Реактив для определения пораженности клубней картофеля фитопатогенной микрофлорой Советский патент 1979 года по МПК C12K1/00 

(54) РЕАКТИВ ДЛЯ КАРТОФЕЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОРАЖЕННОСТИ КЛУБНЕЙ ФИТОПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРОЙ

Изобретение относится к хемияюмине- сцентному анализу и может быть использовано при изучении различных вопросов, связанных с патологией картофеля. В последнее время широко используют биофизические методы для анализа живых объектов как in vivo так и in vitro . Сре ди них хемилюминесценгные метопы занимают особое место: они ггросты в реализации и позволяют быстро получать информацию о физиологическом состоянии изучаемого организма 1, Многие хемилюминесцентные реакция основаны на молельных растворах. Добавление изучаемого раствора к модели (реактиву) вызывает увеличение или ингибирование свечения. Известный реактив, широко используемый пля хемилгоминесцентных анализов, содержит люминОл, едкий натр и перекись J водорода 2. Этот реактив оказался совершенно, неэффективным при изучении патологии картс41ел«- так как уровень свечения -. не менялся при добавлении к нему клеточного сока больных и здоровцх клубней. Целью изобретения является создание реактива, позволяющего проводить эксПресс-аналтгз на выявление ранних стадий пораженности картофеля фитопатогенной микрофлорой по интенсивности хемилюми- несиенции. Для этого в реактив, содержащий люминол, перекись водорода и едкий натр, вводят бензидин при следующем соотношении компонентов, вес..%: 5,28-3,75 Бензидин Люмичол 2,03-1,66 Перекись водорода 14,2.5-11,65 Едкий натр Остальное К реактиву добавляют 5 мл клеточного сока, разбавленного дистиллированной водой в соотношении 1:24. Исходный раствор бензидина готовят следующим образом. В мерную колбу на 20О мл наливают 1ОО мл длсгиллированной вооы, дг багигяют 2.3 мл ледяной уксусной кислоты и -. ,.«y . ц . н Г,С -. 184 МГ очишенного бензипина. Далее копбу нагревают на водяной бане прк , постоянно взбалтывая. После полного расворения бенэиднна добавляют 5,5 г уксуснокиспого натрия, охлаждают и цоводят дистилггирсванной воцой до метки. Срок годности раствора шесть дней. Рабочий 2-10 раствор бензидина готовдт разбавлением. 2 мп исходного 5 10 ТА pfifcTBOpa бензядина в 500 мл дастиллиробанноА воды. ИсхШный О, О5 М раствор люминопа готовят растворением 0,1 г очишенного люминола в 10 мл 5%-ного На ОН. CpoJc годности раствора два дня. Рабочий 2- 10 Л раствор люминола в 3,2 10 -4,2-10 М по Oil готовят разбавгЬэнпем 1 мл исходного р.аствора люмйнЬла дистиллированной водой с добавлением мл 1 М Na ОН в объеме ЗОО мл. Срок годности раствора - два дня. -4 Рабочий 7, iM раствор перекиси водорода готовят разбавлением из 7, его раствора Для анализа раствор может быть использован в течение трех дней. Использование гфедлагаемого реактива для оггреаеления поражеяности .отубней картофеля фитопатогенноЯ микрофлорой обеспечизает следующие преимущества: а) провепение анализа по определению пораженности кл -бней каптофеля фитофло-. рой, сухой гнилью и другими эаболеванл - , - --... О .:.:r -мн за 3-4 мин, что позпсляег применять преолагаемый реактив в автсмат1Г4еском экспресс-анализе качества картофеля;. б) стабильность уровней хемилюминерцентного свечения пораженных фитопатогенной микрофлорой и здоровых клубней картофеля;.: в) возможность выявления ранних стадий пораженности клубней картофеля фнтопатогенной микрофлорой. Формула изобретения Реактив для определения пораженности клубней картсх еля фитопатогенной микрофлорой, содержащий люминол, перекись водорода и едкий натр, отличающийся тем, что, с целью проведения экспресс-анализа яа выявление ранних стадий пораженности картофеля, он содержит бензидин при следующем соотношении компонентов, вес.%: Бензидин 5,28-3,75 2.03-1,66 Люминол Перекись водорода 14,25-11,65 Остальное Едкий натр Источники информашш, принятые во внимание при экспертизе 1.Сб. Сверхслабые свечения в биологии, Изд-во МГУ, 1972. 2.Бабко А. К. и др. Хемилюминис- пентный анализ , Киев, 1966, с. 6О-22О.