Способ получения производных линкомицин-2-фосфата Советский патент 1976 года по МПК C07H15/16 C07F9/08 

Z - водород, метил, этил, изопропил, трет -бутип-З.-тетраметилен, фенил, меток си-, этокси- , пропокси-, изопропЬкси-, цианогруппа, метилкарбонил-, этоксикарбо- НИЛ-, оксикарбонил-, карбоксигруппа, триметилсилил, триэтилсилил, триметилсилиллю тилен, триметилстаинил, триэтилстаннил, ос таток мьшшяковнстой или фосфористой кислоты, триметилгерманий, триэтилгерманий ацетамино-, триметиламино-, нитро-, н-бу- ТОКСИ-, н- пентокси-, феноксн-, ацетоксиОКСИ-, метилтио-, этилтио-, изопропилтиомеркапто-, ацетилтио-, циантио-, дкметклТИО-, сульфамидо, метилокситио-.сульфо-, аэо-, метилсульфонилгруппа, -метилселенил, атомы галогена, остаток йодистой кислот1г1, сернистой кислоты, X - хлор, бром или тритилоксирадикал общей формулы -О-Ш : где. Х , Х, X 2 - водород, атом га,логена, метоксигруппа, подвергают фосфорилированию путем об работки известным фосфорилирующим areHT например хлор окисью фосфора или трифенил фосфином, в присутствии третичного амина, например пиридина. Полученньй при этом щэодукт подвергают кислотному гидролизу водой.. .... .Продукты вьзделяют известным способом Используемый в качестве исходного продукта лйнкомицин метия- 6,8- дидез- окси-6 - (транс-1 - метил 4-пропил -1,2« пирролидинкарбокеамидо) - 1-тио- D -эритро-ctD -галактошстопиранозид3 и его изомеры получают согласно патенту США № ЗО86912. Эти соединения можно перевести из изомерной формы эритро в форму трео и наоборот. Исходньхй лийкомицшг можно также полу чить ациларованием соединения общей фор- : ,:.;: VCH, . -: соответствующим адалвруюшим агентом известным способом, применяемым; для аци л ИР овання Сахаров. Реакцию обычно ведут в среде органического растворителя при температуре от 10 С до те шературы кипе кия реакпнонной смеси. Эти соединения можно перевести в 7- галоид-7-дезоксн-пнологи путем обработки первых тионилхлоридом или реактивом Ридона при нагревании. При этом замена оксигрутшы атомом-хлора приводит к изменению конфигурации. Использование 7-эритроизомер- 7-окс11соединения приводит к получению треойзомера 7-хлор- . соединения. Реактив Гидана получают присоединением галоида к трифенилфосфину или трифенилфосфиту. Поскольку полученный биосинтезом лин- комицин, а также получение. из него аминосахара представляют собой метил- или этилтиогликозиды, иногда требуется превратить их в высшие или низшие гликозиды. Это можно осуществить реакцией соответст-. вую.щего соединения с меркаптаном фор.мулы К, &Н, где алкильная группа не более чем с 20 углеродными атомами, но отличная рт TJ , и получают дитиоацетали. Полученные соединения можно подвергать гидрогенолизу с последующим ацилированием. При вьтолнении предлагаемого способ лйнкомицин или аго аналоги, (лучще в виде гидрохлорида) сначала конденсируют с ароматическим, альдегидом при слабом, нагревании с получением 4,3-0-арилиденлин.комицина. Если применяют гкарохлорид лин комидина, то не нужен кислотный катализатор, так как сам гидрохлорид обеспечивает достаточный катализ реакции. Реакцию смещают в нужнюю сторону путем азе- отропоного удаления- воды органическим растворителем, например бензолом, толуолом, хлороформом, дихлорэтаном. Необходимсють в азеотропном растворителе отпадает, если можно удалять воду другим способом, например с помощью вакуума или выпаривани:ем инертным газом или njjocTO совместительной отгонкой с растворителем с более высокой температурой кипения, чем у водьи Азеотропный растворитель применяется в смеси с вьгсокополярньв,-г растворителем, например -N, N -диметилформамидом, -N, N диметилацетамидом, диметилсульфоксидом, N -метилпирроллидоном, чтобы увеличить растворимость гидрохлорида линкомицина и получить гомогенный раствор. Реакцию конденсации можно вести при 7О-18О, лучще при 9О-11О°С. Оптималь:ная температура зависит от соотношения полярного и неполярного растворителей и от свойства неполярного растворителя,например температуры кипения азеотропа с , ;водой, а также температуры кипения само- Го неполярного растворителя. Неполярный растворитель, содержащий влагу, можио непрерывно отводить перегонкой и заменять

его периодически свежим сухим растворителем. Воздух можно также удалять конденсацией и отделением лову1икойдляБОДЫ или осушителем с возвратом сухого растворителя в реактор.

Время реакции конденсации гидрохлорида линкомицила с ароматическим альдегидом меняется в зависимости от состава растворителя и эффективности удаления воды. При использовании азеотропообразую- щих растворителей за ходом реакции мож- но проследить измерением количества выделяющейся воды. Можно также периодически отбирать пробу из реактора и хроматографировать ее. В случае комбинации бензола и диметилформамида время реакции может составля1ь 1-16 ч, оптимальное время 2-3 ч. Если применяют безводный гидро- хлорид линкомицина, то время реакции со- кращается наполовину, поскольку вьщеляет- 20 ся только половина воды по сравнению с моногидратом гидрохлорида линког йщина. Согласно изобретению можно применять различные ароматические альдегиды, например фурфурол, 5-метилфурфурол, бензаль- 25 дегид, салициловый альдеги,ц, м- толуолальдегид, о- толуолальдегид, п- толуолальдегид, О- хлорбензальдегид, м- хлорбензальдегид, м- бромбензальдегид, п- бромбензальдегид, п- метоксибензальдегид, м-метоксибензаль- 30 дегид, о-метокси.бензальдегид, 3,4-димет- оксибензальдегид (альдегид вератровой кис« лоты), салициловый алр дегид, п-оксибензальдегид, 3,4,5-триметоксибензальдегид, пиперонал, о-нитробензальдегид, п-хлорбенз- 85 альдегид, фталевый альдегид, м-нитробенз альдегид, п-нитробензальдегид, i -нафталь дегид, п-бромбензальдегид, о-бромбэнзаль- дегид, 2,4-дихлорбензальдегид, ванилин, метальдегид, терефталевый альдегид, коричный альдегид. Пригодны те альдегкцы, у которых карбонильная группа отделена от ароматической части одной или более двойными свя- зями, образующими сопряженную структуру 45 формулы (СН«СН) где Z и П имеют значения, обозначенные в формуле I. Полученные указанным способом ацета- ли сначала вьщеляют в виде кристалличес- ких п-шрохлоридов. В случае стойких ацета- 55 пей, например 3,4- бензиллинкомицина или 3,4- хлорбензилиденлинкэмицина, перекристаллизадию можно вести в горячем метилцеллозольве, диметилформамиде, хлороформе и т. п. Менее стойкие ацетили, например 60

3,4-11.анизилиденлига омицин, 3,4-ци1шмилидеплйнкомиции и 3,4-толуилиденлинкомицин, до выделения нужно перевести в свободное основание.

Гидрохлориды арилиденлинкомипина можно -превратить в свободное основание путем смешения соли со .щелочью, например с водным раствором едкого натра, гидроокисью четвертичного аммониевого основа5flиия, гидроокисью аммония или сильным ами- новым основанием. Можно использовать основные ионообменные смолы. Нерастворимое арилиденлинкомициновое основание отделяют фильтрованием или экстрагируют водонерастворимыми pacтвopитeля IИ, например хлороформом, метилхлоридом, дихлорэ таном, эфиром. Гидрохлорид арилиденлинкомицина можно перевести в свободное основание, сначала нейтрализовав соль основанием, - затем обработав его хлороформом, циметилформамидом, диметилацетамидом, пропиленгликолем: и т. п. В качестве основания можно применять алкоголят, i амин, аммиак или твердое неорганичесоке сГснова- ние, например едкий натр, едкое кали. Полученный раствор арилиданлинкомицинового основа шя можно выделить из смешивающихся с водой растворителей разбавлением водой до слабой кристаллизации аце- талей. Растворы аришщвнлинкомицина в несмешиваю.щихся с водой растворителях можно вьщелить разбавлением неполярньЕМ растворителем, например гексаном, изомерньш гексаном, или просто вьгаариванием растворителя. Последний способ получе- ния свободного основания из гидрохлоридов лрилиденлинкомицина npi-п оден для вы- деления очень лабильных ацеталей линкоми- цина, так как в этом случае не применяется вода. Большинство оснований арилиденлинкоми- цина можно очистить растворением соединения в ацетоне, разбавлением раствора эфиром, добавлением гексана до помутне- ния для иницшфования самопроизвольной кристаллизации. Тритиловые эфиры 3,4-0-арилиденлинко- мицина получают путем взаимодействия избытка тритилгалоида или замещенного; тригилгалои,ца с 3,4- арилиденлинкомициком в присутствии сильного основания и растворителя. Молярное соотношение тритилгапоида или замещенного тритилгалоида к 3,4-арилиденлинкомицину составляем 4:1. Можно применять и более высокое соотно- шение, вплоть до 1О:1, но при большом из- бытке тритилирующего реагента образуются большие количества дятритилтфованных по- бочных продуктов. Меньшие соотношения (ниже 1:1) приводят к неполной реакции. а также к образованию неидентифицируемых побочных продуктов. Лучшим тритилгаловдом является тритилхлорид, но мовдо применять н apyrvie тритилгалоиды и замещенные тритилгалоиды формулы П Лучшим растворителем для тритилирования является ацетон. Другие применяемые растворители - 2-бутан он, 2 пентанон, 3- ентанон, эфир, бензол, N N-диметилформамид N N -диметилацетамид, диметилсульфоксид, метилацетат, этилацетат, пиридин и т. п. Однако применение высококипяпдах растворителей приводит к образованию дополнительных побочных продуктов, а применение низкокипящих растворителей не позволяет завершить реакцию. Наилучшим основанием является триэтил амин. Можно применять н другие сильно основные триалкиламины, например триэтилендиамин, N-алкилморфолиновые производ ные, трипропиламин, трибутиламин. Третичные основания с рКа больше 8 позволяют быстрее.закончить реакцию, так как обеспечивают лучшую растворимость арилиденлинкомкцина. Более слабые основа ния. , например пиридин, требуют большего времени для реакции, поскольку арилиденли комицин в присутствии такого основания м нее растворим, чем гидрохлорид.. Время реакции определяется нескольким факторами, например температурой кипения растворителя, силой основания, концентрацией и отношением тритилгалоида к 3,4-ар лидёнлинкомицйну и полярностью растворите ля. Например, соотношение тритил хлорида ,ани- зилиденлннкомицина и триэтиламина и ацетона 72:15:16:34 является лучшим,.время реакции при TeNmepaType кипения с обратны холодильником составляет 24 ч. Время реакции можно увеличить до 48-ч, хотя при том получают большие количества 2,7-диО-тритил-3,4- О - анизйлиденлинкомицина. При времени реакции менее 6 ч получают большие количества непрореагировавшего анизилнденлинкомицина. При других молярных соотношениях время реакции может со тавить 1-100 ч. По.окончании реакции тритилирования полученный 7-0-тритил-3,4-0-арилидэнли№ комицин осаждают добавлением неполяр- ного растворителя, например гексана, гептана, пентана, циклогексана, бензола. Сырой продукт повторно перекристаллизовывают из ацетон трила н, наконец, из горячей смеси ацетон-вода (1:1) и получают чистый 7-0-тритип-3,4-О-арилидеш1инкомицин. Для перекристаллизации можно также применять 2-бутанон, 3-пентанон, н -пропансш, 2-пропанол, бутилацетат, бензол, утиронитрил, смеси N , N-ДИметилформамидода, N , N -диметилацетами.ц-вода, метаол-вода, этанол вода и т. п. Т-О-ТритилиЗ, 4-0-арилиденлинкомицин ожно фосфорилировать известным способом, апример реакцией с фосфорилируюишм реаентом в присутствии связывающего кислоту вещества, например третичного .амина, с получением 7-0-тритил-3,4- О-арилиденлинкомицин-2-фосфата. К фосфорилируюшим реагентам относятся хлорокись фосфора (POCEj), дианилинфосфррхлорид, анили№фосфорхлорид ди-трет-бутилфосфорид, диморфолинфосфорбромид и цианэтилфосфат плюс дициклогексилкарбодиимид, К третичным аминам относятся пиридин, хинолин и изохинолин, триметиламин, триэтиламин, триизопропиламин, N,N диметиланилин, диэтиланилин, N -этилпиперидин, U -метилпиперидин и т. п. Лучшим основанием является пиридин. Фосфорилирование ведутпутем обработ ки раствора 7-0-тритил-3,4-0-арилиденлинкомицина или 3,4,-0- арилидён-7-гало-7деоксйпинкомицина или их аналогов в третичном амине, например пиридине, фосфорнлируюшим агентом, например хлорокисью фосфора, с охлаждением реакционной смеси для предотвращения побочных реакций. Лучше шести реакцию в пиридине при температуре от -38 до -42 С, Допустимы температуры от -50 до -Ю-С, но иногда при более высоких температурах образуется значительное количество побочных продуктов. Полученный 2-ч})осфордихлоридат гидролизую водой до соответствующего фосфорного эфира при TeNfflepaType от -40 до +10°С. Предпочтительны низкие температуры, при которых образование побочных продуктов минимально. Так, по реакции 7-О- три- тил- 3,4-О- анизйлиденлинкомицина в присутствии третичного амина не менее, чем с 1 молемфосфорилируюшего агента получают 7-0-тритил-3,4-Ь-анизилиденлинкомицин-2-фосфат; по реакции 3,4-0-аниаилиден-7хлор-7-деоксилинкомигоша получают 3,4-Оанизилиден-7- хлор-7- деоксилннкомицин -2- фосфат. Линкомицин-2- фосфат можно получить из 7-0-тритил-3,4- арилиденлинкомици 2- фосфата селективньп удалением тритильной и арилиденовой гРУПп; 7о-галоид- 7деоксилинкомицин-2-фосфат из 3,4-арилиден 7-галоид-7-деоксилинкомицин-2- фосфата селективным удалением арилиденовой группы. Удаление этих защитньк групп осуществляется гидролизом в слабой кислоте. Например, 7-О-тритил- 3,4- 0-анизилиде№линкомицин-2-фосфат и 3,4- О- аннзилиден7- хлор-7-деоксилинкомицин при нагревании

с 80%-ной уксусной кислотой при 100°С в течение 0,5-1 ч дают соответственно линкомицин-2-4{)осфат и 8- хлор- - деоксилинкомгнцин-2-фосфат. Можно применять также муравьиную, протшоновую, разбавленную соляную и разбавленную серную кислоты,

Нужньй 2- фосфат можно вьзделить из реакционной смеси различными способами ил специальным /способом, показанном на примере, пинкомицин- 2- фосфата. Этот способ состоит в ионообменной хроматографии на смоле четвертичного аммониевого основания Дауэкс 1-Х2 со ступенчатым элюированием, при этом линкомицин-2- фосфат отделяется от побочных продуктов. Линкомицин-2- фосфатный слой собирают и сушат вымораживанием. Ацетат аммония удаляют при нагревании, а органические фосфаты уделяют насыщением водного раствора лин комицин-2- фосфата газообразным аммиа ком для осаждения диаммонийфосфата. Линкомицин-2-фосфат получают вымораживанием указанных водных .растворов с получением смешанных аммонийных, солей. Полуаммониевый линкомициН 2-фосфат получают нагрева нием указанной соли при в течение i3 ч, Цвиттерионную форму линкомицин-2 фосфата, не содержащую аммиака, получают при нагревании аммониевой соли до 118- 120°С в течение 8-24 ч в высоком вакууме с последующей кристаллизацией цвитте- рионной формы.

Другим способом является удаление неорганических фосфатов до кислотного гид- ролиза. Этот способ имеет то преимущество, что лишСомицин-2- фосфат иногда можно кристаллизовать прямо без прохояодения

через аммониевую соль.

Новые соединения согласно изобретенню тфедставляют собой аминокислоты, которые могут существовать в протонированиом Ш1И Н0протощфованном виде в зависимости от рН среды. При маль5х рН соединения существукйг в виде солей, при более высоких . рН в иватгерионном виде, а еше при более выссжиж рН Б виде оопей металлов. П оследине могут быть нейтральными солями(2 экв основания на 1 моль линкомишга-2--фосфата) кисям&ш или мкшосолями (1 экБ ; сюнова шя на 1 мапь ийнк.омидин-2-фосфата), полусолыо (0,5 sss основания на 1 моль ликЕ Ь ИИЙН-2-фосфата), При добавлении cooTBei ствукждих количеств кнслот или оснований можио выделить из этих форм.

В 1фивоя.«мык пркмераж части и проден- ты даны весовые, если wtia4& ®« указано,

Прим ер 1. Ли1Шомишн -2-фосфат.

А. Гидрохлорид 3,4,0-анизилиденлинкомцина и основание 3,4,-О-анизилиденлинкомицина.

Раствор 47 г (0,1 моля) полугидрата гидрохлорида линкомицина растворили в смси 125 мл диметилформамида , 75 мл ани зальдегида и 160 мл бензола, нагревали на бане при 14О С. Бензол-водный азеотр отгоняли при 105-110 С и после отбора каждого дистиллята по 50 мл .добавили еще 5О мл сухого бензола. Кристаллизация гидрохлорида 3,4-0-анизилиденлинкомицина началась после отбора 100 мл дистиллята, после отбора еше 25О мл дистиллята реакционной колбе дали (охладиться до комнатной температуры. Светло-коричневую реакционную смесь обработали 2ОО мл эфира, осадок отделили и промьти эфиром. После сушки осадка в при 40 С выход сырого белог о ггщрохлорида 3,4 -О-анизшпзденлинкомицина составил 43,0 г. Часть этого гидрохлорида превратили в свободное основаниеследующим: способом: суспензию 21 г гтадрохлорида 3,4-О.анизилиденлинкомиц ша в 150 мл воды взбалтывали с 15 мл 2н, едкого натра в делительной воронке. Сырой про- дукт основания 3,5-0- анизилиденлинкэмицина экстрагировали четьфьг ш порциями по 400 мл эфира. Эфирные вытяжки соединили, сушили над сульфвтом натрия и упарили до 10О мл. После вьщернски в холодильнике в Т9чет е H04Hj отфильтро, вали выпавшие белые иглообразные кристаллы 3,4 0-анизйЛ1щенлш1Коми 1Инового основания и промьши их смесью эфира и гексана (1:1), Кристаллы сушили в вакууме, выход 13,2 г. Дополнительно 4,7 г основания 3,4 -О -акизилиденлинкомнцина получили добавлением гексаиа к маточному раствору, получил общий выход 17,9 г.

Вычислено, % : С 59,53; Н 7,69; N 5,34; S 6,1О; экв. вес,524,63; вода О.

С,,Н,НО S..

Найдено, % -. С 59.77; Н 7,66; Ц 5,34 $ 6,17-, экв. вес 524; вода О. 96 (1,08%, EtOH). EiOH) 226,5 1Ш: (S 14,775).

Б. 7-0-тритил-3,4-0-анизгшиденлннко

МВЦШ,

Раствор 8 г (15,2 моля) 3,4-О-анизилиденлиякомицина, полученного по п. А, в 25 jvtn ацетона обработали 16 г тра« этила мина и 2О г (72 ммоля) тритияхлори да в а азанном порядке. Реагдионцую коп бу снабдили холодильником Н хпоркалыщв вой трубкой, смесь кгпятияи с обратным холодильником 24 я. Тритилхлортод растворвлся при кипячений с обратным холодильником, гщфохлорид триэтиламина медленно: кристаллизовался, последний удалили из реакционной смеси фильтрованием, оставшийся коричневый фильтрат |разбавили сначала 100 мл циклогексана, а затем 350 мл Гексана до стойкой мутности. Смесь выдерживали в течение ночи при комнатной температуре. Полученные желтые кристаллы С1ФОГО 7-О-тритил-3,4-О-анизилиденлкнком цкна отделили фильтрованием,промыли гексаном и сушили на воздухе,/йыход 9,4 г. 9,3 г этого вещества растворили в 100 мл ацетоннтрила, раствор частично обесцвети Ли 1 г актиэированного. угля. После упаривания раствора отгонкой до 30 мл началась самотфоизв;ольная кристаллизация ,4-0-анилйз1аденлинкомицина. Эти ; кристаллы отделили фильтрованием и дважды перекриСталлйзовали из ацетонитрила; вы-. ход 6,45 г желтых кристаллов 7-0-тритил3,4-О-анизилиденлинкомицина. Этот продукт раство1Я1ЛИ в 160 мл горячего ацетона, раствор разбавили 14О мл горячей воды (5О С) до .постоянной мутности. Быстро началась кристаллизация 7-О-тритил-3,4-0 нвзилидё нлинкомшйна. После охлаждения реакционн(}б смеси при О°С в течение 1ч фильтрованием выделены бельхе кристаллы „ л 7-0- итил-3,4-0-анизилиденЛинкомнцин9, изс промыли смесью ацетон-вода (1:2), сушили на воздухе, выход 6,2 г, т. пл. этих кристаллов 2ОЗ-2О4°С. Вычислено,% : С 7О,47; Н 7,10;.НЗ.бЙ; S 4,18. Q jH - KjOyS (экв. вес 767,01). Найдено,%: С 70,58; Н 7,41; N3,70 S4,39. В. 77О-тритил-3,4,-0-анизилиденлинкоми цин-2-фосфат. / Раствор 18,4 г РОСе в 2ОО мл сухого пиридина поместили в трехгорлую колбу, онабженную пропеллерной мешалкой, мометрОм, капельной воронкой и хлоркаль- циевой трубкой.Пиридиновый раствор охладили ДО-.-4О Сив течение 10 мин добавили раствор 76,7 г 7-О-тритил-3,4-0-анизилиденлинкомицина в 2ОО мл сухого пиридина. Температуру в реакторе поддерживали от -38 до -42 С с помощью бани ;изсухого льда и ацетона. Розовому раствору дали нагреться в течение 25 мин до - 2О С, затем охладили до - 45°С и добавили раствор 36 мл воды в 15О мл шфкдина (пред,Q варительно охлажденного до- 35 С). Раствор сразу окрасился в оранжевый цвет и тем пература поднялась до - ЗО С. После отстаивания в течение 4 ч при комнатной температуре растворитель отогнали в вакууме , добавили 1ОО мл этилового спирта и повторили отгонку, получили 7-0-(ритил-3,4-0-анизилиденли ко1 шцин- 2-фоофат в виде вязкого остатка. Г, Линкомицин-2м|)осфат (сьфой). Вязкий остаток растворили в 400 мл уксусной кислоты при энергичном взбалтььвании, затем разбавили 80 мл воды. Раствор нагревали на паровой бане в течение ,и отогнали растворитель в высоком вакууме при 55 до получения вязкого оо татка, который перемешали с 200 мл воды. После повторного вьшаривания получили желтый вязкий остаток, который взболта- ли с 700 мл воды, затем добавили 1ОО мл концентрированной гидроокиси аммония и суо пензию экстрагировали 1 л хлороформа. Водный слой упарили до небольшого объема для удаления аммиака, разбавили водой до 50О мл и сушили вымораживанием. Получили 75 г светло-желтого линкрмицин-2-фосфата. Полученный линкомицин-2-фосфат раствовррили в 750 мл воды и пропустили со скЬростбю 75О мл/ч через колонну 3x14, заполненную смолой Дауэкс 1-Х2 (ацетат), представляющей собой полистиролтриметил- бензиламмонийацетатную катионообменную смолу, связанную 2% дивинилбензола при рн д. Элюирование велось при рН 9 аце iтатом (аммония со скоростью 1500 мл/ч и 7 л 2н. ацетата аммония. Выходящую из колонки жидкость контролировали запись вающим поляриметром Бендикс. Первые 7л жидкости отбросили, пиковый продукт собра отдельно. Бесцветный пиковый элюат упарили до небольшого объема (10-15% от начального объема) для удаления большей части ацетата аммония. Бесцветный раствор разбавили до 4 л водой и сушили вымораживанием. Полученнъгй осадок нагревали до 1ОО С под высоким вакуумом для удаления оставшихся следов ацетата аммония. Д. Диаммониевая соль линкомициН52-фосфата. Лиофилат, полученный по п. Г, растворили в 2ОО мл воды и разбавили 2ОО мл этилового спирта. Раствор охладили на ледяной бане и затем насытили газообразным аммиаком. Белый осадок диаммонийфоофата отфильтровали, фильтрат упарили досуха под высоким вакуумом при , остаток растворили в 20О мл метилового спирта и разбавили 1500 мл эфира для осаждения .. к «fc rf v v. ДГМ1Л . JLl«iJ i Ql/Ik H f n.rJL,лннкомицин-.2-фосфата в виде агмониевой ;соли. Выход белого продукта 18,9 г. Е. Полуаммониевая соль линкомицин-2фосфата. Эту соль получили следующим образом. РасТгвор 16,5 г аммонийлинкомиции-2-фосфага, полученный по п. h, растворили в 66 мл воды. Бесцветный раствор разбавили 3,6 мл уксусной кислоты, .затем разбавили 45О мл ацетона (точка постоянной мутности). Кристаллизация началась очень быстро. После охлаж,цения в холодильнике в течение 8 ч кристаллы отфильтровали, промыли 20 мл смеси ацетонвода (95:S)i а затем 2QO мл ацетона.

Белое кристаллическое вещество сушили при 1ОО С 3 ч в чистом вакууме, затем привели в равновесие с лабораторной атмосферой в течение ночи. Полуаймоние- вая соль представляет собой игольчатые красивые кристаллы, которые легко перекристаллизовываются. .

Вычислено, % : С 43,67; Н 7.43; Н 7,07; Р 6,26; акв. вес 245,О2.

CssHraN. (990,10). Найдено (с поправкой на 6,91% Hj,О и 0,87% неорганических фосфатов.в БИДЙ .,PO ), % : С 42,22; Н 7.90; N17,07 Р 5,77; экв. вес 237,

Ж, Линкомицин-2-фосфат. Полуаммониевую соль из п. Е нагревали йри 118-120 С в течение 8-24 ч в высоко вакууме, получили линкомицин-2-фосфат.

После смешения 7-хлор- и 7-бром-7-ди-

ОКСИЛИНКОМИЦИНОВ, обоих Т (реКТусНОЙ) и

((синистерной)конфигураций, для линко- . мицина из п. А (без п. Б) получили7-( }хлор-, 7- ($)-хлор-, 7-(Т1 )-бром-, и 7-( S )-бром-7-деоксилинкомицин-2-фосфа Гты в виде полуаммонийных солей и в виде щвиттерионных соединений. Получили также промежуточные 3,4-0-арилиценлтшком1щгга-2-фосфаты и 3,4-0- арилиденэпилинкомицин2-фосфаты. Это показано в нижеследуюш.ем примере.

П р и м е р 2. 7-( S )- Хлор-7-деоксиЛинкомицин-2-фосфат.

А. 3,4-0- п-ацетамидобензилиден-7-( S )-хл ор-7г-де оксилинк омицин.

Раствор 1О г 7-( 6 )хлор-7-деоксилин;комицингйдрохлорида в 2О млN,N-диметилформамида и 170 мл бензола обработали 15 г п-ацетамидобензальдегида. Раствор нагревали с обратным холодильником в те- чение 1,5 ч, а воду улавливали в ловушку После охлаждения до комнатной температуры небольшое количество нерастворимого вещества отделили фильтрованием. Фильтрат разбавили 40О мл воды, полученный осадок отфильтровали, промыли эфиром, сушили в струе азота и получили 7,4 г 3,4-О- п-ацетамидобензилиден-7-( S ) -хлор-7-деоксилинко- мициигидрохлорида. Свободное основание по пучипи-при перемешивании 7,4 г гидрохлорида со смесью 5О мл воды и 10 мл кон

центрированной пщроокиси аммония. Полученное твердое вешество отфильтровали и сушили .-в струе азота с получением 5 г 3,4-0-п-ацетами,цобензилиден-.7-( 5 )-хлор7-деоксилинкомиципового свободного основания с т. пл. 100-114 С.

Б. 7-( S )-Хпор-7-деоксилинкомицин-2 -фосфат. 3,4-О-п- ацетамидобензнлидви- 7-( S )-хлор 7-двоксинкомицин; фосфорипировали РОС в пиридине, как в примере 1. После удаления защитной группы 8О%-ной уксусной кислотой соединение очистили ионообменной хроматографией с получением 7-( S )-хлор-7-де.оксилинкамицин-2-фосфата.

Замешением 7-( S )-хлор-7-деоксилинкомицицгидрохлораца 7-.( S )бром-7-деоксилинкомкцингидрохлоркцом получили 7Ч S )-бром-7-де оксилинк омицин-2-фосфат.

7( 5 )-Хлор- и 7-( 5 )- бромлиикошщи. ны получают следующим образом.

Гвдрохлорид 7-(S )-хлар-7-деоксилинкомицина.

Гидрсхпорид линкомтшна (Юг, 0,0226 молял 200 мл четыреххлористого утлерода и 10 мл SOC&2 перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение 4 ч. Реакционную смесь охладили до 25 С и отфильтровали. Желтый осадок высушили в вакууме, потом растворили в ДО мл кипящего этилового спирта Добавили этилаце- тат до помутнения и раствору; дали остыть. Получили кристаллы П{,г:ф.охлорида 7-хлор7-деоксилкнкомицина с выходог около 43%.

Вычислено, % : С 45Д8; Н 7,37; се 14,38; N5,86; S 6,70: 3,77.

С,- Н, се N,o, 5 нс н,о,

.

, % : С 44/7, Н 7,65; Cei4,27; N5,78; 56,45; 3,85,

7- ( S ) -Бром-7-деоксилннколпщин и его гидpoбpo тад.

Раствор реагента Ридона получили перемешиванием сухого раствора 52,6 г (0,2 могь тркфенилфосфина и 8ОО мл адетонитрила при в атмосфере азота. Юмл (0,19 моля) брома добавили в течение 20 мин. После перемешивания р течение 10 мин добавили 8,2 Г; линкомицина в реакционную смесь, перемешивали при ЗО С в течение 18 ч, после чего получили белый осадок. Этот осадок отфильтровали и выбросили, к фильтрату добавили 100 мл метанол и растворители отогнали в вакууме. Вязкий остаток растворили в 100 мл метанола, разбавили 180О мл воды и шесть раз экстргировали по 20О мл эфира. :Эфврные ..экстракты отбросили, водную фазу подщелочили (рН 11) водным КОН и снова экстрагировали четыре раза по 200 мл метиленхлорида. Экстракты сушили н унари/ш, получили 11 г желтого осадка, который хроматографировали на 1 кг снликагеля с помощью системы метанол-хлорсэформ 1:9 (по объему). После первого отгона в 1200 мл софалв 22 фракциа по 56 мл. Последние шесть фракций (17-22) вьшарнли досуха ,н получили 2,8 г 7-брол -7-дерксилинкомицина. ЕГО превратили в пздробромид путем растБОренм в воде и .добавления НВг до рН 1, отфильтровали и лиофипиэировали фильтрат. ГВДробромид имея +114 (с 0,9314, H-jO). Вычислено, % : С 39,28; Н 6,23; N5,0 $5,83; Вг 29,04. С вНз Вг ед Найдено, % : С 39,64; Н 6Д9; N5,07; S6,O4; Вг 28,59. Если бром Заменить хлором, то получаю 7-( 5 )-хлор-7-деоксилинкомнцин, идентичшли щ)одукту, полученному при хлорировани линкомЕцина тношшхлоридом. Вместо трифеыилфосфина можно замещать трифенил})осфнтом. В этом случае можно также использовать вместо галоида метилгалоид. П р и м в р 3.1, Линкомшшн-2-фосфат. А. 7-О-тритил-3,-4гО-анвзш1Вденлинкоми вИБИЙ-фосфат. В колбу емкостью 22 п, сшбженную хлоркальциевой сушильной трубкой, нвзкотемпературным термометром, мешалкой Н Питательной воронкой на 1 л, по- местили 3600 мл пиридина и ЗОО мл хлор окиси фосфора. Полученный раствор охладил с помощью сухого льда в ацетона до - 35 Раствор 1200 г 7-0-тритш1-3,4,-0-анизилиденлинкоминина в 11 л пиридина перенес ли в атмосфере азота i в питател1аную воронку порциями; по 1 л и подавали в колбу в течение 25 мин при температуре от - 25 fio - 35 С. По окончании добавления реакционную смесь перемешивали при -30 С в течение 0,5 ч, а затем при температуре от -20 до -15 С еще О,5 ч. Потом реакционную (Смесь быстро добавили к 12 л пиридина в резервуаре емкостью; 39,38 л с открытым верхом, причем пиридин предварительно охладили, добавив 3 кг льда и пе. ремешав в течение 5 мин. Полученный раствор выпарили в выпарном аппарате при 5 5 до 7 л. Испаритель промьши 4 л этанола, который потом добавили к концентрату в резервуаре емкостью; 107,4 л. Затем концентрат; разбавили при перемешивании 35,8 воды. 7; О-Трйтил-3,4-0-анизилиденлинкомицин 2-фосфат вьшал в виде желтого осад ка, который отфильтровали и промьши 17,9 воды. Б, Лшщомиц1ш-2-4осфат. Остаток на фильтре из п. А растворили в 15 л 80%-ной уксусной кислоты и нагрели при 85 С в течение 45 мин, после чего добавили 10 кг льда и смесь перенесли при переметивший. Вьшавший через 10 мин осадок отфильтровали и промыли 2 л воды и отбросили. Промывные ; воды и H bTjpar соединили и упарили до 4 л, разбавили 17,9 л воды и снова упарили до 2 л. Это раствор с добавкой 7,16 л воды, использованной для промывки колбы,; в которой вели вьшаривание, экстрагировали 3,58 л хлороформа. Хлороформенную фазу снова экстрагировали 2л воды, которую добавили; к водной фазе. Объединенную водную фазу выпарили До 3л. Водный концентрат откачали из испарителя и в Herdl добавили 4л этилового спирта, где его упари-г ли до 2 л и соединили с водным концентра-i том. Соединенные концентраты снова упарили в- вакууме до 2 л. Затем добавили 3,58 л абсолютного спирта и раствор уп рили до 3 л. Добавили 3,58 л абсолютного спирта, раствор заразили кристаллами пви1 терионной формы линкомш{и -2-фосфата и дали стоять 2 ч, при этом вьщелились кристаллы цвиттерионной формы линкоЛ1ицин-.2фосфата. Кристаллы отфильтровали, промьши 3,58 л абсолютного этилового спирта, вььсушилк в вакууме при 4О°С в течение 24 ч., Получили 31О г (выход 32, 4%) линкомиц1ш-2-фосфата в виде белых кристаллов, т.пл, первой порции 215-216,второй порции 214-215 С. Первую и вторую порции соединили и перекристаллизовали из водного этилового спирта, получили кристаллы первой порции с т. пл. 216-218 С (из 71,59&-«ого водного этилового спирта) и 95 г кристаллов второй порции с т. пл. 216-217 с (из 80%-ного этилового спирта). Кристаллы .первой и второй порции соединили и перекристдл лизовали из водного этилового спирта с , ходом 25 г линкомишш-2-фосфата в виде белых кристаллов с т. пл. 222-224°С. Вычислено, % : С 44,43; Н 7,25; N5,76; Р 6,37. 1 . Найдено, % : С 44,72; Н 7,35; ,N5,84; Р -бгбО. (с поправкой на 4%: воды). Цвиттерионную форму можно превратить и в другие формы добавлением перечисленных вьш1е кислот и оснований. Замещением 7-тритил-3,4-0-а1яизилиден- линкомишга-2-4осфата из примера 1, п. В 3,4 0-аШ1зилиден 7-( 5 )-хлор-, 7-( Т )хлорт; 7-( S )-гбром- и 7-(Т )-бром-7-диоксилинкомицинами получают 3,4-0-енизилиден-7- ( S )-хлор-, 7-( К)-хлор-, 7-( 5 )-бром-г, И. 7-( 5 )-бром-7-деоксилинкомицины, а при обработке этих продуктов по способу п. Б этого примера получают 7-( 5 )-хлор, 7-(Т )ор, 7-( $)-бром и 7-( R )-броы-7-деокси-,

пинком1ашга-2-фосфаты в виде цвиттерионной формы.

П р и м е р 4. Линкомицин С-2-фосфат.

А. -Заменив щдрохлорид линкомицина из :примера 1 Рйдрохлоридом: линкомицина С, получают линкомицин-С-2-фосфат .этил-6,8- дидеокси-6-(транс-1-метил-4-пропил- L( |-2-. i-гпирролидинкарбоксамидо)-l-oHo- D -эритро- dl - 3) ч:алоктооктопиранозид-2-фосфат .

Б. Линкомицин С получают по реакции линкомицинас этантиолом (этилмеркаптаном) образованием диэтилдивцеталя с последуюIKHM нагреванием реакционной смеси в присутствйи п-толуолсульфокислоты или натре- .ванием до плавления. Ниже приводится описание этого способа(пп. I и II ).

I. 6,8-Дидеокси-6-(транс-1-метил 4- -пропил- L -2« ирролидинкарбоксамидо) эритро- D -галактоальдегидоктодцэтйлдитиоацеталь.

В трехгорлую колбу емкостью 1л загрузили 150 млконцентрированной соляной кислот и 50 мл предварительно охлажденного до |О С этантиола, а затем 15 г | гйдрохлорида линкомицина. После перемешивания при коь аатной температуре в течение 5 ч реакционную смесь разбавили равным объемом ледяной воды, экстрапфовали скеллисо№Бом В (тезшический гэксан) и экстракты от бросили.

Большую часть кислоты нейтрализовали осторожным добавлением твердого едкого кали (1ОО г)при температуре пвремеши Баемой смеси 20-30 G (охлаждение смесью ацетона и сухого льда). Твердый хлористый калий отделили фильтрованием, хорошо про|мыли хлороформом. К фильтрату добавили еше хлороформа (около 150 мл) и перемешиваемую смесь довели до рН 1О до- ; бавлением водного едкого натра (2 н.)

.Хлороформейный слой отделили, водный |слой тщательно экстрагировали хлорофорIMOM, соединенные экстракты дважды про- ; |мьти водой, сушили над безводным сульфатом наурия. После отгонки растворителя в вакууме при 30 С получили полутвердый достаток, который после перекристаллизации «3 ацетона дал 5,41 г 6,8-дкдеокси-6l-OpaHC-1-метил-.4«н1ропил- 1 -2-пирролидинкарбоксамидо) Ji-эритро-U -галактоаль- дегидоктозднэтилдитиоцеталя в виде бесцветных плоских игл с т пл. 130-132 С, После упаривания маточного раствора получили дополнительно 1,5 г вещества с т.пл. 12 -131°С (общий выход 6,91 г- 42,4%)

Вычислено, % : С 52,25- Н8Л 7; N5,81; 613,29.

.

Найдено, % : С 52,38; Н 8,71} N 5,93| 513,46..

II. Циклизация до линкомицина С, а) 1 ч. дкатилдитиоадеталя из п. 1 и моногидрат п толу6лсУльфокислоты нагревали с обратным холодильником в 25 ч. ацетонитрила до получения существенной противобактериальной активности. Реакционную смесь охладили и вьшарили досуха и хроматохрафировали на свликат ле с помощью смеси атилацетата, ацетона и воды в cooтнpшeниJa 8:5:l соответственно.

Фракции 102-131 показали I гфотивЬбак териальйую активность. Фракции 105-125 Бьшарили досуха и перекристаллизовали из ацетона, подкисленного соляной кислотой, перекристаллизовали из воды с добав лением ацетона с получением кристаллов . гидрохлорнда линкомншша С с т. пл. 149- 153°С.

б). Диэтилдитиоацеталь из п. 1 нагревали до 26.0°С в течение 3 мин, ври этом отмечайся запах меркаптана.; Хроматографией (как приведено в п. И, а) показано, что получен линкомицкя С.

В. Пои1учение линкомипчра С ферментацией.

Гидрохлорид лннкомицйна С был получен следующим образом.

Ферментация. Срез почвы) Streptotniices EiTiCoETienbis VOIP. CincoeneTrsis NRTl 2936 был использован для заражения серии эрленмейеровских колб емкостью 500 мл, в каждой содержалось по ЮОмл затравочной среДы, содержащей следующие .количества ингрв.шнтов, г:

Истодак (протеиновый гидро- лиаат дрояокевых клеток)

10

10

Моногидрат глюкозы

Ы - 2 -Амин В

5

Водопроводная вода

1 л по (потребности)

, N .2 -Амин В - пищеварительное срёдс1 ао энзимного казеина Шеффилда, рН среды посева до стерилизации был 7,3.: Рост продолжался 2 дня при 28-С на трясучке Гумпа при 25О об/мин.

затравку посева (5 мл) добхПв ли в каждую из.ЗО колб :на50О мл, в которых содержалось по 1ОО мл ферментат ив ной среды следующего состава, г:

Моногидрат глюкозы15

Крахмал4О

Меласса20

Пептоновая хсидкость Вильсона № 159 (препарат S№эиматкчески гидролизсванноfK) животного протеина)1C

Кукурузная патока2Су

Карбонат кальция8

.Животный жир0, Водопроводная вода1 л Во время заражения добавили этионин до концентрации 2 мг/мл. Ферментации в колбах .закончилась после обработки в течение 4 дней при 28 С на трясучке Гумпа при 25О об/мин, В них содержалось по 200 мкг/мл образца S. Sute Общее количество твердых веществ в исчер панной питательной среде составило 2О г/ Очистка, Всю питательную среду К 235 л послефЬ -этиониновой ферментации отфильт ровали при рН сбора с помощью фильтра. Осадок мицелия промыли водой и отбросили. Отфильтрованную питательную среду и водную промывку (275 л) перемешивали 45 мин с 12,5 кг активированного угпя и 2,5 кг диатомной земли. Смесь отфильтровали и фильтрат отбросили. Уголь ный осадок промыли 60 л воды и воду отбросили. Осадок промыли 70 л 20%-ног йодного ацетона, этот ацетон отбросили. Затем осадил , Ьжды промыли по 100 л ОО%-ного ацетона. Промывки соединили (215 л) и упарили до 18 л. рН этого кон центрата довели до 10,0 50%-ным водным раствором едкого натра и трижды экстраги ровапи по 20 л метиленхлоридй. ЛА тйленхдоридные экстракты соединили (бО л ) и упарили до маслянттотого остйтка (7,14 г ) .содержащего линкомишга и линкомицин С в paBHbtx количествах (обав форме свобод ного основания). Это вещество растворили в 200 мл метипенхлорнда. Раствор оове или фильтрованием и выпарили досуха в вакууме. Остаток растворили в 1ОО мл 1 н. метанольного раствора хлористого водорода. Метанольный раствор смешали с 3,2 г эфира .при перемещивании Полученные в. осадке бесцветные сырые гидрохлориды линкомтщина и линкомицина С были выделены фильтрованием и их сущи ли. Выход 7,14 г, проба по Soipcinoi Lutea 940 мкг/мг на агаре, доведенном до рН 6,8 с помощью 0,1 М фосфатного буфера. Единичный объем {0,О8 мл) раствора, содержащего определяемое вещество, помещали на пробный диск на 12,5 мл, который помещали-на агаровую пластинку, зараженную определяемым микроорганизмом. Тонкослойная хроматография показывает наличие I гидрохлорида линкомицина и гид- рохлорида линкомицина С приблизительно в равных количествах, 7,0 г сырого гидрохлорида линкомицина С растворили в 20 мл бутилового спирта и 20 мл воды, рН установили 4,2 с помощью 1 н, неб , раствор распределили в противоточном аппарате на 1ООО точек Тонкослойная хроматография показала, что фракции-в проб1фках 135-190 содер54 жат линкомицин С. Эти фракции соединили, раствор упарили до водЕ1Ых фракций, высушили вытормаживанием и получили 2,44 г гидрохлорида линкомицина С, в 1,4 раза больще, чем гидрохлорида линкомицина.. 500 мл этого препарата растворили в 2 мл воды, 1 мл этанола и 10О мл ацетона. Раствор осветлили фильтрованием. Фильтрат смещали с эфиром до появления кристаллов. Смеси дали стоять 1 ч при комнатной температ; фе, Крис таллический { кубики) гидрохлорид линкомицина С был выделен из верхнего слоя декантацией. Эти кристаллы перекристаллизовали из бмеси следующего состава мл: 1воды, 1 метанола, 8О ацетона и 2О эфира. Выход 25О мг кристаллического (кубики) гидрохлорида линкомицина С. Bepjt НИИ слой выдержали при 5°С в течение 4 ч. Кристаллический (игольчатый) гидрохлорид линкомицина С, который высадился, отфильтровали и высушили, выход 15Омг, т. пл, 151-1570С. Г. Другой способ получения линкомицина С, Гидрохлорид линкомицина (8,85 г, О,О2 моля) растворили в 2О мл воды, охладили до О С и перемешивали при добавлении брома (3,52 г, О,О22 моля) по каплям в течение 1 мин. Добавили 25 мл этантиола, смесь перемещивали при 25°С 2ч. Прозрачную бесцветную двухфазную систему (этантиол сравнительно мало растворим в воде) охладили на ледянойбане и в течение 5 мин пропускали газообразный хлористый водород. Нижний водный слой окрасился в красный цвет. Затем реакционную смесь трижды экстрагировали Скеллисолвом В (до 10О мл) и добавили водный .раствор едкого натра для поднятия рН водной фазы 11. Щелочную фазу хорощо экстрагировали хлороформом, хлороформенный экстракт промыли насыщенным раствором хлористого натрия в воде, высушили выпарили в вакууме и получили 6,2 г бело го осадка. 4,8 г этого осадка хроматог рафировали 80О г силикагеля, используя систему растворителей метанол-хлороформ (1:7). После первого погона в 800 мл собрали 80 фракций по 25 мл. Фракции 40-58 соединили, выпарили досуха, остаток перекристаллизовали из и получили 0,5 г вещества, идентичного диэтилди-г тиоацеталю из п. Б, 1. Фракции 65-75 соединили, вьшарили досуха, растворяли в смеси 5 мл метанола и 4ОО мл диэтиловрго эфира. Добавили газообразный хлористый ьодород и собрали вь навший белый осадок. После перекристаллизации из водного аце- тона пoлyчиrfk гидрохлоркд линкомицина С (0,5 г), идентичный соединению из п. В, Д. Другие алкил-6,8н1идеокси-6-{транс-1-меткл-4-41ропил- 1, -2-пирролидинкарбокс амидо)-1-тио- D -вритро- oL - D -галактоокт пираноаит-2- осфаты. Замешш этантиол в пп. Б, 1 и Г этого примера другими алкилмеркаптанами, например пропил, бутил, пентил, гексил, геп тип, октип, дешш, ундеиш1,1Додецил, три децил, тетрадецил, пенТадецил, гексадецил, гептадецил, октадецил, нонадешш, и эйкозилмеркаптанами или.их изомерными формами или щпшоалкилмеркаптанами, -например шпслопропил, циклобутил, циклопен- тил, цнклогексил, пиклогептил, цвклооктил 2- 4етилциклопентил, 2,3- диметилциклобутил, или 3-4хиклопентилпропилмерЕаптава ми или аралкилмеркаптанами, например бензол, фенетил-, 3-4)енилпропил-, или фтилметипмеркаптанами, получают соответствующие алкил, цвклоалкил или аралкил-6,8- дидеоксн-б- (транс-1-йетил-4-пропил- Ь -2-пирролидинкарбоксамидо)-1-тио- D -эритро- dl - D -галак- тооктопиранозиды; которые при обработке по способу примера 1 превраща т в соответствующий алкил, циклоалкил или аралкил-6,8-дидеокси-6-(транс-1- 1етил-4-пропил- 1« -2-пирролидинкарбоксамидо)-1-Оио- D -эритро- оС - 1) -галактооктанопй|ранозид-2-фосфаты. Полученные таким способом соединения,в которых алкил иредставля- эт собой пропил ,бутил,пентил и гексил (полученные соответственно из пропил,бутил,пентил или 1 ксилмеркаптанов) являются особенно эффективными противобактерицидными веществами с таким же спектром действия на живые организмы, как линкомицин, и с равн или с большей активностью. П р и м е р 5; Метил-6,8-дидеокси-6-(транс-1-алкил-4-бутил-2нпирролндинкарбоксамидо-1- ио- Т) -эритро- oL - В -галак ;тооктопиранозид-2и}юсфаты. А. Заменив гидрохлорид линкомицина ив примера 1 метил-6,8-дидеокси-б-(транс-1 -этил-4-бутил)- It -2-пирролидинкарбоксам до)-1-тио- D -эритро- dl - D -галактоокто пиранозидгидрохлоридом, получают метил- -6,8-дидеокси-6-(транс-1-«тил-4-бутил- L -2-пкрролидинкарбоксамидо)-1-тио- Т) -эри ро- (Л- Т) -галактооктопиранозид-2Ц)осфат. Заменив цис-эпимер, получают метил- -6,8-дидеокси-6-{цис-1-этил-4-бутил- Ь - -2-пирролидинкарбоксамидо)-1.гио- Ц -эри ро- dl - D -галактооктопиранозид-2-фосфат гем же противобактериальным спектром. Заменив 1-метнланалоги, получают метиЛ-6,8-дидеоксИ;.б-(1шс- и транс-1-мвтил-4-бутил- i, -2-пирролидинкарбоксамидо;-1.гио-D -эритро-oL - D -галактооктопира- нозид-2н1)осфаты. Применяемые в качестве исходных ве1ществ оке- и транс-41зрмеры получают следующим образом. Б. 4-Бутилнден-1-«арбобензокси-V- пролив и его {шклогексипаминовая соль. 53%.чвую суспёнзшо 19 г|гидрида натрия в миндальном масле нагрев алн с ,35О мл {дюдетилсупьфоксида при 7О-75°Ь до окончания реакции (около 30 МЕЯ) . После охлаждения до 32°С добавили 16,2 г бутилтрифенилфосфорный бромид, ; полученную смесь перемешивали 1 ч для обеспечения полноты реакшш. Добавили раствор 26 г 4-кето-1-.карбобензокси- - Ь 41ролнна в 1ОО мл диметилсупьфок- ;сида и полученную смесь нагрели до 7О С в течение 3 ч. Реакнионную смесь охла дили до 25 С и добавили 1 л 2,5%-«ого водного раствора бикарбоната натрия. Эту смесь дважды промыли по 700 мл эфира, 1 после обратной экстракции вытяжку от;бросили. Бикарбонатные растворы соединили и подкислили 4 н. соляной кислотой. Подкисленную смеСь экстрагировали ч&тьфьмя порциями по 50О мл эфира. Соединенные эфирные экстракты последовательно промыли 25О МП воды,|тремя порциями по 25О ш .насыщенного раствора бисульфата натрия и 250 мл воды,/суши- ли над безводным сульфатом натрия. Поем ле ОТГО1ПСИ растворителя в вакууме полу- . Чили 24 г маслянистого Достатка, представJisncHu ro собой 5-бутилиден-1-карбобензок- си- L -пролина. Остаток растворили в 31 мл ацетонитрВлла и обработали 18 мл дициклргексиламина и заморозили. Кристаллы собрали, промыли от адетонитрила и высушили в вакууме. Получили 21 г (46.,8%) igpRcrcu лической соли циклогексиламина с т. яя. 136-140°С. После двух перекристалшз ций из ацетонитрила получияя анашпгвчео- кий офазец с т. пл. С, ollj, - 4°( с 0,99, сна,) Вычислено, % : С71,86; Н 9,15; N 5,78. Найдено, % : С 71,69; Н 9,ЗО: N5.74. 1О г Дициклогексиламиповой соли 4 -бутилиден-1-«арбобензокси- U -1фол1юа взболтали с эфиром и избытком 5%н(сого водного раствора едкого кали до оолного растворения вещества. Слои paaaeimmr ir каждый из них подвергли обратной . Водный шелочный слой соеюявяяя С «&

ратной промывкой эфирного слоя и подкислили 5 н. соляной кислотой. Смесь повтор, но экстрагировали эфиром, эфирные экстракты соединили, сушили над сульфатом 1: натрия, упарили в вакууме и получили

6,3 г (93%) 4 утилиден-1 К 1рбобензок-. си- L -пролэтга в виде масла, i ,

В, 4«.Бутйл-1-жарбобензокси- L -пролин.

Масло из п, Б гидрировали в 20 мл

метанола .над 2,1 г 1О%-«ой ifnaTHHbJ на катализаторе Дауэкс 1 под давлением 4О ФУ1ГРЧШ. дюйм (2,8 кг/см ). Катализатор отфильтровали, фильтрат выпарили и получили 6,3 г, 4-бутил-2нкарбобензокси- Ь - 1пролинаВ ввде масла. Этот продукт содержал около 2 ч, .бугал-1-кар6о6ен аокси- Ь -яролина на 1 ч, траяс™4--бу Тйл-1-кар6о6ензокси- L -пролина.

Если нужно, то гидрирование 4-ил1 щеновой группы можно продлить до любой стадий, даже до окончательной.

Заменив бутнлтрифенилфосфонийбромвд из п. Б другими замещенными трифеннл- фосфониЗбромидами, где заместителями яв- лякхгся метил, зтил, пропил, пентил, гексил, геггг0л, ОКТШ1, нонил, девдш, ундецил, доденил тридецил, тетрадеоил, пентадецил, гек саде:ййл, гептадеоил, октадецил, нонадедил н эйкоаил н их изомерные формы или 1шк-

НОПрОПЕЛ, ШОШОбуТИЛ, ШШЛОПеНТИЛ, ЦЙКЛОгексил, пЕхпогептип, никиооктил, 2-1Ш- клопропвлэтйл ИЛИ 3- 1кклопентш1пропил, нл бекэйл, фенегии, 3-фениппропэл, шга фгЕЛметйЛ, получают соответствующие 4

а-алаилиден™, 4-щшлоалкилиден или 4-арал- кшщцен- - карбобензокси-1- 1рощшы вяя; cotxTBeTCjmiiom.Re 4 алкш1, 4-ш клоалЕЮ1 -, ккн 4-аралкйп-Х-карбобензокси- L -про-. лвны. Например, если вместо бутшпрйфенннфосфойнй юмида берут этил- iq OHHii-, Езобузгид-, пеЕтшь- шш гексшЕтрнфенипфосфокжйброкшды, то получакиг 4-этвлиден- -.1-карбобевзоксЕ. Ь -«родаш, 4- изо5утшш дек-1-«ар6э6а83скси- L -проянн, 4-де&тш|Щ{ен-1 Еар6Ьбензоксн- Ц -яролин иин 4-г к;ш1иден--1-жарбобенз Жск- L ipo-. ЙЕН яли иис- И1Щ ранс--4-этил 1-«арбо- бензожсв- It -нролЕН, 4-прошш«-1-карбо- б зоксЕ- L -иролин, 4-ваобутил 1-карfo6 j3oscK- L -прошш, 4-яентал-1-кар.6ofe€4S SCK- L IpOJBffl или 4-4 6X0101-1-«а- 6o6e5J3Oscs- Ь - ipoffiHH, Г. Метил 6 а /ш1 о-6,8-дйдеокси--l-Тиоч D -©ритро- oL - D -галактооктапйра-fнозйд,(с.-МТ1 ),

Раствор 4О г свободного основаниа л нsoivfHUHHa (патент США № ЗО86912) в 2О мл гадрата гндразина () на-:гревада с обратным холодильником в те-

чение 21 ч, затем избыток Хидразкна отогнали а вакууме в атмосфере азота на паровой бане Остаток в виде пастообразной массы кристаллов охладили, добавили ацетонитрил и смесь перемешивали до суспендирования кристаллов. Последние отфильтровьшали.промьти ацетонитрил ом и водой. Получили после сушки в вакууме при комнатной температуре i 21 г (98%) более кристаллического свободного основания. Перекристаллизацию вели из горячего днм:е тилформамида с добавлением равного объема диметилового эфира гликоля.

Метил б-амино-6,8-дидеокси-1-тио- Дэритро- - D -галактоок-гопиранозидкое основание имеет т. пл. 225-228 Q,, оптическое вращение Loljg 276 ( с 0,768, вода), рКа 7,45.

Вычислено, % : С 42,7; Н 7,56; М5,63; S 12,66.

.

Найдено, % : С 42,6; Н 7,49; N 5,75 $12,38.

Если заменить линкомицнн /щугпми ал КЮ1- или цюшоалкил- или аралкил- 6,8- дндеокск-6-(транс-1-метил-4-пропил- Ь-2-пирролидтгакарбоксамидо}- -тао-5 - , ЭрйтрспзС- В галактооктопираноаидами, где алкнл - этил, пропил, бутил, пентил, гек- сил, гептнл, октйл, ноннл, децил, уидедил, додецйл,, тридецил, тетрадецил, пентаде- ЦЕЛ, гексадецнл, гептадецил, октадецил, нонадецкЛр или эйкозкп шга их изомеры, цнклоалкйл, - кдаклотфопил, ыиклобутйл, днклопентнл, дихлогекскл, цвклогептнл, циклооктил, 2-метшщиклопентил- 2,3-ди- .метшншялобутш, 2-метшщиклобутйл или 3-циклоаеитшпфотш- аралквл - бензил, фенетЕл, 3- фенилпропил или 1-нафтш11йетил, то получают соответсхве тно алкшг, цвклоалЕИл или аралкил -в-амнно-6,8-дадес сда-1-тио- В -эритро- ot- В-галактоок- топвранозщуз. Например, заменив линкоми дин этил, пропил-, бутил-, пентил- нлн гексил-6,8 дйдеокиси-6-(транс-1-метйл-4-пропил- ti -2-пкppoлидинкapбoкcaмидo)-l- -чиo- В-эрвтроС (-,. - и -галактооктопираизкдами, получают этил-6-амино-6,8-дидео си-1-тио- Б -вритро- d - В -галактооктопиранозид, пропил-6-амино-6,8-ййдеокси- Э -эритро- at - -галактооктопира нозвд, бутил-6-амино-6,8-яйдеокси-1-тно - В -©ритро- cL Q -галак.тооктопйран эид, пентШ1-6-аминг -6,8-дйдеокси-1-тн В -«ритро- d.- D -гал&ктокотопйравозйд или гексил-в-амино-6,8-дндеокси-1-тио- - Б -ервтро- ct - D -галактооктопиранозвд,

Д. Св1э€юдное основание метил-6,8-ди- деокси 6-.( 1-карбобензокся-4-бутил- Ь - 2-пирролидинкарбоксамидо)-1-тио- D-эритро- cL - 3) -галактооктопиранозида. К раствору 6,3 г 4-бутил 1-карбобензо си- L-пролина (масло из п. Б) в 175 мл перегнанного ацетонитрила, охлажденного до О С, добавили 3,46 мл триэтиламина, а затем 3,34 мл изобутилхлорформиата. ОГ Смесь перемешивали при О С (+ 3 С) в течение 15 мин. Добавили раствор 6,2 г вободного освнования MTL из п.В в 85м воды и реакционную смесь перемешивали при О С в течение 0,5 ч и при 25°С в течение 1ч, Реакционную смесь фильтро вали, сушили. Получили 4,57 г (37,7%) свободного основания метил-6,8-дидеокси6-( 1-карбобензокси-4-бутил- L -2-пир ролидинкарбоксамидо)-1-тио- D -эритро bi. D -галактооктопиранозида. Маточный раствор упарили в вакууме и выделили дополнительно 4,25 г (35,2%) продукта. После перекристаллизации из ацетонит рнла получили кристаллы свободнойго основания метил-6,8-аидеокси-6-( 1нй:арбобенз окси-4-бутил- U - 2-пирролидинкарбокс- амидо) D -эритро- cL - D -галакто- октопиранозида с т, пл. 194-19б с, После повторной перекристаллизации из ацето нитрила получили аналитический образец т. пл, 195,5-200°С, oL3 + 111°(с 0,98, МеОН), Вычислено, % : С 57,75; Н 7,46; N5,13; S 5,93. С бНдо гОвЬ, Найдено, % : С 57,58; И 7,16; N5,50 S 6,07, - Е. Гидрохлорид метил-6,8-дидеокси-6-(4-бутил- LI -2- ирролидинкарбоксамидо) 1-тио- Б -эритро- cL - Т -галактооктоп ранозида. Раствор 7,8 г свободного основания метил-6,8-дидеокси-6-( 1-карбобензокси-4 -бутил- L -2-пирролицинкарбоксамидо-1- -огио- D -эритро- oL - В -галактооктопирано звда из п. Д в 2QO мл метанола взбалтывали над 2 г 10% палладия на угле при давлении 40 фунт/кв. дюйм (2,8 кг/см ) водорода в течение 17 ч. Катализатор отфильтровали, раствор упарили в вакууме, Остаток растворили в смеси 2О мл ацетона и 2О мл воды и подкислили 6 к, соляной кислотой. При разбавлении четырьм объемами ацетона вьшал осадок гидрохло- ,8-д вдеокси-6-(4-бутил- L -2-пирролидинкарбоксамидо)-1-тио- Б - эритро- оС - D -галактооктопиранозида, который отфильтровали и высушили. Вес кристаллов, высушенных в вакууме, при 55°С, 4,7 г, т, пл, 188-194°С, После перекристаллизации из ацетона получен аналитический образец с т.пл. 197-199 С + 150°(вода, с 0,89). Вычислено, % : С 48,80; Н 7,96; N6, 34; S 7,24, Cie «34 Оь S нее . Найдено (с поправкой на 5,54% воды),%1 С 48,58 Н 8,19; N6,04; 5 7,30. Ж. Гидрохлорид мвтил-6,8-дидеокси-6-(1-метил-4-бутил- L «2-пирролидинкарбоксамидо)-1-тио- D .-эритро- оС - 3) - а лактооктопиранозида. Раствор 2,0 г гидрохлорида метил-6,8- -(4-бутил-2нпирролиаинкарбоксамидо) -1го-ио- J -эритро- с1 - D -галактооктопира.нозида из п, Е и 2,0 мл 37%-ного формалина в 150 мл метанола взбалтывали над 5ОО мг 10% паллгщия на. угле при давлении водорода 40фунт/кв. дюйм (2,8 кг/см ) в течение 3,5 ч. Катализатор отфильтровали, растворитель отогнали в вакууме и получили частично кристаллический гидрохл1 рид метил-6,8-дидеокси-6-( 1-метил-4-бу1тил- IJ -2-пирропидкнкарбоксамидо) Т) -эритро- Ы. - В - алактооктопиранози- да. Тонкослойная хроматография на силикагеле с помошью смеси этилацетата, ацетона, воды (8:4:1) для элюированкя и раствора КМт 04 для обнаружения показала, что эТот продукт состоит главным образом из цис- и транс- эпимеров гидрохлорида метил-6,8-дидеокси-6-( 1-метил-4-бутил- I, -2-пирролиаинкарбоксамидо) В - рит-ро- gL - Т) -галактооктопиранозида в соотношении 3:2. 3, Разделение цис- и транс- изомеров хроматографией, : Гидрохлорид метил-6,8-дидеокси-6- 1-метил-4-бутил- Ь -2-пирролидинкарбоксамидо) D -эритро- d.- D -галакто- октопиранозида растворили в смеси метанола и метиленхлорида ( 1 : 1 ) и добавили 1,5мл триэтиламина. К этому раствору добавили 7 г силикагеля и выпарили растворитель в вакууме, при этом антибиотик сорбиро вался на силикагеле, в верхнию часть хроматографической I колонки насьшали 200г силикагеля со смесью |растворителей, соетояшей из этилацетата, ацетона и воды (8:4:1), Колонку 1элюировалн: таким же растворителем. Собирали порции по 20 мЛ. Тонкослойная хроматография каждой пор- ции показала, что 310 мг фракций 31-38i состояли в основном из чистого траноэпимера, 32 мг фракций 49-74 состояли в основном из чистого цис-эпимера и фрай- ции 39-48 состояли из смеси эпимеров. Последние фракции можно было разделить повторной хроматографией. Каждый эпимер, растворили в нескольких каплях разбавленной соляной кислоты, а гидрохлорид высаживали добавлением ацетона. Таким об .разом получили 50 мг гидрохлорида метил-6,8-дидеокси-6-4 транс-1 - 1етил-4- у тил L 2-пирролидинкарбоксамидо) D -эритро- d-- 1) --галактооктопи- ранозида с т. пл. 135-137°С и около 150 мг гидрохлорида метил 6,8-дидеокси« -(цис-1-метнл-4-бутил- Ь -2-Пирролидинкарбоксамидо)1-тио- Э -эритро- cL-J) -галактооктопиранозида, размягчающегося при 105 С с дальнейшим плавлением при 175-185°С; т. пл. транс- эпимера после йерекристаллизации из такого же растворителя 139-141 °С. Вычислено, % : С 49,93; Н 8,16; N 6,13; 5 7,02. 1Лб . с Найдено (с поправкой на 4,07% воды) С 48,81; Н 8,54; j N6,49; S 6,67. Аналогично после(перекристаллизации , цис- эпимера получили продукт, размягчаю щийся при 1О8 С, . далее ;плавя1цийся при 189 С (сольватирован). Найдено (с поправкой на 4,95% воды), С 50,27: Н 9,0; N 6,05;i S 6,65, И, Гидрохлорид метил- в ,8-дидеокси-64.1-атил-4-бутил- L -2-пирролидинкарбокс амидо)-1-аио- D -эритро- d - D -галакто октопиранозида. Смесь 2,0 г гидрохлорида метил-6,8-дидеокси-6-(.)- Ь -2-пирролидин- карбоксамидо)-1-тио- 3-эритро- oL-) нгалактооктопиранозида из части Е, 1,5 мл ацетальдегида, 150 мг 1О% палладия на угле в 15О мл метанола взбалтывали в течение 5,5 ч под давлением водорода 2,45 кг/см-. Катализатор, ;. отфильтрШаЛи в остатке содержались в основном цис- и транс- эпимеры гидрохлорида метил-6,8- ДИдеокси 6-( 1-этил-4-бутил-ипирролидйнкарбоксамидо)-1-тио- D -эрит po-ot- D-галактооктопиранозида. К, Разделение эпимеров. Как описано в п. 3 смесь эпимеров из п. И (2 г) хроматографировали на 2ОО г силикагеля и использовали для элюирования смесь этилацетата, ацетона и воды (8:4:1), Фракции 33-42 представляли соб чистый транс-эпимер, их соединили, фракции 49 - 64, представшие собой чистый цис-эпимер, также соединили, фракции. 43-48, представлявшие собой смесь эпи- меров, очищали повторной хроматографией Каждый эпимер растворили в нескольких каплях разба.вленной соляной кислоты, кри сталлический гидрохлорид осадили разбавл нием большим количеством эфирш. 014 415 мг фракции сьфого транс- эпиме- ра дали 940 мг (15,4%) кристаллического гидрахлорида-6,8-дидеокси-6-(транс-1-этил-4-бутил- i -2-пирролидинкарбоксамидо)-1-чгио- D -эритро- oL - В -галакто- октопиранозида с т, пл, 144-151 С, Пос ле перекристаллизации из разбавленного ацетона т. пл, 148-151 С, 645 мг фракции сырого цис- эпимера дали 30 мг (14,1%) кристаллического гидрохлорида метил-6,8-дидеокси-6-(циc- -1-0тил-4-бутил- Ь -2-пирролидинкарбокс- амидо ) -1 -тио - D -эритро - «А. - D галакто октопиранозида с т, пл, 135-139 С. После перекристаллизация из разбавленного ацетона т, пл, 134-138°С. Транс- эпимерный изомер обладает активностью в 1-1,2 раза большей, чем линко- мицин по пробе S.6utec« , в2-4 ра за большей чем линкомицин против грам- положительных микроорганизмов и в 8 раз большей против грам- отрицательных микроорганизмов. По мышам против S.orureu5 транс- эпимер в 2 раза более активен, чем линкомицин. Активность цис- эпимера составляет 1/2 активности транс-эпиме- ра, Разделение дис- и транс- изомеров не является необходимой стадией, поскольку 2-фосфаты смешанных эпимеров применимы как таковые. Однако желательно, чтобы содержание транс-изомера было большим. Можно легко получать сме- шанные эпимерные продукты, содержа.щие соотношения транс- и цис- эпимеров 3:1 5:1, П р и м е р 6, Метил-6,8-дидеокси-6-(транс-1-метил-4-пропил- Ь -2-пнрролидинкарбоксамидо) -1-тио-1 . - ot- - 3) -галактооктопиранозид-2-4осфат)пилинкомицин-2-фосфат. Заменив линкомицин из примера 1 эпи- линкомицином, получают эпилинкомицин-2- фосфат, Эпилинкомицин получили следую- цшм образом, А, 3,4-О-Изопропилиденлинкомицин, Раствор 9,8 г линкомицина в 15О мл ацетона добавили к раствору 9,8 г п-толуолсульфокислоты- моногидрата в 1ОО мл ацетона при хорошем перемешивании и без действия влаги. Смесь перемешивали при комнатной температуре в те гение 1 ч, после чего добавляли 10О мл безводного эфира и перемешивали на лед5шой бане еще 0,5 ч. Смесь фильтровали, осадок сушили в вакууме при 50 С, выход 13,35 г (85%) 3,4-О- зопропилиденлинкомнцин- -п-толуолсульфоната. Еще 1,15 f (7,4%) можно выделить из маточной жнакэсти добавлением 50 мл безводного эфир:) и охлаждением жидкости n точение 1 ч. Полученные 14,5 г суспендировали в 200 м эфира и взбалгьшалн с 125 мл 5%-ного раствора бик фбомата кплия. Водный слой экстрагировали двумя порциякт эфира по 10О мл. Эфирные экстракты иромывали 50 мл раствора поваронной соли и фильтровали через безводный сульфат натрия. Эфир отгоняли в вакууме. Осталось 7,9 г (73,1%) 3,4-0-изот1ропилиденлинкомицина который растворили в 25 мл этилацетата и вьтарили до 10-15.мл.. Концентра- выдерживали при комнатной температуре несколько часов, затем на ночь замораживали. Кристаллы отфильтровывали от ра створа и промывали холодным этилацета- том. Выход 4,55 г (42,2%) 3,4-0-изо пропилиденлинкомицина с т. пд. 126- oLj 101-102° (с 1, метиленхлорид Б. 7-Дегидро-3,4-О-изопропилиденлинкомицин. К раствору 6 г (О,0135 моля) изопро- пилиденлинкомицина в 75 мл пиридина доб вили 12 г (избыток) окиси хрома, при. этом раствор нагрелся до 20 С. Через 1 ч смесь добавили к раствору, содержащему 25О мл этилового эфира и 25О мл этилацетата. Затем смесь фильтровали и вьшаривали до сиропа, получали 8,4 г. Этот сироп распределили противотоком в колонке на 500 точек, применяя систему вода- этилацетат - этанол - циклогексан (l:l:l:l). 7-Дегидро-3,4-0-изощ)опилиденлинкомицин выделили в пиковой фракции из пробирок 330-38О, рК 2,45. Вычислено, % : С 56,72; Н 8,16; N 6,30; S 6,84. CaiHja.NaOe, Найдено, % : С- 56,37; Н 7,64; N 6,51; 8 6,84. В. 3,4-гО-Изопропили,ценэшшинкомицин. К 1,6 г чистого по Крейгу 7-дегидро-3,4-0-изопропилиденлинкомииина в 75 мл метанола добавили 400 мг боргидрида натрия. Через 1,5 ч этот раствор выпарили досуха на роторном испарителе. Остаток добавили к 25 мл воды и трижды экстрагировали по 25 мл метил хлорида. Экстракты промыли 15 мп воды, высушили над хлористым магнием и вьшарили досуха. Остаток ( 1,4 г) подвергли обработке на противоточной распределоительной установке на 5ОО точек, используя систему вода-, этилаиетат- этанол- цик- логексан (1:1:1:1:1). Одиночный пик,с01 пасующийся с теоретическим, наблюдался (фи К 1,05. Вещество из пробирок 24О 28О было выделено в виде сиропа. Р,1числено, % : С 56,47; II 8,58; N6,27; 67,18. С.НздНр б Найдено, % : С 56,24; Н 8,54; 6,13; S 7,01. Тонкослойная хроматография, показала, что вещество состоит из двух соединений 3,4,-0-изопропилиденлинкомици.на и 3,4-0-изопропилиденэпилинкомицина. Г. Эпилинкомицин. Сироп из п. В хранили при комнатной температуре 5 ч в растворе, содержащем 6О мл 0,25 Н. соляной кислоты; и 4О мл этилового спирта. Затем его выдержали при О С 4 дня. После нейтрализации бикарбонатом натрия его выпарили до 25 мп и экстрагировали хлороформом. Экстракт промыли небольшим количеством воды и сушили над сульфатом магния, затем вьта- рилидо остатка. Тонкослойной хрома- тогра4и1ей показано наличие двух веществ, активных против S. Со tea . Остаток хрома- тограф1фовали на колонке 3/4 х 14 дюймов, заполненной флорисилом (синтетический силикат, описанный в патенте США № 2393625), которую градиентно промывали растворителем, непрерывно менявшимся от 10О% скеллисолва В до 1ОО%. ацетона. Общий объем ацетона. Общий эбъем жидкости .500О мл. Таким образом разделили оба вещества. Фракция 1: пробирки 53-65 (погойы по 40 мл) , ЭПИЛИНКОМИЦИН. Проба 45О мкг/мл, проба на линкоми- Вычислено. % : С 50,92; Н 8,55; N 6,60; 57,56., Ct6 - Найдено, % : С 5О.19; Н 7,91; N 6,О5{ 5 6,42. Фракция 2: пробирки 73-1О4, линкомишш. Проба 950 мкг/мп. Заменив тганкомицин сбответствуляцими аналогами линкомицина, получилиСОС тввт(г вуюшие аналоги эпипинкомицин-З-фэсфз-г тов...... Поэтому все описанные соединения имеют их противоположности по конфигурации, т. е. конфигурацию, вытекающую из 7-эпиформы. Все вышеописанные соединения имеют их противоположности в 7- ( S ) -хлор-7- 1еркси-, 7( R ) -хлор - 7 -деокск-, 7-( S )-бр«и - -йеокси-, 7-( S )-бром-7-деокси-чзяаяогах. П р и м е р 7. Ликкомтшн-2-фосфа1. кальойя. Раствор 5,0 г линкомицин-2-4осфата в 4О мл воды смешали с раствором, содержащим 1,47 г хлористсто кальция и 5 мл концентрированной гидроокиси аммо-