Способ получения нуклеопротеида вируса гриппа Советский патент 1979 года по МПК A61K38/16 A61K35/76 

тиа получают центрифугированием в пинейном градиенте концентрации глицерина 15-30% при 16 000 об/мин в течение 18 часов. Фракции нуклеопротеида диаЯизуют в течение 18 часов при против буфера Трис-НС1 О,02 М рН 7,4 содержащего 0,О2 М V аС1 0.002 М ЭДТА.

Чистота препарата нуклеопротеида контролируется электронномикроскопичеоки и иммунологическя. Препарат сюдержит только спирали нуклеопротеида диаметром около 15 нм.

Препарат нуклеопротеида, полученный предлагаемым способом, антиг нно монолитен, стимулирует при введении крысам преципитирующие антитела только к нуклеопротеиду, но не к оболочечньгм белкам. В реакции преципитации выявляется одна полоса, отражающая взаимодействие антнсыворотки с нуклеопротеид- ным антигеном испытуемого вируса гриппа рода А. Реакция преципитации не наблюдается с хозяйским компонентом хориоаляантоиеной оболочки куриного эмбриона нуклеотидным антигеном штамма В /Ьее/40 и парагриппозного Сендай,Предлагаемый способ позволяет полностью устранить загрязнение препарата побочными белками, что в свою очередь, предотвращает ошибки при изучении аминокислотного состава, пептидных карт и морфологических характеристик при исследовании эпидемически активных штаммов вируса гриппа на молекулярнобиологическом уровне.

Высокая степень чистоты и антигенная гомогенность препарата нуклеопротеида позволяют использовать его для получения высокоактивных моноспецифи-

ческих антисывороток гриппа А и В, необходимых для тонкого антигенного анализа штаммовых отличий в нуклеопротеиде, а также выявления роли вирусов гриппа животных в происхождении пандемических штаммов.

Формула изобретения

Способ получения нуклеопротеида ви- руса гриппа путем обработки детергентом с последующим выделением целевого продукта экстракцией, эфиром и градиентным центрифугированием, о т л и- чающийся тем, что, с целью повыщения чистоты препарата, вирус предварительно обрабатывают бромлайном, выделяют субвирусные частицы дифференциJiльным центрифугированием и обрабатывают их детергентом. Источники информации, принятые во

внимание приэкспертизе

l.J.V r Eogif 1972, 10. 795-.800.