Способ стерилизации сосудистых аллотрансплантантов с одновременным консервированием Советский патент 1979 года по МПК A61L2/18 

1

Изобретение етносится к области медицины, а именно трансплантологии, и может быть использовано для стерилизации сосудистых аллотрансплантатов в растворах 1.

Однако известный способ достаточно сложен, поскольку требует дополнительных трудозатрат на выделение трансплантатов в стерильных yc.rtoвиях.

Целью изобретения является упрощение способа за счет исключения необходимости стерильных условий, выделения трансплантатов.

Это достигается тем, что по предлагаемому способу вначале аллотрансплантаты выдерживают в растворе, содержащем смесь этанолмеркурхлорид цетилпиридиний хлорид:бидистиллированная вода(0,8-1,2) :(О,8-1,2) : (927,6-998,4), при этом аллотрансплантахы встряхивают до прекращения окрашивания свежей порции раствора в зеленоватый цвет, затем аллотрансплантаты выдерживают в растворе, содержащем смесь этанолмеркурхлорид: цетилпиридиний хлорид:натрий хлористый вода бидистиллированная (0,4-0,6) :(0,4-0,6) : (7,2-7,8) : 1991,0-992,0) в течение 6,0-6,5 ч

при 20-22° С и в том же растворе 168-336 ч при и далее аллотрансплантаты выдерживают в растворе, со держащем смесь фурацилин:трехзамещенный цитрат натрия:вода бидистиллированная (0,15-0,25):(99,0-101,0): (898,75-900,85) в течение 12-24 ч при 36,5-37,.

Кроме того, соотношение веса ткани к весу раствора берут 1:(25-27),

Сп ос об осуще с т вл яют ел едующи м образом.

Заготовленные в нестерильных условиях аллотрансплантатн подвергеиот стерилизации и консервированию в трех растворах, сначала в растворе № 1 (соотношение веса ткани к объему раствора 1:25-27), содержащем, вес.ч.:

Этанолмеркурхлорид0,8-1,2

Цетнлпиридиний хлорид0,8-1,2

Вода бидистиллированная 997,6-998,4 затем в растворе I .2 (соотношение веса ткани к объему раствора 1:25-27), Содержащем, вес.ч.;

Этанолмеркурхлорид0,4-0,6

Цетилпиридиний хлорид0,4-0,6

Хлористый натрий7,2-7,6

Вода бидистиллированная 991,0-992,0 W в р&створе № 3 (соотношение веса ткани к объему раствора 1:25-27), содержащем, вес.ч. 4 урацилин0,15-0,25 Цитрат натрия трехэамещенный99,0-101,0 Вода бидистиллированная898,75-900,85 Обработку сшлотрансплантатов в раст воре № 1 производят путем встряхивания в герметичном сосуде до прекращения окрашивания свежей порции растеьра в зеленоватый цвет. При этом, стерилизацию и консер вирование в растворе № 2 пршзвбдят в течение 6-6,5 ч при температуре от плюс 20° до плюс 22 Сив течени 168-336 ч при температуре от плюс 2 до плюс , а затем в течение 12-24 ч в растворе № 3 при температуре от плюс 36,5 до плюс 37,5 С. Пример. Через 20 ч после гибели донора S нестерильных условиях выделяют сегмент аорты Длиной 150 мм ипомещают в герметичный сосуд с раствором 1-25. Обработку трансплантата производят путем встряхивания при режиме 20 встр хйванйЙ ШнУУу7 Через 1, 5 кгнн. производят смену рас вора , ПосдГё ИрШрЩеййя ШрШШзв анй я 6-рй порции раствора в зеленоватый цвет Франсплантат переносят в раствор № 2 (соотношение веса ткани к объему раствора ) на 6 ч при температуре плюс , а затем транШЛШТат хранят в растворе № 2 168 ч при температуре плюс ЗС. По истечении указйнного срока транс плантат помещают на 20 ч в piacTBOp 3 (соотношение веса ткани к объе му раствора 1:25) при температуре плюс 37 С. , ... .... ; . :-x.v. ,; . .: . 1 Пойлё этого аортальныйаллотранс плантат извлекают из ге| м ётйчйЪ Ь сосуда с раствором № 3 и пойетцают на стерильную салфетку, смоченную свежей порцией раствора № 3. Сосуды, отходяьдае от аорты, перевязывает п ерд он ов ой ли гатур ой, от с туп я 2-3 ов ани я. ПбДГО двлён ный К оперативному использованию аортал ный алЛбтранспЛантат вшивают в предварительно созданный дефект аорты реципиента. В результате операций у ч ей пол ожи т ел ь ный эффект Срок наблюдения 4 года .после оперативного вмешательства. Пример 2, Через 16 ч npcJie W6e H донора в нестерильных условиях выделяют сегмент аорты длиной 140 NSi и пс) мещают в герметичный сосуд с раствором 1. Соотношение веса ткани к объему раствора составляет 1:27. Обработку трансплантата производят путем встряхивания при режиме 16 встряхиваний в минуту. После прекр щения окрашивания б-ой порции раст вора (смену раствора производят через 2 мин.) трансплантат переносят в раствор № 2 (сортнсдиение веса ткани к объему раствора 1:27) на 6 ч при температуре плюс , а затем трансплантат хранят прн температуре плюс .В сроки от 168 до 1440 ч с мдмента помещения аортального аллотрансплантата в раствор 2 при температуре плюс Зс исследуют изменение прочности и растяжимости этого сегмента, а также изучают количество клеточных ядер на единицу площади и содержание общего белка, в экстракте из егб гомогената. Контролем служит исходное состояние сегмента (до консервирования), Через 336 ч консервирования в растворе № 2 прочность составляет 104%, а растяжимость 107%, При больших сроках консервирования происходит падение прочности аортального сегмента (так через 1440 ч она составила 81%) при сохранении растяжимости на уровне 126%.- Количество клеточных ядер на единицу площади через 336 ч консервирования составляет в наружной оболочке аорты 80,77%, в средней оболс)чке аорты 88,82% и во внутренней 90,48% по сравнению с исходным состоянием (сегмент дб консервирования) . Через 720 ч консервирования количество клеточных ядер составляет в наружной оболочке 57,14%, в средней оболочке 65,22% и во внутренней 73,81%.. Концентрация общего белка в экстракте из гомогената консервИровайного сегмента через 336 ч падала до 18%, через 720 ч - до 7%, а через 960 ч - до 4% по сравнению с содержанием общего белка в экстракте из гомогената нативной .аорты. Предлагаенфлй Способ стерилизации и консервирования.сосудистых аллотрансплантатов позволяет, получить стерильнее сосудистые аллотрансплантаты с оптимальными биомеханически свойствами и обладающие сниженной антигенностью. Способ является более экономич- ым и простым по сравнению с известным. Возможность производить загоовку ткани в нестерильных условиях сключает необходимость использования специальной операционной. Применение этого способа йе требует орогостоящёй аппаратуры и реактивов. Формула изобретения 1. Способ стерилизации сосудистых аллотрансплантатов с одновременным консервированием путем последовательной обработки транспланта -- --.-. ,-,.... . . .S,.i..-.. - . .,.v.it..iff,u.-..

5651815e

TOB в растворах, о тличающий-1б,0-б,5 ч при 20-22 С и в том же с я тем; что, с целью упрощениярастворе 168-336 ч при и даспособа, вначале аллотрансплантатылее аллотрансплантаты выдерживают выдерживают в растворе, содержащемв растворе, содержащем смесь фурасмесь этанолмеркурхлоридгцетилпири-цилин:трехзамйденный цитрат натрия диний хлорид:бидистиллированная во-вода бидистиллированная s (0,15-0,25)i да (0,8-1,2):(О,8-1,5):(927,6-998,4)fS( 99,0-101,0 ):( 898,75-900,85 ) при этом аллотрансплан1аты ветряки- течение 12-24 ч при 36,5-37,. вают до прекращения окрашивания2 Способ по пЛ, отличаюсвежей порции раствора в зеленоватыйщ и и с я ffeM, что соотисмение цвет, затем аллотрансплантаты выдер- тканей к весу раствора берут живают в растворе, содержащем смесь юi-(25-27)

этанолмеркурхлорид.цетилпиридиний источники информации, принятые хорид:натрий хлористый:вода бидистил- во внимание при экспертизе лированная (0,4-0,6) : (0,4-0,6) :1. Фукс .Б. и Фукс Б,И. Oч.epJ7, 2-7,8) : (991, 0-992,0) , в течение ки морфсхлогии ткани . М., 1968.