов, содержащих антиноагулянты.
Однако такой способ не обеспечивает длительного хранения дрови.
С целью увеличения срока хранения к ров и, по предложенному способу добавляют также дигидроойсиацетон в количестве 20-100 мМ на I л нрови.
В качестве антикоагулянтов используют раствор антицоагулянта цитрата декстрозы (АЦД) и раствор антикоагулянта цитрата фосфата декстрозы (ЦФД). Антийоагулянт цитрага декстрозы является стерильным раствором лимонной киолоты, цитрата натрия и .декстрозы в воде, пригодной для
инъекции. Лимонная кислота и цитрат натрия обеспечивают ионы цитрата для предотвращения коагуляции крови, а декстроза служит главным источником энергии для красных кровяных клеток. В санкционированных рецептурах А1Щ 1,84 г декстрозы предусматривается на 500 мл цельной крови. Декстрозу в этом растворе рассчитывают на основе моногидрата декстрозы, но декстроз могут добавлять в безводной скорме при использовании 1,68 г безводной декстрозы на 500 мл крови.
Раствор антикоагулянта ЦфДявляется стерильным, пригодным для инъекций водным раствором лимонной . вислоты, цитрата натрия, бифосфата натрия и декстрозы. Лимонная кислота и цитрат натрия обеспечивают ионы цитрата для предотвращения коагуляции. Деиотроза являетоя моногидрагно ее смешивают а количеотве, соотаетсгвующем 1.,79 г на 500 мл крови или 1,63 г, если ее добавляют в виде
и
безводной девотрозЫв
При использовании водных антйкоагулянтных растворов сахара (а именно АЦЦ и ЦФД) для подмешивания н саеЕв.собранной крови врове-антйкоагулянт- ные растворы хранят под охлаждением но без замораживания (при температур 1-6°С). При тавих условиях хранения ярасные кровяные клетки остаются жизнеспособными до 21 дня
Дигидрооксиацетон вводят в раствор антивоагулянта первоначально с целью увеличения или поддержания содержания 2,3-дифосфоглицера5 (ДФГ) в свежесобранной крови в Дигидроовсиацетон не является тойоичньш, он безопасен для вливания Е количествах необходимых для этой, цели
Дигидроовсиацетон можно иопользовать в комбинации с аденином или пируватом (ооль или эфир пировиноградной вислоты) или инозином. Желаемая вомбинация добавок ввлючаег дигидрооксиацетон с аденином и пируватом, или дйгидроойсиацетон о аденйном, инозином и пируватома При таких комбинациях как уровни АТФ, так и уровни 2,3 дифосфоглицерат могут улучшаться в течение 1-21 дня хранения иж может увеличиваться врем хранения от I до 3 недель (|общее время хранения 28-42 дня при .
Для сбора и конаервацйи йрови применяют санкционированные виды контейнеровf стейл.янные или пластмассовые контейнеры,
Раствор антийоагуяяйта внутри контейнера содержит антикоагулирующее вещество для предотвращения коагуляции крови и источник сахарной энергии для красных кровяных влетов Источником сахарной энергий врасных кровяных клегоа является девотрозЗв но могут использовать фруатозу, мак4
нозув галактозу. Количество применявмой декстрозы может быть 1,7-1,9 г на 500 мл крови. Но можно применять дегидрооксиацетон в достаточной концентрации как дополнительный или альтернативный источник энергии для красных кровяных влетов.
Блок сбора и консервации должен содержать 5-10 ммолей дегидрооксиацетона на I л врови. Если вонтейнер объемом на 500 мл крови, то необжоди-МО вводить раствор антивоагулянта не более„ чем 50 мл дегидроовсиацетона Там, где дегидрооксиацетон используется для поддержания 2, обеопечивается источник сахарной энергш, то дегидрооксиацетон применяют в количестве 30 мМ на I л крови.
Но содержание декстрозы или эяБМваленгного сахара в растворе антивоагулянта может снижаться. Поэтому количеотво сахара ограничивается до г моногидрата декстрозы на I л крови, дегйдроовсиацетон вводят в количестве 20-100 мМ на I л нроЕИ.
Дегидрооксиацетон может использоваться в комбинации с инодином, пируватом или аденином Подходящие воличесува этих веществ приведены в таблице
Могут использоваться другие источники ионов пиррата Примером является пирриновая (пйровиноградная) кислота. рН растворов аитйкоагулянта может быть около 5 для АЦД и для ЦФДг Однако для более широкого интервала может применяться рН например,
до 9 (особенно выше 7). Дегидроокоиацетон добавляют к свежей вроЕИ немедленно после сбора свежей крови.
Одновременно с отбором крови и немедленно после введения ее в контейнер с ней смешивают от 5 до 50 мМ дегидроонсиацетона на I л врови.
Дегидроонсмацетон должен быть растворен Б стерильном растворе, таком как стерильная вода или водный раствор антиноагудянта, содержащий декстрозу или другие ингредиенты. Смесь крови с дегидрооксиацетоном затем хранят при температуре ниже 10°С, а именно от I до 6°С, она может храниться в течение 21 дня,
В конце этого периода времени кровь будет содержать значительно больше 2,3-ДФГ, чем кровь, сохраняемая при тех же условиях, но без дегидрооксиацетона. Кровь может храниться дольше 21 дня, причем она будет лучше по качеству в отношении содержания 2,3-Д.фГ, чем кровь, сохраняемая стандартным способом (применение антикоагулянтных цитрат - декстрозовых растЕоров или антикоагулянтных цитрат-фосфат-декстрозовых растворов).
Пример I. Безводную лимонную кислоту (7,3 г), дигидрат цитрата натрия (22,0 г), моногидрат декстрозы (24,5 г) и дигидрооксиацетон (12,0 г) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл), раствор доводят водой до I л и фильтрзшт через фильтр с размером пор 0,8 мМ. Раствор в полости или сосуде для крови в отношении 75 мл раствора на 500 мл крови, подлежащей сбору, стерилизуют в автоклаве при 116°С в течение 20 мин.
Пример 2. Дигидрат цитрата натрия (31,0 г), моногидрат бифосфата натрия (0,041 г), гептагидрат двуосновного фосфата натрия (0,344 г), моногидрат декстрозы (25,5г;) и дигидроокоиацетон (12,9 г) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл) и
6
раствор доводят водой до I л и стерилизуют фильтрацией через фильтр с размерами 0,22 мкм. Применяя асептические методы, раствор помещают в стерильную полость или сосуд для крови (причем 70 мл раствора добавляли на каждые 500 мл крови, подлежащей сбору),
Пример 3. Используют те же приемы, что в примерах I и 2, но и водному раствору добавляют 51,8 г аденина.
Пример 4. Используют те же приемы, что в примерах 1-3, но и водному раствору добавляют 9 г пирувата натрия.
Пример 5. Используют те же приемы, что в примерах 1-4, но к раствору добавляют дополнительно 22,1 г дигидрооксиацетона, а декстрозу не добавляют.
Пример 6. Используя приемы, описанные выше, дигидроацетон можно вводить в другие антикоагулянты.
АЦД или ЦфД-аденин.
Использование АЦД и аденином может продлить время хранения до 35-42 дней, исходя из выживания эритроцитов i/г , но при этом уровни ДФГ слегка уменьшаются по сравнению с АЦД и ШРД. Обычный уровень аденина равняется 0,5 мМ на литр крови.
АЦЦ (или UfPJJ) рН 6-8 с аденином или без него. Сохранение рН выше 6 или 7 (щелочной рН 7-9) способствует поддержанию ДФГ. Уровень АТФ падает в течение первой недели (или двух недель) хранения.
Добавка пирувата помогает предотвратить падение АТФ. Обычным уровнем пирувата является 0,1 мм на литр крови, это поддерживает уровень ДФГ на три недели.
Инозин поддерживает уровни ДФГ примерно на 4 недели. Концентрация инозина равняется 10-15 мМ на I л крови. Инозин при более низком уровне 1 может также добавляться к крови после
2-3 недель хранения. Аденин может добавляться в начале хранения.
Инозин и пируват, действуя совместно, поддеркивают ДФГ уровни на 5 недель.
Пример 7. ЦФД-аденин-аскорбат-дигидрооксиацетон.
Дигидрат цитрата натрия (30,8 г), безводная декстроза (23,2 г), дигидроонсиацетон (14,7 г), аденин (0,55 г), аскорбиновая кислота (8,1 г) и моногидрат бифосфата натрия (2,22 г) растворяют в пригодной для инъеиций воде (800 мл) и ра створ доводят водой до I л, его стерилизуют фильтравдей через стерильный фильтр (0,22 мкм). Используя асептические методы, 70 мл раствора помещают в стерильные полости для сбора 500 мл крови. Полости упаковывают в металжческие банки под азотом. Рецептуры для стерилизации нагревом без разрушения аскорбата и дигидрооксиацетона разделяют на две части, которые устойчивы к авток яаву. Перед вытягиванием крови две части вновь соединяют, используя пластмассовые полости, соединяемые пластмассовыми трубочками. Одна из этих полостей находится в ведущей трубке линии емкостью 15 мл. Другая является полостью для сбора крови емкостью 500 мл.
%
Дигидрат цитрата натрия (38,3 г), аденин (0,68 г), аскорбиновая кислота (11,1 г) и моногидрат бифосфата натрия (2,76 г) растворяют в пригодной для инъекций воде (800 мл) и раствор доводят водой до I л; 56,4 мл помещают в полость для крови емкостью 500 мл.
Раствор для наполнения 15 мл ведущей трубки приготавливают путем растворения безводной декстрозы (105,6 г) и дигидрооксиацетона (0,69 г) в пригодной для инъекций воде (800 мл); раствор доводят водой до 1-л;рН 3,8-4,2. 15,4 мл помещают в полость и выдерживают в автоклаве 20 мин при 116°С, затем охлаждают в воде и помещают в металлическую банку под азотом.
Комбинация аскорбиновой кислоты и дигидрооксиацетона повышает или поддерживает содержание 2,3-ДГФ красных кровяных клеток до удовлетворительной степени.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ консервирования крови путем i добавления к крови консервирующего раствора, отличающийся тем, что, с целью увеличения срока хранения крови, добавляют также дигидрооксиацетон в количестве 20-100 мМ на литр кроЕИ.
