Микроколоночный радиохроматограф Советский патент 1979 года по МПК G01N31/08 

(54) МИКРОКОЛОНОЧНЫЙ РАДИОХРОМАТОГРАФ

если его активность не менее 3 ООимп/сек. Учитывая, что число пиков может достигать 5О -f 60, ясно, что устройство не сможет разрешить их все, особенно это относится к послеаним 1икам.

Чувствительность описанного радиохроматографа не менее устроенного среднего квадратичного отклонения от суммарной активности в пробе и является недостаточной.

Цель предлагаемого изобретения повышение чувствительности измерения.

Поставленная цель достигается за счет того, что радиометрический детектор снабжен дополнительным спиральiibiM капилляром, установленным параллельно первому капилляру, выходы обоих капилляров через двухлозиционный переключатель подключены к насосу и. сливной емкости, а между выходом из кблойки и входами в капилляры установлен второй двухпозициониый переключагепь, к которому подключен микроколлектор фракции.

На фиг. 1 схематически изображена схема микроколончатого хроматографа; на фиг. 2 дан график изменения скорости счета импульсов от первой и второй накопительной кюветы в зависимости от вида реальной хроматограммы.

Градиентное устройство 1 соединено с кнопкой 2. Между автоматическими кранами-переключателями 3 и 4 включены два накопительных спиральных капилляра 5 и € с объемом порядка sbO-lOOO мкл. Они расположены в иммерсионной жидкости между входными окнами световодов 7 и 8. К кранупереключателю 4 подключен микроколлектор 9 фракций, а к крану 3 шприцевой микронасос 10, заполненный химически инертной жидкостью в Количестве,. Не менее суммарного объема элюата К крану 3 подключена также сливная емкость, 11. Насосы, детекторы, краны и коллектор фракций подключены к управляющему блоку.

Работа предлагаеммо: микроколоночного радиохроматографа заключается в следующем.

Из градиентного устройства 1 подают элюирующий раствор на микрокопонк 2, при этом происходит разделение смеси меченных веществ.

Пусть в начальный момент краныпереключатели 3 и 4 находятся, в положениях, обозначенных на фиг. 2 сплошной линией. При этом элюат поступает

в спиральную накопительную кювету 5 радиометрического детектора, а залолняюший ее раствор выдавливается в сливную емкость 11,

Радиометрический детектор регистрирует входящий в него пик меченого вещества по нарастанию скорости счета импульсов схемой совпадений. При этом управляющий блок получает информацию о моменте начала выхода пика (начало повышения скорости счета над фоном), о моменте выхода максимума пика (максимальное приращение скорости счета) и о моменте окончания пика (окончание роста скорости счета).

В случае, если пики недостаточно разделены, об окончании первого из них свидетел: ствует сигнал, В момент окончания выхода пика одновременно по сигналу вычислительной управляющей системы срабатьшают краны-переключатели 3 и 4, переходя при этом в положение, обозначенное двойным пунктиром. Накопление элюата начинает происходить в капиллярной кювете 6. В момент срабатывания кранов 3 и 4 начинает работать насос 1О, который подает в накопительную кювету 5 химически-инертную жидкость и выдавливает зону, содержащую уже измеренный пик ,в коллектор 9 фракций. При этом объемную скорость подачи насоса 10 выбирают такой, чтоЗы для управляющего блока, в который поступают импульсы от схемы совпадеНИИ, процесс выдавливания пика из кюветы проходал мгновенно, то есть был бы меньше времени .осреднения измерителя скорости счета.

Реально это процесс может длиться от единиц до десятков секунд.

В процессе выдавливания в коллектор хроматогра4и1ческой зоны происходит срабатывание коллектора 9 фракций в момейт, когда из накопительной кюветы полностью вышел активный пик, так что промежуток между пиками собирают в отдельную емкость коллектора. Команду на срабатывание коллектора подает управляющий блок на основании информации о моментах начала накопления пика и eroi конца

Точки, соответствующие началу , максимуму и концу пиков которой отмече- ны цифрами 1-14 на горизонтальной оси (см. фиг. 2).

Периоды накопления для каждой кюветы обозначены горизонтальными стрелками, границы периодов определяются точками 3, 6, 9, 12. Вертикальные участки интегральных кривых соответствуют процессу мгновенного выдавливания хроматографических зон из кювет. Обнаружение точек 1, 4,7,10,12 фиксируется управляющей вычислительно системой, поскольку они служат для управления работой коллектора фракций в процессе выдавливания :фоматографичес ких зон. Интервалы срабатывания коллектора в этом случае во столько раз короче реальных продолжительностей пика, во сколько раз объемная скорость подачи раствора насосом превосходит объемную скорость элюата, В точках 2,5,8,, 11,13 наклон интегральных кривых максимален и они идентифицируются вычислительной системой как максимумы хроматографических пиков. На основании изменения суммарной скорости счета в обеих кюветах управляю шее вычислительное устройство воспро1ИЗВОДИТ форму реальной радиохроматограммы в дифференциальной форме. 1 изобретения Формула Микроколоночный радиохроматограф, содержащий градиентное устройство, колонку, насос, радиометрический детектор со спиральным капилляром, микроколлектор фракций и управляющий блок, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности измерения, радиометрический детектор снабжен дополнительным спиральным капилляром, установленным параллельно первому капилляру, выходы обоих капилляров через двухпозиционный переключатель подключены к насосу и сливной емкости, а между выходом из колонки и входами в капилляры установлен второй двухпозиционный переключатель, к которому подключен микроколлектор фракции.. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе l.NucBear llnstrum Metodes, /1О2, 2, 257-60, 1972. 2. Авторское свидетельство СССР № 525881, кл. Cj О1 N 31/08/ 27.О5.75.

гП

иииии

./

1

ftoKonjieHue

i 1

s

I

23 t 5 6 f 8 9 W

ffoffotifl як

fOKot оени

/

X

Jic(ifan/ie.

HaifanfleHiie

/

/

у

V

/

/

X

/

/

11 iy 13 n

Фич z