Изобретение относится к производству ферментов и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Известен способ получения полифункцио нальных ферментов путем смешивания равных объемов водных растворов исхопных ферментов l j. Однако такой способ сложен и трудоемок. Цель изобретения - упрощение способа Это достигается тем, что полученную смесь замораживают при температуре минус 77 - минус 78°С в течение 4-12 су тсж. Способ осуществляется следующим обра зом. 3 мл смеси водных растворов ферментов (концентрация 1 мг/мл) помещают в сосуд Дюара с твердой углекислотой. Пооле изотермической обработки холодом при минус 77 - минус в течение 4-12 суток растворы оттаивают в бане из диотиллированной воды при комнатной температуре, затем подвергают ({ акционированию на колонке с сефадексом. .Получение гибридных ферментов провопят в различных системах ферментативных смесей, в смесях лизоцима и рибонуклеазы, лизоцима и ct- амилазы оС-амилазы и рибонуклеазы. Были выаеле 1пы активные бифункциональные молекулы гибридных ферментов, которые имели каталитические свойства каждого из компонентов. В смеси из трех ферментов (лизоцим, с(,-амилаза, рибонуклеа- за) получен трифункциональный фермент. Тестами для определения ферментативных активностей служат расщепление полимерной РНК (возрастание поглощения раствором оптического излучения с длиной волны 260 им, измеряемое на спектрофотометре СФ-16) - для рибонуклеазы, возрастание пропускаемости света 45О им суспензией Micrococcus E sode kiicus - для лизопима и гидролиз амилазы - для амилолитической активности.
Для измерения оптического поглощения, растворами ферментов используют спектрофотометр СФ-16.
Результйты препставлены в таблице. Как видно из таблицы., способ обеспечивает высокий выход (8-24%) гибридного s продукта, сохраняющего сьойства отдельных
компонентов. Он прост в осуществленнн, позволяет получить высокий по сравнению с известными способами (4-6%) выход полифункциональных ферментов с высокой активностью без применения химических сшивающих агентов и дорогостоящих установок для облучения.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ "МОБЕЛИЗ" И ПОЛУЧЕННАЯ ЭТИМ СПОСОБОМ БАД "МОБЕЛИЗ" | 2008 |
|
RU2366294C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАД ИЗ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ КАТИОННЫХ БЕЛКОВ МОЛОКА И ПОЛУЧЕННАЯ ЭТИМ СПОСОБОМ БАД | 2006 |
|
RU2318406C1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИЛИЗОЦИМНОЙ АКТИВНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ | 1997 |
|
RU2126051C1 |
| ЭКСПРЕСС-СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНГИБИТОРОВ БУТИРИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ В ВОДЕ И ВОДНЫХ ЭКСТРАКТАХ | 2019 |
|
RU2704264C1 |
| ЗУБНАЯ ПАСТА, СОДЕРЖАЩАЯ ЛАКТУЛОЗУ, БЕТАИН, ХОНДРОИТИН СУЛЬФАТ И ФЕРМЕНТЫ: ПАПАИН, ЛИЗОЦИМ, РИБОНУКЛЕАЗУ И ЛИДАЗУ | 2007 |
|
RU2355420C2 |
| Способ получения иммобилизованных ферментов | 1974 |
|
SU578893A3 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТОВ ФАГА SPZ7 | 2009 |
|
RU2460537C2 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ЛИЗОЦИМА СЛЮНЫ | 2000 |
|
RU2170932C1 |
| ЗУБНАЯ ПАСТА, СОДЕРЖАЩАЯ ЛИПОСОМЫ | 2007 |
|
RU2381021C2 |
| ПОЛИПЕПТИДЫ С ЛИЗОЦИМНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И ПОЛИНУКЛЕОТИДЫ, КОДИРУЮЩИЕ ИХ | 2012 |
|
RU2619051C2 |
69
Рибонуклеаза 8 65 Рибонуклеаза + сС-амилаза 4,5 50 50 90 Лизоиим + 5,0 6О 54 оС-амилаза Лизоиим + рибонукле за + ot-ами6О . 12 10 60 лаза
Формула изобретения Способ получения полифункциональных ферментов путем смешивания равных объемов водных растворов исходных ферментов с последующим сшиванием их , отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, сшивание проводят замора12,5 56
24 30 26
54
живанием смеси при Температуре минус минус 78 С в течение 4-12 суток.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
LBiodiemie-tr 1974, 13, № 4, 698-702. 50 12,5 34 36 32 46 9,0 .50 16,0 36 39 34
