Способ получения N-(3-алкиламинопропил)-N-фенилмочевины или их фармакологическиприемлемых солей Советский патент 1988 года по МПК C07C275/28 A61K31/17 A61P9/06 

OJ

Изобретение относится к способу получения новых К-(3-алкиламинопро- пил)-Ы -фенилмочевины общей формулы

I-NH-CO-NH-CHj-CH.j-CH2-NHX, (I) 5

где Y - 2,6-диметилфенил, 5-хлор-2- метилфенил-, 5-бром-2-метил- фенил; X - н-пропил, изопропил, 10

или их фармакологически приемлемых

солей.

Указанные соединения обладают макологической активностью и могут

вакуумом. Остаток растворяют в ди- хлорметане и взбалтывают с насьпцен- ным раствором карбоната натрия и с водой. Дихлорметановый раствор экстрагируют 200 мл 20%-ной соляной кислоты. Кислотный экстракт охлаждают и подщелачивают при помощи 50%-кого раствора гидроокиси натрия. Смесь экстрагируют дихлорметаном. После сушки над сульфатом магния дихлорметан удаляют при помощи вакуума, получая (изопропиламино)- пропил -N -(5-бром-2-метилфенил)

быть использованы в медицинской прак- мочевину. Остаток растворяют в этавакуумом. Остаток растворяют в ди- хлорметане и взбалтывают с насьпцен- ным раствором карбоната натрия и с водой. Дихлорметановый раствор экстрагируют 200 мл 20%-ной соляной кислоты. Кислотный экстракт охлаждают и подщелачивают при помощи 50%-кого раствора гидроокиси натрия. Смесь экстрагируют дихлорметаном. После сушки над сульфатом магния дихлорметан удаляют при помощи вакуума, получая (изопропиламино)- пропил -N -(5-бром-2-метилфенил)

Изобретение касается производных фенилмочевины, в частности N- -(3-алкш1аминопропил)-К-фенилмоче- вины общей формулы I Y-NH-C(O)- -NH-(CH,,)jNHX, где Y - 2,6-диметйлфенил, 5-хлор (или бром)-2-метклфе- нил; X н-пропил, изопропил, или их фармакологически приемлемых солей, которые, как обладающие антиаритмической активностью, могут быть использованы в медицине. Для выявления физиологической активности получены производные фенилмочевины I ре- акцией соответствующего галогенза- мещенного фенилмочевины с амином. Процесс ведут в среде органического растворителя при кипении реакционной смеси. Целевой продукт выделяют в виде основания или соли. Вещества I кристаллические, имеют т. пл., (при значениях Y и X): 180-200 С (5-бром- -2-метилфенил; изопропил); 51-154°С

тике.

Целью изобретения является разработка способа получения производных фенилмочевины, которые обладают более высокой активностью по сравнению с соединениями, близкими по структуре к предлагаемым.

Пример 1. (изопропил- амино)пропил -N -(5-б ром-2-метил- фенил)-мочевина. .

Раствор 16,5 г 5-бром-2-метил- анилина и 100 мл этил-ацетата добавляют при перемешивании к раствору 20 г фосгена и 300 мл этилацетата при , После того как добавление завершено, фосген пропускают через смесь, нагреваемую в течение 1/2 ч. Реакционную смесь продувают азотом, затем растворитель отгоняют под вакуумом с получением 17 г 5 бром-2- метилфенилизоцианата. Этот материал растворяют в 150 un хлороформа и добавляют осторожно к раствору 18,2 3-хлорпропиламингидрохлорида, 1,50 мл хлороформа и.20 мл триэтиламина. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1/2 ч, затем охлаждают и взбалтывают с водой. Выпавшее в осадок твердое вещество отделяют фильтрацией. После перекрис- . таллизации из этилацетата получают N-ГЗ-(хлорпропиламино)пропил -N - -(5-бром-2-метилфенил) мочевину, т. пл. 145-148°С. ,

Вычислено,%: С 43,23; Н 4,62; N 9,16,

C Hf BrClNjO

Найдено,%: С 43,06; Н 4,55; N 9,26.

15 г вышеуказанного материала соединяют с 250 мл хлороформа и . 50 мл изопропиламина, затем кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч. Раствор упаривают досуха под

ноле и насыщают хлористым водородом. itacTBOp упаривают досуха в вакууме. Остаток кристаллизуют путем растирания с горячим этилацетатом. Твердое -вещество перекристаллизовывают из смеси этанол-эфира с получением (изопропиламино)пропил -N - -(5-бром-2-метилфенил) мочевины гидрохлорида, т. пл. 180-182 С (выход 5 г) .

Вычислено,%: С 46,10; Н 6,35;. N 11,52.

О, НС1

Найдено,%: С 46,11; Н 6,10;

N 11,18.

Пример 2. (изопропул- амино)пропил -N - (2,6-ди 1етилфенил) мочевина.

Триэтиламин (56 г, 0,55 моль) добавляют к перемешиваемой суспензии 65 г (0,50моль)3-хлорпропиламингидрохлорида. и 350 мл хлороформа.Полученный раствор охлаждают в бане с льдом, при этом осторожно порциями добавляют 73,6 г (0,50 моль) 2,6- диметилфенилизоцианата, После того как добавление закончено, раствор кипятят с обратным холодильником в

течение 20 мин. Раствор охлаждают до 15-20°С и добавляют 148 г (2,5 моль) изопропиламина. Раствор кипятят р течение 20 ч,с обратным холодильником. Растворитель и избы-

ток изопропиламина удаляют под ваку- умом. Остаток растворяют в дихлор- метане и экстрагируют 200 мл 15%-но- го раствора гидроокиси натрия. Дихлорметановый раствор отделяют и

экстрагируют дважды 250 мл воды. Пор- цию дихлорметана затем экстрагир уют общим количеством 500 мл раствора соляной кислоты (100 мл концентрированной НС1 и 400 мл воды), Кислотный

-

экстракт охлаждают и подщелачивают при помопщ 50%-ного раствора гидроокиси натрия. Смесь экстрагируют 350 мл дихлорметана, Дихлорметано- вый раствор промывают водой, затем сушат над сульфатом магния. Растворитель удаляют под -вакуумом с получением 128 г воскообразного твердого вещества - (1-метилэтилами- но)пропил -N -(2,6-диметилфенил) мочевины, т. пл. 104 -106°С, ее растворяют в 200 Мл этанола, добавляют 95 г (0,50 моль) моногидрата п-толу олсульфокислоты и нагревают с получением растворов. Растворитель упаривают под вакуумом. Остаток вновь растворяют в этаноле и опять упари вают досуха. Твердый остаток суспедируют в холодном этаноле и отделяют фильтрацией. Твердое вещество пе рекристаллизовывают из этанола с получением 144 г (66,1%) 4-метилбен- золсульфоната (l-мeтилэтшl- aминo.)пpoпилJ-N - (2,6-ди метилфе- нил) мочевины, т, пл. 152-154°С, Вычислено, %: С 60,66; Н 7,64;

N 9,63; S 7,36,

.NjO C.H.SOjH (435,57)

Найдено, %: С 60,61; Н 7,67; N 9,69; S 7,67,

Пример 3, (изопропил- амино)пропил -N -(5-хлор-2-метилфе- нил) мочевина.

Смешивают 180 г Ы-ГЗ-(хлорпропил амино)пропил}-N -(5-хлор-2-метилфе- нил) мочевины с 30 г изопропиламина в 1 л ацетонитрила, Эту смесь нагревают с рефлюксом в течение 18ч, Полученный раствор вьшаривают досуха в вакууме и остаток встряхивают в смеси метиленхлорида и воды, Мети ленхлоридный слой отделяют и выпаривают досуха в вакууме, получают 100 г смолистого твердого остатка. Остаток растворяют в этаноле, раствор насыщают хлористым водородом и затем выпаривают досуха в вакууме, получают вязкий остаток, который растворяют с эфиром, разделяют, расворяют в воде и подщелачивают гидро сидом аммония. Твердое вещество эк- .страгируют мётиленхлбридом, сушат над сульфатом магния и выпаривают досуха. Получают 80 г (H3onpo- пиламино) пропилЗ-К -(5-хлор-2-ме- тилфенил) мочевины в виде смолистого твердого вещества.

Мочевину растворяют в этаноле и насыщают хлористым водородом. Смесь вьшаривают досуха, остаток растира- f. ют с эфиром и фильтруют. Оставшееся твердое вещество перек1)11сталлизовы- вают из смеси этанол - эфир в присутствии активированного древесного угля,. получают 60 г (выход 35%)

10 хлористоводородной К-ГЗ-(изопропил- амино) пропил -N -(5-хлор-2-метил- фенил) мочевины, т. пл, 177-180°С.

Пример 4. Подавление аритмии при помощи соединений формулы I.

15 Собакам обоих полов внутривенно вводят пентабарбитал натрия для анестезии в количестве 35 мг/кг. Применяют искусственное дыхание положительного давления с комнатным воз20 духом. Кровяное давление записывают из бедренной артерии при помощи датчика давления -и осциллографа,

А. Подавление фибрилляцией желудочка, стимулированных электричест25 вом (фибрилляторный порог, мера действия).

Фибрилляторным порогом является i напряжение, при котором получают фибрилляцию желудочка за счет внеш30 них электрических импульсов, подава- на левый желудочек во время реполяризационной фазы миокарда, В этом испытании противоаритмичес- кую активность соединения оценивают по его способности увеличивать фиб- рилляторный порог у анестезированных собак.

Фибрилляцию желудочка получают у анестезированных собак за счет

Q стимуляции левого желудочкового эпикарда в течение 5 с с продолжительностью импульсов 3 мс при частоте 60 Гц. Стимуляцию получают за счет биполярных электродов, отстоящих

g друг от друга на 3,5 мм, которые помещены в пластиковый кожух размером 7 X 12 мм, прикрепленный к эпикарду. Цель раздражителей передается посредством R-волны электрокардиgQ ограмгФ 1 с увеличивающейся интенсивностью (вольт) с интервалами в 1 мин до тех пор, пока не произойдет фибрилляция. Животное дефибриллируют посредством контртока постоянным тоgg ком, последовательность повторяют через 10 мин. Испытуемое лекарство вводят внутривенно через 5-10 мин. Фибрилляционный порог определяют перед инъекцией и через 10 мин после

35

инъекции каждой дозы лекарства. Увеличение порога менее чем на 0,75 В считают неактивным, на 0,75 - 0,99 В граничной линией, на 1,0-1,24 В- слабым, на 1,25,- 1,99 В - умеренным, на 2,0 В или более - значительным.

При испытании в соответствии с методикой, указанной выше, соединение, описанное в примере 1, дает умеренное или значительное увеличени порога фибрилляции при дозе 10- 20 мг/кг. .

Соединения испытаны в виде аддитивной соли кислоты. Особых различий в активности порога фибрилляции между тс1зилатами и гидрохлоридами соединения примера 2 замечено не бьшо. Значения увеличения (i стандартные отклонения) порога фибрилляций при дозах 10 и 20 мг/кг приведены в табл. 1.

Таблица 1

Б. Подавление желудочковой сердечной аритмии, вызванной строфантином.

Внутривенное введение строфанти- на приводит к аритмии желудочка. Противоаритмическую активность соединения определяют по его способности восстанавливать нормальный сердечный ритм у собак, обработанных строфантином и анастезированных пентабарбиталом. Строфантин вводят внутривенно анестизированньм собакам при начальной дозе 50 мкг/кг, и затем дозы увеличивают до тех пор, пока не будет вызвана аритмия желудочка (учащенные удары желудочка ил желудочковая тахикардия), Обычно достаточно общей дозы 55-60 мкг/кг, чтобы вызвать аритмию. Затем вводят испытуемое соединение внутривенно через 3-3 мин. Спустя 20 мин после введения строфантина наблюдают влия

ние на аритмию. Введение лекарства прекращают, когда наблюдают возвращение к нормальному сердечному ритму. У собак, которым не вводят испытуемое соединение, аритмия продолжается более 45 мин.

При испытаниях, проведенных, как указано выше, соединения примеров i-3 дают следующие результаты (см. табл. 2).

Т а б л и ц .а

,

6,8 Восстановление нормального ритма

7,5 Соединительный ритм (улучшение)

7,5±1,7 Восстановление нормального ритма

6,8+1,1 То же

6,8± 1, 1 Соединительный ритм

10,0 Восстановление нормального ритма

Тозильная соль. Хлористоводородная соль. 10 мг/кг ОиЪа1п-индицированная аритмия.

С. Подавление аритмии желудочка, вызванной коронарной лигатурой (наожение лигатуры на вену).

Лигатура левой передней нисходящей коронарной артерии в две стадии в течение 20 мин приводит к сильной аритмии желудочка, которая начинает через 5-7 ч и длится примерно 48 ч. На третий день аритмия

вдруг прекращается и возвращается нормальный ритм. Особенно сильна аритмия в пе рвые 24 ч после наложения лигатуры. В этом опыте активность против аритмии испытуемого

соединения оценивается его способностью восстанавливать нормальный сердечный ритм у коронарно легированных собак. На левую переднюю нисхо- дящую коронарную артерию анестезированной собаки накладывают лигатуру в две стадии на уровне атриального отростка. Животное отходит от анестезии. Испытуемое соединение вводят собаке, которая в сознании, внутривенно или орально (через желудочную трубу) через 18-24 ч после наложения лигатуры. Испытуемое соединение вводят до тех.пор, пока не наступит восстановление нормального сердечного ритма, или до тех пор, пока не введена заданная доза. При внутривенном введении при дозе 20 мг/кг примерно через 24 ч после наложения лигатуры в соответствии с методикой, описанной выше, соединение примера 1 - (1-изопропил- амино)пропилЗ-N -(5-бром-2-метилфе- нил) мочевина восстанавливает нормальный сердечный ритм у двух собак из двух.

При оральном введении соединения примера 1 при дозе 50 мг/кг через 48 ч после наложения лигатуры получают нормальный сердечный ритм у одной собаки, над которой проводили опыт. Эта доза вызвала плохое состояние собаки.

При введении in vivo примерно через 24 ч после наложения лигатуры в соответствии с методикой, описанной выше, соединение примера 2 - (1-изопропиламино)пропил -N - -(2,6-диметилфенил) мочевина в виде тозилата или гидрохлорида, восстанавливает сердечный ритм полностью у шести собак из шести, находящихся в сознании при дозе 15-20 мг/к Двум животным вводят соединение дополнительно, так что общая доза больше 40 мг/кг. Хотя животное ока- залось слабее, смертных случаев не наблюдалось.

i При испытании в соответствии с методикой, указанной выше, при оральном введении примерно через 24 ч после наложения лигатуры соединение примера 2 N-t2-(изoпpoпилaминo)пpo- -(2,6-диметилфенил) мочевина восстанавливает сердечный ритм при дозах 40-50 МГ/КГ у восьми из десяти собак. Хотя у нескольких животных возникла временная слабость, ни у од

0

ной из восьми собак не наблюдалось серьезных или длительных побочных зффектов. При дозе 35 мг/кг у двух из трех животных восстановлена высокая степень (85-100%) нормпльного сердечного ритма без каких-либо побочных эффектов. При оральном пае- дении соединения примера 2 в виде гидрохлорида при единичной дозе 50 мг/кг восстанавливается сердечный ритм, но соединение дает общую слабость. Две из восьми собак умерли. Три из трех собак умерли при

5 единичной дозе 75 мг/кг. Однако при оральном введении соединения примера 2 в виде гидрохлорида отдельными дозами через два часа, которые вместе составили 50 мг/кг, восстанавли0 вается нормальный сердечный ритм без неблагоприятных зффектов. У одной собаки наблюдается неустановившееся улучшение и легкое (короткое) восстановление нормального сердечно5 го ритма при начальной дозе 35 мг/кг и длительное восстановление нормального сердечного рит ма после введения дополнительной дозы 15 мг/кг. У второй собаки и при начальной дозе 25 мг/кг получают небольшое улучшение, но при дополнительной дозе 25 мг/кг получают продолжительное восстановление нормального сердечного ритма.

При испытании в соответствии с методикой, описанной выше, при оральном введении примерно через 48 ч после наложения лигатуры соединения примера 2 в виде тозилйта или гидроQ хлорида наблюдают восстановление нормального сердечного ритма у четырех из пяти собак при дозе 15 мг/kr. При этой дозе наблюдают значительное улучшение у одной собаки. Когда соединение примера 2 вводят в форме или тозилата, или гидрохлорида при дозе 25 мг/кг, наблюдают восстановление нормального сер- дечного ритма у шести собак из семи. Значительное улучшение наблюдается у одной из собак при этой дозе, восстановление нормального сердечного ритма наблюдается у животного после введения дополнительной дозы 15мг/кг Соответствующая (1-н-пропил- амино)пропил7-N (2,6-диметилфенил) мочевина восстанавливает нормальный сердечнь Й ритм у двух собак при дозе 10 мг/кг.

5

5

0

5

Соединение примера 3 - М-ГЗ-(1- изопропиламино)пропил -N -(5 -хлор -2-метилфенил) мочевина восставав ливает нормальный сердечный ритм у четырех собак из четырех при дозе 8-20 мг/кг (in vivo).

При оральном введении соединения примера 3 в виде тозилата в количестве 50 мг/кг наблюдают менее чем 50% нормального сердечного ритма.. Хлористоводородная соль, введенная орально при той же дозе, дает нормальный сердечньш ритм у шести собак из шести, и у пяти собак из шести этот эффект продлевается до 4 - 6,5 ч. При оральном введении соединения примера 3 при дозе 25 мг/ получают нормальный сердечный ритм у двух собак из трех и значительное улучшение преоб.падаю1цего нормального ритма у третьей собаки.

Пример 5. Соединения -(изопропиламино)пропил -N -(5-6pOM -2-метилфенил) мочевину .и Ы-СЗ-(изо пропиламино)пропилJ-N -(5-хлор-2-ме тилфенилмочевину сравнивают с - (изопропиламино) пропил -N - (2-хлор -6-метийфенил)мочевиной (соединение подпадает под структурную формулу соединений, описанных в патенте Англии № 778687) по их способности увеличивать фибрилляторный порог сердца собаки. Как описано в примере 4, суш,ествует стандартная методика испытания, которая используется в йер дечно-сосудистой фармакологии, для того, чтобы определить полезность- соединения при лекарственной терапии против аритмии. Результаты испы тания обобщены в табл. 3.

Результаты свидетельствуют о -значительном увеличении активности обоих предлагаемых соединений по сравнению с известным соединением, которое считается неактивным при уровне дозировки 10 мг/кг. 5-Хлор-2-метилфенилмочевину легко получают, заменяя 5-бром-2-метиланилин в примере на 5-хлор-2-метилфёнилмочевину.

Таблица 3

0,75 3,3±0,4

10 Продолжение табл. 3

l,7tO,9 6,,7

NГЗ-(изoпpoпил- амино)пропил - -Ы--(5-хлор-2- метилфенил) мочевина

3,5fO,8 8,8±0,5

Аналогично соединения (н- пропиламино)пропил -N -(2,6-диметил- фенил) мочевину и (изопропилaминo)пpoпил -N (2,6-диметилфенил) мочевину сравнивают с (диизопро- пиламико)пропил -N -(2,6-диметилфенил) мочевиной (соединение подпадает под структурную формулу соединений,, описанных в патенте США № 2762842, но не получено и не охарактеризовано) по их способности увеличивать фибрил яторный порог сердца собаки. Эти результаты обобщены в табл. 4. Известное диизопропильное соединение показывает увеличение фибриллятор- ного порога, сравниваемое с показателем для предлагаемых изопропиль- ных и н-пропильных соединений. Одна- ко у собак, которым вводят известное соединение, наблюдается атриально- желудочковое (.АЖ) блокирование причем одна из трех испытуемых собак умерла.при введении низшей дозы 10 мг/кг от такого.блокирования сердечной АЖ-проводимости. Это блокирование проявилось при электрокардиографической записи сердца испытуемых .собак. Однако у собак, которым вводят предлагаемые соединения, не наблюдается подобное блокирование. Таким образом, предлагаемые соединения приводят к большому увеличению порога фибрилляции и не обладают

вредным воздействием на проводимость, как это наблюдается для известного .соединения - (диизопропилами- но)пропилJ-N -(2,6-диметнлфенил) мочевины.

11136785512

н.Пропиламинопропилмочевина мо- пропиламина в примере 3 на н-про- жет быть получена путем замены изо- пиламин.

Таблица 4

Диизопропил сравнительное

Моно-н-пропил

Моноизопропил

1,75+0,3 4,111,1 Для первой собаки () () наблюдается АЖ-блокирование и смерть при 10 мг/кг, для 2-й и 3-й собак также наблюдается АЖ-блокирова ние

3,4±1,0 - Отсутствует АЖ-блокирование

2,0±0,3 3,110,3 Отсутствует АЖ-блоки- () () рование

Примечание: п- количество испытуемых собак.

Антиаритмическая эффективность К-моно- и диизопропиламино-пропил- -N -2,6-диметилфенилмочевин оцене- та также для ОиаЪа1п-индуцированной аритмии. Эта процедура позволяет произвести оценку антиаритмической активности для аномальных сердец (см, пример 4В). Кроме того, вслед- етвие природы воздействия Ouabain на атриовентикулярную проводимость это испытание показывает также способность лекарства вызывать полную блокаду атриовентикулярной проводимости (АВ-блокада), тяжелое побочное явление, которое может ограничить клиническую . полезность соединения. Предлагаемое соединение (пример 2) восстанавливает нормальный синусовьш всех собак, отравленных Ouabain, при средней доз 7,1+1,1 кг/кг. Ни у одной собаки (11 собак) ,не было АВ-блокады.

При испытании известного диизо- пропилового аналога N-tЗ-(диизo- пропиламино)пропил -N -(2,6-диметил- фенил) мочевины против Ouabain индуцированной аритмии оказалось, что одна собака получила полную АВ-бло- каду и умерла при дозе 5 мг/кг, другая собака реагировала благоприятно.

Следовательно, способность вызывать опасную АВ-блокаду при терапевтических дозах препятствует клини- . ческому применению N-диалкиламино- пропилзамещенных аналогов, в то время как N-моноалкиламинопропилсоединения не проявляют таких опасных тенденций. Преимущество предлагаемых соединений по сравнению с известным является неочевидным.

Результаты Ouabain-индуцированной аритмии представлены в табл. 5.

SR - нормальный синусовый ритм

Ф.о.рмула изобретения

, Способ -йолучёйня N-СЗ- алкиламиир .- пропиЛ)-Ы фенилмочёвины общей фОр, мулы . . .

YNH-CO-NH-CHJ-CH -CHj-NHX,

где Y - 2,6-диметилфенил-, 5-бром- -2-метил-фенил- или 5-хлор- -2-метилфенилрадикал; X - н-пропил-, изопропилрадикал,

или их фармакологическиприемлемых

солей, отличающийся тем,

что соединение формулы ;

0-NHC-:NH-CH2-CH2-CH -W

о

Y имеет указанные значения; W - галоген,

подвергают взаимодействию с амином общей формулы

,

где X имеет указанные значения, в органическом растворителе при тем- пературе кипения с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде фармакологически приемлемых солей.

35

Приоритет по признакам:

03,07.78 при Y - 2,б-диметилфе- НИЛ-, 5-хлор-2-метилфенилрадикал, X - н-пропил-, изопропилрадикал; .„ 21,05.79 при Y - 5-бром-2-метил- .,фенил, X - н-пропил-, изопропилрадикал.