Способ очистки основы питательной среды для выращивания микроорганизмов Советский патент 1978 года по МПК C12K1/06 

10 л дистиллированной воды, которая внесена в общий объем фкльтрата.

Выход фильтрованного гицролизата состабляет 78 л. В него вводят 5 н. соляную кислоту ий расчета 20 мл на 1 л фильтрата. Величина рН снижается ао 7,1. Гидролизат прозрачный и сохраняет прозрачность после автоклавирования при температуре 11О°С в течение ЗО мин.

Гидролиэат имеет следующие химич кне показатели:

Аминный азот26О мг%

Хлоридов в пересчете

на хлор-ион1,25%

Фосфатов20 мг%

Сухих веществ9%.

В таком Биае гицролизат пригоден для использования в широкой бактериологическ практике в качестве основы для жидких и плотных питательных сред.

В табл. 1 приведены данные роста патогенных микроорганизмов на полученной основе.

Таблица 1

возбудителей. Основа, полеченная по предложенному способу, имеет.полную прозрачность, котора сохраняется и при подщелачивании, и при стерилизации. Основа, полученная по известном способу, имеет значительную устойчивую Q муть, Щ)И подщелачивании. происходит усиле ние мутности, при стерилизашш мутность значительная, вьтадает осадок. П р и м е р 2. 14 кг сухих углеводородокисляющих дрожжей размешивают с 200 водопроводной ВОДЬ, После выдержки в течение ЗО мин дрожжевую массу отделяют центрифугированием на сверхцентрифуге. Фу гат, собранный в количестве 17О л, Koifrцентрируют выпариванием при 95 С до объема 15 л. Затем к концентрату добавляют 20% известкового молока из расчета 10 г Са(ОН)2 на 1 л ковденчрата (всего 750 мл). Смесь нагревают до 70 С,рН смеси достигает 10,6. Затем в горячую смесь дробными порциями добавляют сухой кристаллический цвузамещенный фосфорнокисль 4 натрий под Контролем качественных проб на иой кальция н фосфат-иок в растворе до исчезноьения положительной реакции на кальций и появления слабо положительной рекацци на фocфat. Расход фос фата составляет 8.1 г на 1 л концентрата fscero 120 г) рН смеси снижают до 9,3. Смесь прогревают пои 70 С в течение 15 мин и профильтровывают под давлением через бельтинг. Фильтр промывают 2 л О,О5%-ного раствора двузамешенного фосфорнокислого натрия. Выход фильтрата с промывньлии водами составляет 11,5 л. Реакцию (фильтрата устанавливают 18%-ной соляной кислотой на уровне 7,1 на что расходуют 37О мл раствора кислоты. Нейтральный 4ильтрат высушивают в распылительной сушильной установке. Он поступает в употребление в качестве дрожжевой основы питательных сред. Это сыпучий, светло-желтый порошок с характерным запахом дрожжей, гидроскопичвый. Сухая дрожжевая основа имеет следующие химические показатели; 4,8% Общий азот 3,5 мг% А Минный азот 27,5% Хлориды в пересчете 11,2% на хлор О,1% Полная Растворимость и быстрая В табл. 2 фиведены даинь роста патогенных микроорганизмов на средах из uyxoro дроижвэого экстракта.

.ерЗ,К 5О л казеинового гидролизата, полученного известным способом путем нагревания казеина с восьмикратным количеством 5%-ного раствора соляной кислоты под давлением, добавляют 3,3 л 20%-ного известкового молока и смесь нагревают до 75 С. В смеси устанавливают рН 10,8. Затем дробными порциями в гидролизат добавляют двузамешенный фосфорнокислый натрий в вице горячего раствора, содержащего 1 кг соли в 1 л до исчезновения положительной качественной реакции на кальций и появления слбо-положительной реакции на фосфат-ион. Расход фосфорнокислого натрия составляет 1О,2 на 1 л гидролизата. рН смеси снижают до 0,1.

Температуру смеси снова Поднимают до ,75 С и выдерживают в течение 15 мин, после чего удаляют вьтавшнй осадок фильтрацией под давлением через бельтинг, Фильтр промывают 1О л О,О5%-ног6 раствоV-choEeraeЖидкая

Плотная YpeetifiПлотная

Таблица 2

ра цвузамещенного фосфорнокислого натрия. Выход с добавленяы и в фильтрат промывными водами 41 л Добавлением 1,6 л 5 н, соляной кислоты реакцию фильтрата доводят до 7,0, после чего :подвергают- его стерилизации при 110 С в течение 30 мин.

Полученная казеиновая основа питательнь сред имеет следующие показатели:

Сухих веществ12,1%

Общий азот1,15%

Аминный азот480 мг%

Хлориды в пересчете на хлор-иен2,2%

Фосфаты, мг%38

ПрозрачностьПолная

Прозрачность после

стерилизацииПолная

Из полученной основы по общепринятым прописям приготовлены жидкие и плотные питательные среды (результаты испытаний их ростовых свойств приведены в табл. З).

Таблица 3

Типичная

72+10

Типичная Та же

38+6 Та же

66+6

7

Преплагаемая основа обладает преимуществом по сравнению с известной по такому важному физическому свойству как прозрачность. Среды, приготовленные из нее, являются более продуктивными при йырашявании патогенных микроорганизмов. V

Эффект от применения изобретения наблюдается в повышений качества и стандаргг- ности применяемых в медипине, ветеринарии я других отраслях питательных бактериологических сред. При помощи предлагаемого способа для изготовления полноценных питательных сред могут быть использованы новые, ранее не применявшиеся виды сырья {в том числе непищевые). Благодаря этому снижается стоймость сред и для пищевой промышленности сохраияется мясо и другие ценньш продукты.

611933

8 Формулаизобретения

Способ очистки основы питательной среды для выраишвания микроорганизмов, полученной из белково-витаминного сырья, от. балластных примесей с применением фильтрования, отличающийся тем, что, с целью повышения качества, к полученной основе добавляют гидрат окиси кальция до рН 10-10,5, смесь подогревают до 70-75° добавляют двузамещенный фосфорнокислый натрий, смесь выдерживают при указанной температуре, а затем в фильтрат добавляют соляную кислоту до рН 7,О-7,2,

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Лабинская А. С. Микробиология с Tejtникой микробиологических исследований, М., 1972