Способ определения эффективности лечения туберкулеза Советский патент 1978 года по МПК A61B10/00 

1

Изобретение относится к области медицины, в частности к биохимическим исследованиям, и может быть использовано для определения эффективности лечения туберкулеза в динамике.

Известен способ определения эффективности лечения туберкулеза путем выявления противотуберкулезных антител в сыворотке крови больных туберкулезом с помощью серологических тестов: реакции непрямой гемагглютинации реакции связывания комплемента .

Известен также способ -оп ределенияэффективности лечения туберкулеза путем инкубирования пробы гепаринизированной крови с туберкулином, отделения надосадочной жидкости и определением степени гемолиза .

Однако известные способы не обеспечивают высокой точности определения

Целью изобретения является повышение точности определения.

Эта цель достигается тем, что равные количества надосадочной жидкости вводят в равные объемы бензидинового реактива и по разности интенсивности гемолиза до и после лечения определяют эффективность лечения.

Способ осуществляют следукицим об разом.

Инкубации подвергают пробы исследуемой гепаринизированной крови в присутствии возрастающих доз туберкулина в физиологическом растворе. После инкубации отделяютнадосадочную жидкость которую помещают в одинаковые количества бензидинового реактива, в результате чего получают растворы разной степени окраски, характеризующие выраженность гемолиза. Фотоэлектроколориметрическим способом объективно и точно оценивают степень окрашивания во всех пробах и, путем сравнения показателей, выявляют пробу с максимальным гемолизом, количество туберкулина в которой пропорционально количеству . антител. Пробу с максимальным гемолизом условно выражают в единицах концентрации туберкулина. Это позволяет путем сравнения оценивать иммунологическую резистентность организма в процессе лечения для одного больного.

Максимальный гемолиз наступает в пробе с пропорционально одинаковыми количествами антигена и антител. При пропорционально одинаковых количествах антигена и антител их взаимодействие приводит к агглютинации эритроцитов и лизису последних под влиянием комплемента. Нарушение пропорциональности в ту или иную сторону уменьшает степень гемолиза, а вместе с тем и окраску раствора, так как избыточные антитела, блокируя антиген, препятствуют его адсорбции на эритроцитах. Это уменьшает агглютинацию эритроцитов и их гемолиз. Избыток же антигена блокирует активные центры антител благодаря чему агглютинация становитс менее выраженной, и уровень гемолиза падает. Установлено,что максимальный гемоЛИЗ в пробах с максимальной концентра цией туберкулина на взятые дозы иссле дуемой среды с предельно высоким уров нем противотуберкулезных антител является показателем высокой иммунологи ческой резистентности организма. Максимальное окрашивание в пробах с минимальными концентрациями туберкулина соответствует низкому уровню антител и низкой иммунологической резистентности. Смещение зоны максимального гемолиза от малых концентраций туберкулина к большим в процессе лечения является показателем нарастания иммунологической резистентности и объективным критерием эффективности проводимого лечения. Пример. В начале лечения пробы гепаринизированной крови по 0,02 мл помещают в возрастающие концентрации туберкулина от О до 4,О мг/мл с интервалом 0,5 мг/мл в одинаковых количествах физиологического раствора, например по 0,3 мл. Смесь инкубируют 2 часа в термостате при температуре 37 С, периодически помешивая. Инкубация закан чивается в последующие 2-3 суток-при температуре 20-25С до появления первых визуальных признаков гемолиза в любой из опытных проб. После этого отделяют надосадочную жидкость в количестве 0,1 мл из каждо пробы и помещают в одинаковые количества бензидинового реактива, например по 1,5 мл. Степень окраски оценивают количественно на фотоэлектроколориметре и выявляют пробу с максимальным гемолизом, количество туберкулина в которой является показателем уровня антител и характеризует исходное состояние иммунологической резистентности организма. В процессе лечения с интервалом 15-30 суток исследование повторяют, вычитают предыдущий показатель из последующего и, если разность меньше нуля, лечение считают эффективным, а при разности большей или равной нулю при максимальных концентрациях туберкулина - лечение неэффективно. Способ позволяет объективно и с высокой точностью судить об эффективности проводимого лечения уже через 15-30 суток от начала лечения. Это дает возможность своевременно, не ожидая результатов рентгенологического исследования, менять лечение при его неэффективности. Формула изобретения Способ определения эффективности лечения туберкулеза путем инкубирования пробы гепаринизированной крови с туберкулином, отделения надосадочной жидкости и определением степени гемолиза, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения, равные количества надосадочной жидкости вводят в равные объемы бензидинового реактива и по разности интенсивности гемолиза до и после лечения определяют эффективность лечения. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: 1.Проблемы туберкулеза , 1976, ( 5, с.40-43. 2.Авторское свидетельство СССР № 271726, кл. А 61 В 10/00, 1966.