Раствор для замораживания костного мозга Советский патент 1978 года по МПК A01N1/02 

Изобретение относится к медицине, а. именую к культивированию и трансплантаци биологических тканей. Известен раствор для замораживания костного мозга, содержащий поливинилпирр .лидон ij , Одна.ко известный раствор не обладает высоким криозащитным действием на клетк костного мозга. Цель изобретения г повышение криозащит ,ного действия на клетки костного мозга. Цель достигается тем, что раствор дополнительно содержит желатин медицинский динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, глицерин, натрий лимоннокислый трехзамешенный, гемоцез при сдедующем соотношении взятых компонентов, вес 1,9-2,5 Желатин медицинский Динатриевая соль этилендиаминтетраук- 0,09-0,1 сусной кислоты Натрий лимоннокислый 0,9-1,2 трехзамешенный 6,О-7,0 Глицерин Поливинилпиррол.идон6,8-7,2 ГемодезОстальное Приготавливают раствор следующим о&разом. Взвешивают необходимые навески и расворяют их в гемодезе в следующей последовагельности. В 2/3 всего объема гемодеэа расторяют навеску поливйнилпИрролиаона, затем обавляют необходимые объемы желатина и глиерина. Отдельно в большом объеме гемодеза астворяют динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты и цитрат натрия, после чего растворы веществ смешивают и добавляют гемоаез до нужного окончательного объема. Определяют рН раствора и доводят его до 7,,2 с помощью 2 н. раствора едкого натра.. Раствор фильтруют через ватно-марлевый фильтр.и разпивают в стандартные флаконы емкостью 25О мм. Флаконы укупоривают резиновой пробкой, завальцовывают и завязывают в двойные бязевые мешки. Стерилизуют в автоклаве при 1,2 атм, ЗО 1мин. После стерияизации растворы можио хранить в холодильнике при до 6 месяцев. Готовый раствор представляет собой про зрачную жидкость желтого цвета со слабьм .запахом поливинилпирропидона. При хранении в холодильнике преврашает ся в студенистую массу {гель), которая пр комнатной температуре сновапревращается в жидкость. Раствор хорошо смешивается с взвесью костномозговых клеток, предотвращает их конгломерацию, обеспечивает хорошую морфологическую сохранность ядросодержащих клеток при положительной температуре. Раствор обладает более выраженными ограждакадями свойствами. При заморажива нии костного мозга животных сохраняется более высокий процент У( 63,,1%) стволовых гомопоэаических клеток. Такой костный мозг, введенный смертельно облученным мьшам (при дозе 88О Р), повышает выживаемость: животньтх почти в такой же степени, как свежезаготовленный костный мозг. В экспериментах на животных (кроликах и мышах) установлено, что ограждающий раствор нетоксичен, апирогенен, не обладае алергенными свойствами.. Предлагаемый раствор обладает вьюоким иозавдитным действием на клетки костного Формул изобретения Раствор для замораживания костного зга, содержащий поливинилпирролидон, тличающийся тем, что, с лью повышения криозащитного действия нь етки костного мозга, он дополнительно держит желатин медицикский. динатриею соль этилендиаминтетрауксус 1ой кисло, глицерин, натрий лимоннокислый трехмещенньй, гемодез при следующем соотшении взятых компонентов, вес. %: Желатин медицинский 1,9-2,5 Динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты О-О9-0,15 Натрий лимоннокислый трехзамещенный 0,9-1,2 Глицерин 6,0-7,0 Поливинилпирролидон 6,8-7,2 Гемодез Остальное Источники информации, принятые во вни ие при экспертизе: 1. Лаврик С. С. Консервирование кост о мозга, Киев, 1975.