Способ диагностики аскариоза у свиней Советский патент 1981 года по МПК A61B10/00 

1

Изобретение относится к области ветеринарной гельминтологии, . в частности к способам ранней диагностики аскаридоза у свиней.

Известны различные способы диагностики ранней фазы аскаридоза у свиней, например основанные на реакции микропреципитации с живыми личинками, реакции связывания комплемента, реакции кольцепреципитации, реакции непрямой гемагглютинации, реакции флокуляции на .кармине, кожных аллергических реакциях, реакции оседания эритроцитов,исследовании летучих жирных кислот в моче животных и другие способы.

Известен также способ диагностики аскаридоза, основанный на применении реакции гемагглютинации,включающий сенсибилизацию антигена и соединение его с антителс1ми сыворотки крови исследуемого животного.

Антиген готовят из живых личинок аскарид, вносят его в исследуемую сыворотку с последующей инкубацией при 40°С в течение 12 ч.

Однако этот способ отличается трудоемкостью и требует больших затрат времени на получение живых личинок аскарид (не менее 67 дней),

при этом использование личинок для диагностических целей ограничено продолх ительностью их жизни вне организма промежуточного хозяина 12 днями, в результате чего известный способ не нашел и:ирокого применения в ветеринарной практике.

Целью изобретения является более раннее выявление (fi возрасте от

0 14 дней и старше) личиночной стадии заболевания свиней аскаридозом при значительном сокращении материальных затрат и упрощение методики выявления заболевания.

5

Это достигается тем, что вместо специфического антигена, приготовленного из личинок аскарид, используют антиген, подобный специфическому, стандартные эритроциты свиней

0 с Ас фактором системы А групп крови на повер ности стромы, сенсибилизацию которых проводят сывороткой крови исследуемых животных с последующим соединением их со стандартной

5 антиглобулиновой сывороткой и учетом результатов реакции по титру неполных анти-Ас антител, идентичных или подобных специфическим антителам, возникающим в крови при миграции

0 личинок Asearis suum.

Способ осуществляют следующим образом.

С±андартную антиглобулиновую сыворотку готовят 1 раз в 2-3 года иммунизацией кроликов у -глобулинами смешанных сывороток крови от 4|5 свиней любым известным способом.

Стандартные эритроциты с Ас фактором системы А групп крови на поверхности стромы определяют у свиней непосредственно в конкретном хозяйстве моноспецифической сывороткой которая имеется в любой им /Iyнoгeнeтической лаборатории научно-исследовательских институтов животноводства.

Сыворотку для ранней диагностики аскаридоза получают из крови молодняка свиней 2-недельного возраста и старше. Образцы крови после предварительной обводки ставят на 1 ч в термостат при 37°С, затем сгусток кр ви убирают, а полученную сыворотку в пробирке центрифугируют 5 мин (при 2000 об/мин) для удаления остатка эритроцитов, после чего ее сливают в отдельную маркированную пробирку .

На каждый образец готовят 10 иммунологических пробирок 1008 мм, в которых из образцов сыворотки на физрастворе приготавливают разбавления №.2:4:8:16:32:64:128:256:51

В каждую пробирку добавляют по 1 капле 2,5%-ной суспензии стандартных эритроцитов, встряхивают содержимое пробирок и помещают штативы на 30 мин в термостат при З7с. После тщательного встряхивания штативы оставляют в термостате еще на 1 ч. В этот период происходит сенсибилизация Ас позитивных эритроцитов,т.е. фиксация на их поверхности антител, возникающих в крови больных свиней при миграции личинок аскарид.

Следующий этап заключается в проявлении скрытой реакции антигенантитело. Сенсибилизированные эритроциты отмывают 2 раза физраствором от сыворотки, последовательно центрифугируя каждый раз при 2000 об/мин по 5 мин и отсасывая надосадочную жидкость.

К осадку добавляют 1-2 капли антиглобулиновой сыворотки, встряхивают, оставляют на 15 мин и затем все пробирки центрифугируют при 1000 об/мин в течение 2-3 мин.Расставляют пробирки в том порядке,в каком они были бы при первоначальном титровании и производят макроскопическое чтение реакции гемагглютинации по обычной пятибальной системе.

Титр сыворотки от 2 до 512 характеризует различную интенсивность заражения животного паразитами.

.Предложенный способ позволяет значительно снизить затраты рабочего времени, труда и средств на диагностику ранней стадии аскаридоза у свиней, упростить методику выявления заболевания.

Применение предложенного способа позволяет больных животных с 14-ти дневного возраста при достаточной его специфичности lo 80%, что дает возможность -проводить- эту работу непосредственно в ветеринарных лечебницах как в крупных промышленных комплексах, так и в небольших хозяйствах.

Формула изобретения

Способ диагностики аскаридоза у свиней по реакции гемагглютинации, включающий сенсибилизацию антигена и соединение его с антителами сыворотки крови исследуемого животного, отличающийся тем, что, с целью более раннего выявлени аскаридоза у свиней, в качестве антигена используют стандартные эритроциты свиней с Ас фактором системы А групп крови на поверхности стромы сенсибилизацию которьйх проводят сывороткой крови иccлeдye tt JX животных с последующим соединением их со стандартной антиглобулиновой сывороткой и учетом результатов реакции по титру неполных анти-Ас антител, идентичных или подобных специфическим антителам, возникакяцим при мигAscaris suum.

рации личинок