Способ количественного определения витамина С Советский патент 1946 года по МПК C07D307/62 

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНА С

Заявлено, 29 сентября 1945 г. в Наркомздрав за № 5144 (34127) Опубликовано 31 октября 1946 г.

Известно много способов количественного определения аскорбиновой кислоты (витамина С) как чисто химическим, так и физикохимическим, биологическим и другими путями. Однако даже лучшие из этих способов, дающие удовлетворительные и совпадающие результаты определения, имеют в каждом отдельном случае свои существенные недостатки. Так, например;

1)индофенольный способ Тильмаиса и его модификации основаны на применении 2,6-дихлорфенолиндофенола, реактива очень нестойкого в растворах, титр которых необходимо проверять каждый день.

Кроме того реактив разлагается при низких значениях рН титрационной среды и является далеко не специфичным;

2)по способу . и Bonsignore применяется в качестве окислителя метиленовая синь, которая становится таковым только в особых условиях освещения, что требует специальной аппаратуры и осложняет анализ. Метод также

является далеко не специфичным для витамина С;

3)физико-химический способ - потенциометрический - довольно сложен в исполнении и не дает отчетливых результатов;

4)спектральный способ требует специальной аппаратуры, не всегда имеющейся в клиниках, и также сложен в своем выполнении;

5)биологический способ - испытание на морских свинках - является очень продолжительным (35-100 дней) и тоже далеко не специфичным, вследствие индивидуальной чувствительности животных и специфики организма каждого индивида.

Автор разработал и предлагает простой по выполнению и дающий совпадающие и точные результать способ определения аскорбиновой кислоты с применением доступных и постоянных в хранении реактивов.

Способ основан на известной способности солей окиси железа при повыщенной температуре быстро и количественно восстанавливаться аскорбиновой кислотой до солей закиси железа по вледукзщему уравнению:

с -он

О + 2 Fe- он

I сНОСН

СНгОН

Многократные титрования подтвердили это соотношение эквивалентов и соответствие 1 мл 0,0IN раствора соли трехвалентного железа 0,00088 мг аскорбиновой кислоты (молекулярный вес аскор биновой кислоты 176).

В качестве рабочего раствора берется 0,01 N раствор хлорного железа РеСЬ в 0,2N соляной кислоте. Титр его устанавливается иодометрически по методу Мора или Кольтгофа или по аскорбиновой кислоте, что дает более точный коэфициент поправки. Оптимальные условия определения: температура раствора 90°, рН его 4-4,5.;

Титрование ведется в присутствии индикатора роданида аммония 0,01 N раствором РеС1з из микробюретки до розового окрашивания экстракта, обесцвеченного от пигментов по способу Девяткина-Дорошенко (свинцом) или Букина (уксуснокислой ртутью). Удаление редуцируюш.их и пигментирующих веш;еств автор предлагает вести следующим образом: к экстракту витамина С добавляется азотнокислая ртуть (окисная) и через 30 секунд - роданид аммония. Последний переводит Hg в слабо диссоциированное (практически недиссоциированное) соединение, которое уже не будет взаимодействовать с аскорбиновой кислотой. После добавления роданида смесь быстро фильтруют в насыщенную сероводородом воду

с о

О+2 Fe- + 2Hс о

НС

носн

СН,ОН

линдр) и в эту смесь пропускают еще сероводород в течение 10 минут, после чего фильтрованием освобождаются от осадка HgS и полученный бесцветный фильтрат после нагревания без удаления HaS титруют 0,0 Ш раствором РеС1з. Сероводород в этих условиях не мешает титрованию хлорным железом, которое с ним не взаимодействует. Кроме того во время фильтрования и нагревания жидкости концентрация сероводорода становится незначительной и поэтому окисленная аскорбиновая кислота не успевает в момент титрования восстанавливаться.

Предлагаемый способ испытывался сравнительным титрованием водных растворов аскорбиновой кислоты: 2 - 6-дихлорфенолиндофенолом (реактив Тильманса), иодом и хлорным железом, причем были получены хорошо совпадающие в пределах ошибок опыта результаты определения. Наибольшие расхождения результатов не превышали + 1,32%.

Для создания кислой среды при анализе должна применяться соляная кислота, не содержащая железа; также все остальные применяемые реактивы должны быть свободны от железа. Условие это является, однако, необходимым при любом химическом способе определения витамина С, так как каждая соль трехвалентного железа будет взаимодействовать с аскорбиновой кислотой. до определенного объема жидкости (в точно градуированный ци//

Предлагаемый способ определения витамина С феррометрическим титрованием имеет следующие преимущества перед другими известными способами:

1)стойкость при хранении титрованного раствора РеС1з в 0,2N соляной кислоте;

2)простота и быстрота опредаления;

3)доступность реактивов - хлорного железа и роданистого аммония;, ,

4)высокая чувствительность индикатора;

5)относительная специфичность реактива, так как FeCU не взаимодействует с гидролизованными сахарами, сероводородом и другими восстановителями, которые реагируют с дихлорфенолиндофенолом.

Предмет изобретения

Способ количественного определения витамина С окислением его солями окиси железа, отличающийся тем, что навеску исследуемого продукта титруют раствором хлорного железа при температуре около 90° и рН порядка 4-4,5 в присутствии роданистого аммония в качестве индикатора до розового окрашивания и по расходу раствора хлорного железа устанавливают содержание витамина С - в исследуемом продукте.