Способ определения морозостойкости растений Советский патент 1978 года по МПК A01H1/04 

Изобретение относится к селекции растений и может быть использовано для определения морозостойкости растений.

Известен способ определения морозостойкости путем предварительной обработки высечки из зеленого листа минусовыми температурами 1 и 2.

Недостатком этого способа является то, что морозостойкость растения определяется не раньше фазы кучнения.

Известен также способ определения морозостойкости растений путем регистрации вспышек сверхслабого свечения при быстром размораживании растений или семян в дистиллированной воде 3.

Недостатком такого способа является то, что после проведения анализа растение уничтожается и невозможно получить от него урожай. Кроме того, нельзя оценить индивидуальные растения в селекционно-генетических исследованиях наследования уровня генетической морозостойкости.

Целью изобретения является выявление морозостойкости в фазе прорастающих семян и сохранение анализируемого растения для получения урожая.

Достигается это тем, что информация генетической морозостойкости снимается путем цитологического анализа клеточных ядер как центров генной регуляции путем отбора проб от колеоптилей прорастаюш,его зерна, а само зерно высаживают для получения урожая.

При кратковременном воздействии на растения стрессовым фактором (низкая температура) на клеточном уровне происходит активация зашитно-приспособительных механизмов, заключающаяся в различной интенсивности синтеза нуклеиновых кислот. Более активно синтезируют нуклеиновые кислоты в этот период устойчивые формы растений.

Способ осуществляют следующим образом. Семена замачивают в течение 2 час в водопроводной воде, раскладывают в чашках Петри на влажной фильтровальной бумаге и проращивают в термостате при 20- 25°С. При достижении длины колеоптиля 5- 8 мм от каждого проростка лезвием бритвы отделяют кончик колеоптиля длиной 2-3 мм без повреждения первого листочка. После взятия пробы проросшее зерно высаживают в субстрат для получения урожая. Кончик колеоптиля, взятый для анализа, разрезают вдоль на две части, одну из которых охлаждают в холодильнике при температуре от -1 до +3°С в течение 24 час для активации наследственного механизма формирования морозостойкости, другую (контрольную) выдерживают 24 час при исходной температуре на влажной фильтровальной бумаге. По истечении указанного времени части колеоптиля фиксируют спиртовоуксусным фиксатором в течение 1 час, затем переносят в 75%-ный спирт, где пробы можно хранить для анализа продолжительное время. Анализ состоит в приготовлении из колеоптилей постоянных цитологических препаратов по известной методике 1, окрашивании, этих препаратов красителем на нуклеиновые кислоты - галлоцианин - хромовые квасцы, количественном определении цитофотометрическим методом содержания нуклеиновых кислот в клеточных ядрах, расположенных в топографически идентичных районах колеоптилей и вычислении среднего содержания нуклеиновых кислот в клеточно.м ядре, а также сравнении вариационных кривых содержания нуклеиновых кислот в ядрах сравниваемых частей колеоптиля. По из.менению содержания нуклеиновых кислот в клеточных ядрах под влиянием 24 час охлаждения колеоптиля судят о степени морозостойкости растения: у высокоморозостойких растений содержание нуклеиновых кислот в ядре при охлаждении увеличивается, у неморозостойких - уменьшается или остается без изменений. Приготовленные препараты могут храниться в темноте неограниченно долгое время Формула изобретения Способ определения морозостойкости растений, включающий отбор проб с последующей обработкой их минусовыми те.мпературами, отличающийся тем, что, с целью выявления генетической морозостойкости в фазе прорастающих семян и сохранения анализируемого растения для получения урожая, пробы берут из верхней части колеоптиля, выдерживают в течение суток при те.мпературе от -1 до Ч-3°С, фиксируют в спиртово -уксусном растворе и определяют морозостойкость цитохимически.м способом. Источники инфор.мации, принятые во внимание при экспертизе: 1.Конарев В. Г., Тютерев С. Л. Методы биохимии и цитохимии нуклеиновых кислот растений. Л., «Колос, 1970. 2.Авторское свидетельство СССР Л 217115, кл. А 01 И 1/04 1966. 3.Авторское свидетельство СССР , 353684, кл. А 01 1/04, 1970.